Аллергия на saccharomyces cerevisiae (backerhefe) у подростков

Содержание страницы:

Влияние дрожжей Saccharomyces cerevisiae на воспалительные заболевания кишечника

ВЛИЯНИЕ ПЕКАРСКИХ ДРОЖЖЕЙ НА ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ КИШЕЧНИКА

Обыкновенные пекарские дрожжи Saccharomyces cerevisiae могут ухудшить симптомы ВЗК при болезни Крона

В течение последнего десятилетия гастроэнтерология как наука испытала, скажем так, «перерождение», поскольку все больше и больше исследований сосредотачиваются на изучении роли микробиома в здоровье человека.

Ученые из Университета медицинских наук штата Юта использовали в своем исследовании мышей, чтобы показать роль дрожжей в усугублении симптомов воспалительных заболеваний кишечника.

Воспалительное заболевание кишечника ( ВЗК ) – это аутоиммунное заболевание, характеризующееся хроническим воспалением желудочно-кишечного тракта, в результате чего появляются сильная диарею, боли в области живота, усталость и потеря веса. В течение нескольких десятилетий врачи использовали дрожжевые антитела, особенно антитела к клеточной стенке дрожжей Saccharomyces cerevisiae, чтобы дифференцировать болезнь Крона (БК) и неспецифический язвенный колит (НЯК) (т.е. определиться с диагнозом между двумя вариантами ВЗК). Однако, не было понятно, какую именно роль играют дрожжи в жизни больного ВЗК.

Прим. ред.: Дифференциальная диагностика — в медицине способ диагностики, исключающий не подходящие по каким-либо фактам или симптомам заболевания, возможные у больного, что в конечном счёте должно свести диагноз к единственно вероятной болезни. В популярной культуре дифференциальная диагностика используется в телесериале «Доктор Хаус», самим Хаусом и его командой. Методом исключения они быстро ставят правильный диагноз, предварительно написав симптомы и возможные болезни на доске.

«До недавних пор была огромная пропасть в нашем понимании роли дрожжей при ВЗК и общем самочувствии человека» — рассказала June Round, доцент кафедры патологии и доктор философии в Университете медицинских наук штата Юта.

В настоящее время несложно найти информацию о многих типах дрожжей в желудочно-кишечной системе человека, но исследовательская группа выбрала лишь два их вида, являющимися общими для кишечной микробиоты здоровых людей и больных НЯК или БК.

Saccharomyces cerevisiae, также известные как хлебопекарные дрожжи, встречаются в окружающей среде и в хлебобулочных изделиях. Rhodotorula aurantiaca же обычно находятся в молоке и фруктовом соке.

В этом исследовании ученые дали по каждому типу дрожжей мышам, у которых предварительно были искусственно (с помощью химикатов) вызваны подобные с ВЗК симптомы. Симптомы усиливались только у тех мышей, которых кормили Saccharomyces cerevisiae.

«Мыши, которых кормили Saccharomyces cerevisiae, испытали значительную потерю веса, диарею, кровавый стул, точно так же, как и человек с воспалительным заболеванием кишечника» — рассказывает Tyson Chiaro, аспирант лаборатории.

Для того, чтобы расшифровать полученные сведения, ученые исследовали кал мышей, которых кормили Saccharomyces cerevisiae. В итоге, в кале этих мышей была обнаружена более высокая концентрация богатых азотом соединений, называемых пуринами, чем у мышей, которых кормили Rhodotorula aurantiaca.

В отличие от других видов дрожжей, Saccharomyces cerevisiae не может разрушать пурины, которые накапливаются в кишечном тракте и переходят в другое соединение (мочевую кислоту). Мочевая кислота усугубляет воспаление, которое может ухудшить симптоматику ВЗК.

В дополнение к этому исследованию, ученые исследовали образцы сыворотки крови здоровых взрослых людей.

«Мы обнаружили, что у каждого образца человеческой крови с высокими антителами к Saccharomyces cerevisiae также были высокие уровни мочевой кислоты» — сообщает Tyson Chiaro.

Несмотря на то, что только у части пациентов с ВЗК было очень много дрожжей Saccharomyces cerevisiae, результаты этого исследования поддерживают идею того, что дрожжи усугубляет болезнь, и что лекарство может быть уже на пороге создания.

Чтобы проверить эту теорию, ученые дали подопытным мышами Аллопуринол (препарат, применяемый для предотвращения образования мочевой кислоты у пациентов с подагрой). Аллопуринол значительно уменьшил воспаление кишечника у этих мышей.

«Наша работа предполагает, что если мы сможем заблокировать механизм, приводящий к производству мочевой кислоты у пациентов с ВЗК с высокой концентрацией антител к Saccharomyces cerevisiae, то может появиться новый вариант лечения их заболевания» — поясняет доктор Round.

June Round хочет продолжить работу, над этим вопросом, изучив взаимодействие бактерий и дрожжей в кишечнике, а также провести клинические испытания Аллопуринола, проверив его влияние на симптоматику воспалительного заболевания кишечника человека.

«Дрожжи и бактерии могут влиять на биологию друг друга в нашей кишке, но мы не знаем, как это взаимодействие влияет на человеческое заболевание. Наша команда продолжит изучение роли кишечных микроорганизмов в нашем самочувствии» — сказала в заключение June Round.

Статья в журнале:

Tyson R. Chiaro, Ray Soto, W. Zac Stephens, Jason L. Kubinak, Charisse Petersen, Lasha Gogokhia, Rickesha Bell, Julio C. Delgado, James Cox, Warren Voth, Jessica Brown, David J. Stillman, Ryan M. O’Connell, Anne E. Tebo, June L. Round. A member of the gut mycobiota modulates host purine metabolism exacerbating colitis in mice . Science Translational Medicine, 2020

+7 (926) 304-45-34

Сахаромице́ты

Сахаромице́ты (Saccharomycetes) — класс сумчатых грибов.

Систематика

Сахаромицеты — единственный класс подотдела Saccharomycotina, называемого также «гемиаскомицетами» или «голосумчатыми» (подотдел Hemiascomycotina или класс Hemiascomycetes). К классу сахаромицетов, в свою очередь, относят один порядок Сахаромицетовые (Saccharomycetales).

Вплоть до конца XX века к группе голосумчатых относили аскомицеты примитивного строения, у которых не образуются плодовые тела, а сумки формируются на мицелии или из отдельных клеток (у дрожжевых форм), и разделяли эту группу на 4 порядка:

  • Эндомицетовые (Endomycetales);
  • Тафриновые (Taphrinales);
  • Протомицетовые (Protomycetales);
  • Аскосферовые (Ascosphaerales).

Впоследствии Тафриновые и Протомицетовые были выделены в самостоятельный класс Тафриномицетов (Taphrinomycetes) (синоним Археаскомицеты, Archiascomycetes), Аскосферовые перенесены в класс Эуроциомицеты (Eurotiomycetes). К семейству сахаромицетовых относили и делящиеся дрожжи, выделенные затем в самостоятельный класс Schizosaccharomycetes.

Описание

Вегетативное тело сахаромицетов часто представляет собой отдельные почкующиеся клетки, то есть дрожжевую форму, в определённых условиях они могут образовывать псевдомицелий, есть и виды, имеющие настоящий мицелий. Некоторые виды диморфны — в зависимости от условий развиваются в мицелиальной или дрожжевой форме. К мицелиальным сахаромицетам относится, например, семейство Диподасковые (Dipodascaceae), виды которого встречаются в слизистых истечениях растений, на древесине, в почве, в ассоциациях с беспозвоночными животными (насекомые, кольчатые черви).

Размножение — вегетативным, бесполым и половым способом, но вегетативное размножение (почкованием или фрагментацией гиф) у сахаромицетов часто трудно чётко отграничить от бесполого (образования конидий).

Половой процесс — копуляция вегетативных клеток, при которой после слияния плазмы (стадии плазмогамии) сразу следует слияние ядер (стадия кариогамии), дикариотическая фаза отсутствует. Аскогенные гифы и плодовые тела не образуются, зигота развивается непосредственно в сумку или образует аскофор — вырост, дающий одну или несколько сумок. У мицелиальных представителей известна и гаметангиогамия — так, у Dipodascus albidus образуются пары многоядерных гаметангиев различных размеров, сливается, однако, только одна пара ядер, а остальные дегенерируют. У других видов (Eremascus fertilis, Dipodascus aggregatus) известны гаметангии в виде одноядерных клеток или отростков клеток, содержащих по одному ядру. У вида Endomycopsis vernalis, встречающегося на истечениях сока из деревьев, наблюдается апомиксис — сумки развиваются не из зиготы, а из вегетативных клеток.

Сумки тонкостенные, выход спор осуществляется в результате разрыва или лизиса оболочек сумок.

Смена ядерных фаз в жизненном цикле у разных представителей различна. Например, у Saccharomyces cerevisiae длительное время происходит почкование гаплоидных клеток, после копуляции продолжается почкование в диплоидной фазе, а в благоприятных условиях диплоидные клетки образуют сумки. У видов, являющихся гаплобионтами диплоидизация происходит непосредственно перед формированием сумок, у других же, напротив, гаплоидная фаза представлена только аскоспорами, или даже копуляция происходит между спорами в сумке (Saccharomycodes ludwigii).

ЭКОЛОГИЯ

Условия, в которых обитают сахаромицеты бывают очень различными.

Хорошо известны представители, живущие в сахаристых жидкостях — соках деревьев, плодов, некоторые способны развиваться даже в мёде (род Zygosaccharomyces). Такие виды могут вызывать спиртовое брожение сахаров (в анаэробных условиях, то есть при недостаточном доступе воздуха) или их окисление. Некоторые виды дрожжей спиртового брожения известны только в культуре. Все эти грибки сбраживают, в первую очередь, глюкозу, другие моно- и олигосахариды. Существуют так называемые «молочные дрожжи» (род Kluyveromyces), сбраживающие лактозу и участвующие в образовании молочнокислых продуктов. Для всех дрожжей характерен и аэробный (дыхательный) метаболизм, поэтому при доступе воздуха углеводы не сбраживаются до спирта, а окисляются.

Есть сапротрофы, обитающие на поверхности плодов и растительных остатков, в почве. Большинство таких видов являются слабобродящими или вовсе не способными к спиртовому брожению, они обладают преимущественно или только аэробным обменом веществ и окисляют сахара и другие питательные субстраты.

Есть виды, тесно связанные с насекомыми, так, Dipodascus aggregatus обитает в личиночных ходах жуков-короедов, запах этого гриба привлекает жуков, которые распространяют липкие аскоспоры. Грибки из рода Pichia также известны в ассоциациях с насекомыми-ксилофагами, некоторыми комарами, плодовыми мушками (дрозофилами). У дрозофил дрожжи постоянно живут в кишечнике и при откладке яиц попадают на поверхность плодов. Личинки питаются грибковой биомассой, которая разрастается к моменту выхода их из яиц. Schwanniomyces cantarellii и Schwanniomyces formicarius (оба вида раньше относили к роду Debaryomyces) поселяются в муравейниках рыжего лесного муравья (Formica rufa), в муравьиных гнёздах эти дрожжи могут обнаруживаться в концентрации более 10 миллионов клеток на грамм субстрата. Насекомым дрожжевые грибки необходимы для завершения своего жизненного цикла, некоторые в стерильных условиях, в отсутствии грибка, погибают.

Виды рода Candida встречаются как представители нормальной микрофлоры человеческой кожи и слизистых оболочек, при дисбактериозах могут становиться патогенными, вызывая заболевания различной степени тяжести — кандидозы.

Считается, что галофилов среди сахаромицетов нет, виды, способные размножаться при повышенных концентрациях соли относят к галотолерантным (солеустойчивым). К ним принадлежат дебариомицеты, или «дрожжи де Бари» (род Debaryomyces), некоторые из них могут жить в рассолах, близких по концентрации к насыщенным. Дебариомицеты образуют «плесень» на поверхности сыров, колбасных изделий, солонины, плёнки на поверхности рассолов. Они высеваются также при микозах кожи у человека и животных, однако патогенность их не выяснена.

К паразитам растений относят группу грибков, которую раньше выделяли в семейство спермофторовых (Spermophthoraceae), они развиваются преимущественно на плодах и вызывают повреждения, называемые «стигматомикозами» (представители родов Eremothecium, Nematospora).

Некоторые представители рода Мечниковия (Metschnikowia), или «дрожжей Мечникова», являются паразитами пресноводных и морских беспозвоночных. Наземные представители этого рода обнаруживаются в нектаре цветков и на поверхности различных органов растений, вероятно, часть их жизненного цикла проходит в теле насекомых-переносчиков.

Оптимальная температура жизнедеятельности различна для разных представителей сахаромицетов. В тропических регионах из природных источников выделяются дрожжи, активно бродящие при 35—40°C, теплолюбивые представители есть и среди культурных рас, используемых в пищевой промышленности. В умеренном климате широко распространены виды, обитающие на весенних истечениях соков из деревьев — дуба, берёзы, клёна (Magnusiomyces magnusii [ syn. Endomyces magnusii], Endomyces vernalis, «дрожжи Надсона» — род Nadsonia). Эти виды прекращают бродить при температуре выше 25°C. От температурных условий может зависеть и характер размножения грибков, это свойство используют для проверки чистоты культурных рас, применяемых в виноделии: образцы культуры инкубируют при 35°C и при 15—20°C, если наблюдается образование сумок при пониженной температуре, это свидетельствует о загрязнении образца дикими дрожжами.

Виды, постоянно обитающие в кишечнике теплокровных животных характеризуются необычными потребностями: высокое потребление витаминов и аминокислот, особые требования к кислотности среды, газовому составу. Так, Cyniclomyces guttulatus из кишечника кролика нормально растёт только в кислой среде при pH 2,0—5,6, в атмосфере с содержанием кислорода 2%, углекислого газа 10—15% и температуре 30—40°C. По этой причине вид длительное время не поддавался искусственному культивированию и изучению.

Сахаромицеты Saccharomyces cerevisiae.

Иллюстрация из Энциклопедического словаря Брокгауза и Ефрона

Saccharomyces boulardii. Дрожжи Сахаромицеты буларди. Препараты. Энтерол для детей

Сахаромицеты буларди

Сахаромицеты буларди (латинское название – «Saccharomyces boulardii») – одна из разновидностей одноклеточных дрожжевых грибков, принадлежащих роду Сахаромицеты, которые способны уничтожать различные грибковые инфекции, а потому могут быть очень эффективным средством в восстановлении здоровья особенных детей

Вегетативное тело данных микроорганизмов имеет дрожжевую форму и представляет собой обособленные клетки, которые размножаются почкованием, бесполым или половым способами
Сахаромицеты могут обитать в различных сахаристых жидкостях, включая сок плодов, деревьев и даже мед
Также эти грибы способны жить в кожуре плодов, в растительных остатках, в болотистых, луговых, черноземных почвах, в телах насекомых

Свое название сахаромицеты буларди получили в честь французского ученого по имени Генри Буларди
Именно он, находясь в Индокитае и наблюдая за местным населением, заметил, что они используют кожуру тропических плодов в качестве лекарства против целого ряда пищеварительных расстройств
Буларди стал изучать этот продукт и, в результате, выделил из него сахаромицеты, о которых идет речь в данной статье

Данный вид дрожжевых грибков отличается от своих собратьев тем, что он не разрушается под действием желудочного сока, то есть, является резистентным к его кислой среде, а потому, попадая в организм человека, сахаромицеты в целости доходят до кишечника
По этой причине их часто используют в качестве пробиотиков, которые в большинстве своем (лактобактерии, бифидобактерии, энтерококки) разрушаются кислотами желудочного сока

МОS (маннанолигосахариды) -это олигосахарид из клеточных стенок пекарских дрожжей
Они не дают прилипать бактериям к эпителиальным клеткам и сокращают их размножение

Saccharomyces boulardii

Также очень важен и тот факт, что дрожжи сахаромицеты не приживаются в кишечной флоре
То есть, вы пропиваете курс таких препаратов, а спустя несколько дней (обычно от 2 до 5) они уже выводятся из организма и обнаружить присутствие их в кале невозможно
Кроме того, грибы сахаромицеты не способны распространяться по телу человека за пределами кишечника и не влекут за собой никаких изменений в состоянии его слизистой оболочки, а также они не проникают в другие органы

Попадая в кишечник, эти микроорганизмы увеличивают его ферментативную функцию за счет активизации эпителия данного органа
Так, прием препаратов на основе сахаромицетов буларди способен поднять активность мальтазы на 75%, сахаразы – на 82%, а лактазы – на 77%
Особенно ценят эти грибки за их губительное воздействие на различные виды патогенных микроорганизмов – в частности, на кандиду, клостридии, сальмонеллу, шигеллу, стафилококк, синегнойную и кишечную палочки, клебсиеллу и т.п.
Вот почему лекарственные средства с сахаромицетами нередко используются в качестве противодиарейного и антимикробного средства

Сахаромицеты вред

Важно: давать детям пробиотики сахаромицеты не ВМЕСТО, а ВМЕСТЕ с другими пробиотиками!

Основная функция сахаромицетов буларди – поддерживать оптимальные условия для основных бактерий, которые находятся в нашем кишечнике
А потому их следует принимать только в сочетании с лакто- и бифидобактериями
Если давать эти дрожжевые грибы ребенку с сильным дисбактериозом отдельно от указанных пробиотиков, они могут навредить ему
Дело в том, что при серьезных нарушениях кишечной микрофлоры сахаромицеты, попадая в данный орган, начинают в нем колонизироваться и способствовать еще большему его закислению

При этом свою положительную роль в нашем организме эти грибки все же играют – они действительно вытесняют все перечисленные выше грибковые инфекции, но, будучи сами дрожжами, они прикрепляются к ворсинкам кишечника или к его эпителию, что ведет к новым повреждениям органа

Таким образом, сахаромицеты можно считать дополнительным, вспомогательным пробиотиком, который обязательно следует употреблять наряду с основными препаратами прибиотического действия
Тогда они подготовят почву для приживания полезных бактерий, и кишечная флора постепенно будет восстанавливаться

Пьют сахаромицеты буларди курсами по одному месяцу, а затем устраивают 30-дневный отдых организму и снова повторяют их прием, но лишь в том случае, если состояние ребенка от приема данных препаратов действительно улучшается

Если состояние кишечной микрофлоры удовлетворительное, можно принимать эти грибки по схеме – пить в течение трех недель каждые три месяца

Врачи о сахаромицетах

Всемирная гастроэнтерологическая организация еще в 2008 году в своем труде на тему «Пробиотики и пребиотики. Практические рекомендации» отметила, что сахаромицеты буларди эффективны в лечении острой и антибиотико-обусловленной диареи у детей
Замечено, что препараты и биологически активные добавки на их основе снижают длительность данного процесса в целом на сутки, а также уменьшают его интенсивность

Сахаромицеты буларди препараты

Лекарственные средства, изготовленные с применением сахаромицетов буларди, относятся к категории препаратов, которые призваны нормализовать микрофлору кишечника, а также входят в список противодиарейных, противомикробных, противопаразитарных и противоглистных средств

Наиболее известный препарат с этими дрожжевыми грибками на территории стран бывшего СНГ выпускается французской фармацевтической компаний Biocodex и называется Энтерол (в Америке он известен под торговой маркой Florastor)
Это лекарственное средство бывает в виде капсул и порошка для приготовления суспензии

Энтерол для детей не только регулирует баланс кишечной микрофлоры, уничтожая патогены, но и усиливает кишечный иммунитет, способствует производству специализированного иммуноглобулина, нейтрализует вредное действие клеточных и кишечных токсинов, устраняет диарею

Важной особенностью этого препарата является его устойчивость к антибактериальным средствам, а потому его можно принимать наряду с сильными антибиотиками
С помощью сахаромицетов буларди микрофлора после них будет восстанавливаться быстрее

Данное лекарство рекомендуют давать детям старше 1 года и взрослым, у которых наблюдаются дисбактериоз, колиты различной этиологии, синдром раздраженной кишки, различные виды диареи

Следует иметь в виду, что благотворное воздействие Энтерола на организм значительно уменьшается, если принимать его вместе с горячими блюдами или напитками, так как высокая температура разрушает структуру сахаромицетов

Очень важно внимательно отслеживать состояние ребенка, которому вы даете данный препарат
Если в день приема или на следующие сутки его состояние не стало лучше или же оно, наоборот, усугубилось (например, в кале вы заметили слизь или кровяные прожилки), нужно прервать курс и обратиться за помощью к специалисту

Курс Энтерола должен сопровождаться обильным питьем в течение дня, особенно если вы используете его в качестве противодиарейного средства

Среди побочных эффектов, которые может повлечь за собой прием препарата называют аллергические реакции, а также неприятные ощущения в области живота
Если они имеют место быть, отменять курс сахаромицетов не стоит

Энтерол нельзя давать детям при наличии у них центрального венозного катетера, чтобы избежать развития грибковой инфекции
Противопоказанием к приему средства также является индивидуальная непереносимость его компонентов

БАДы на основе сахаромицетов буларди – OptiBac, DiarSafe, Ultra Levure

Сахаромицеты буларди отзывы

Вот что пишут о препаратах на основе этих микроорганизмов родители особенных детей, которые идут по пути биомеда

Мы брали качественный препарат, но моему сыну он не подошел, так как особых улучшений у ребенка не было
Мне кажется стул был слабее, а еще появилась на щеках сыпь, но о ней меня сразу предупреждали
В общем, не наша тема

Я давала сахаромицеты с MOS – маннанолоигосахаридами, первые уничтожают патогенов, а вторые мешают им прикрепляться к кишечным стенкам

Моей дочке очень помогли сахаромицеты – именно после их курса у нее начались улучшения: реакция на пищу ушла, позаживали расковыренные ранки на конечностях, осознаннее вроде стала, речь получше, стимов меньше
Правда, потом был откат, но все же в целом я довольна

Начали вводить по полкапсулы сахаромицетов дважды в день, пошли очень легко, без проблем, дозы увеличивала быстро, и ребенок как будто ожил – стал интересоваться миром, заниматься своими детскими делами, затуманенность во взгляде прошла и даже отзывался на имя
Похоже, кандида отступила!

А у моего от сахаромицетов с пробиотиками стул стал еще хуже – жидкий и частый, иногда по 3-4 раза в день
Дозу уменьшила с половины капсулы до трети и вроде получше стало – кал оформился хотя бы…
Наверное, пока стоит отменить их совсем

Мой сын после приема сахаромицетов становится гиперактивным и неуправляемым – рычит, бегает, кусается
Но зато они помогают нам с запорами – кал мягче стал

На Айхербе купила хорошие, но нам не подошли
Такое бывает
Каждый отдельный минерал и витамин всегда долго и нудно проверяешь на ребенке, какая форма ему подойдет
На сахаромицеты у нас была обычная для нас реакция — красные пятна на лице
И по моему слабило

Лечение аутизма у детей. Аутизм. Метод восстановления

Они насыщают организм необходимыми ферментами, витаминами и микроэлементами
Также есть продукция, с помощью которой токсины после медикаментозного лечения без проблем выведутся из организма

Отказ от ответственности
Информация, представленная в этой статье, предназначена только для информирования читателя
Она не может быть заменой для консультации профессиональным медицинским работником

Аллергия на saccharomyces cerevisiae (backerhefe) у подростков

ПАТОГЕНЕЗ АЛЛЕРГИИ К CANDIDA SPECIES (ОБЗОР)

НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования, Россия

Грибы рода Candida могут быть причинными аллергенами за счет маннана клеточной стенки и протеинов цитоплазмы, включая кислую протеазу Candida albicans, индуцирующих аллергические реакции немедленного, иммунокомплексного и замедленного типов. Распространенность аллергии к Candida spp. обусловлена частотой колонизации этими грибами желудочно-кишечного тракта, слизистой оболочки влагалища и некоторых других участков тела, а также – наличием у Candida перекрестно реагирующих антигенов с рядом других грибов: Saccharomyces cerevisiae, Malassezia furfur и пр. Механизм развития аллергии к грибам рода Candida имеет свои специфические особенности. Аллергия к грибам этого рода утяжеляет течение атопических заболеваний и кандидоза. Применение антифунгальной терапии, направленной на ликвидацию очагов кандидоинфекции, а также специфическая иммунотерапия, часто оказываются эффективными у таких больных.

Ключевые слова: аллергия, Candida, микогенная аллергия, микогенная сенсибилизация

PATHOGENESIS OF ALLERGY TO CANDIDA SPECIES (REVIEW)

Kashkin Research Institute of Medical Mycology, Saint Petersburg Medical Academy of Postgraduate Education, Russia

The yeasts Candida spp. are the causative allergens in patients with allergic diseases. Mannan of cell-walls, proteins of cells included acid protease of Candida albicans are allergens, inducing immediate, immune complex depended and syndromic delaу hypersensitivity reactions. Prevalence of allergy to Candida spp. stipulates by frequency of colonisation of the human body, particularly of gastrointestinal tract and vaginal mucosae with these fungi and the fact of availability of cross reacting allergens to other fungi: Malassezia furfur, enzyme enolase of the baker’s yeast (Saccharomyces cerevisiae) and so on. Mechanism of development of Candida allergy has the own special features. Allergy to Candida may aggravate clinical signs of atopic diseases and candidosis. Patients treatment patients with symptoms of allergy to Candida with antifungal therapy or with Candida vaccines often gives good clinical results.

Key words: allergy, Candida , mycogenic allergy, mycogenic sensibilization

В последнее время во всех развитых странах мира отмечается неуклонный рост аллергических заболеваний. Показатели частоты сенсибилизации к грибам варьируют в широких пределах: от 2% до 60% в зависимости от вида гриба и принадлежности пациентов к группам риска развития микогенной аллергии [1].

Грибы, наряду с другими аллергенами, могут вызывать у людей микогенную сенсибилизацию и аллергию. Индукция того или иного типов аллергических реакций во многом определяется исходным состоянием иммунной системы и особенностями поступления аллергена в организм. Полагают, что аллергия к грибам рода Candida может протекать по любому из 4 типов аллергических реакций соответственно классификации Гелла и Кумбса (Gell H.G.H. и Coombs R.R.A., 1975) [2]. К настоящему времени четко доказана возможность развития кандидоаллергии по I, III и 1V типам реакций.

Различные компоненты Candida spp. обладают не одинаковыми аллергенными свойствами. Белок-содержащие компоненты грибной клетки (цитоплазматические белки, кислые протеазы Candida albicans) преимущественно индуцируют развитие немедленного (I) и замедленного (IV) типов аллергических реакций, гликопротеины клеточной стенки в большей степени стимулируют синтез не реагиновых антител и могут вызывать иммунокомплексный (III) тип реакции [3-7].

I тип аллергической реакции к Candida опосредуется преимущественно антителами, принадлежащими к IgE. Известно также участие в этой реакции антител субкласса IgG4, однако последние имеют меньшее значение в реализации немедленной аллергии. Если IgE прочно фиксируется в тканях и сохраняется там в течение несколько недель, то IgG4 – не более 4 часов, при этом для достижения патофизиологического эффекта количество IgG4-антител должно быть в 300 раз больше, чем IgE. В тоже время, синтез специфических IgG4 требует активного участия IL-4, в связи с чем появление антител этого класса является свидетельством изменения соотношения «Тх1/Тх2», в пользу Тх 2 типа, что, естественно, неблагоприятно влияет на течение кандидоза. Действительно, отмечают повышение уровня специфических IgG4 именно на фоне длительной персистенции в организме кандидоинфекции [8-11].

При хроническом кандидозном вульвовагините отмечено, что IgG4-антитела к C. albicans у женщин с моноинфекцией, вызванной Candida spp., выявляются на 69,2-83,3% (в зависимости от фонового состояния больных) чаще, чем у женщин с хроническом вульвовагинитом кандидо-бактериальной или кандидо-протозойной этиологии [12]. Причины описанного явления в настоящее время остаются не ясными.

Для выявления реакций немедленного типа определяют содержание общего и специфического IgE, исследуют реакции дегрануляции базофилов и тучных клеток, высвобождения гистамина в ответ на действие специфического аллергена, уровни цитокинов, участвующих в специфическом Тх (Т-хэлперном) ответе 2 типа при стимуляции мононуклеаров специфическим аллергеном, а также – реакцию на кожные пробы. В целях диагностики гиперчувствительности немедленного типа к Candida наиболее часто определяют содержание специфического IgE в сыворотке крови. Достоинством метода является удобство постановки теста, стандартность метода, его безопасность (в отличие от кожных проб). Однако повышение концентрации IgE к аллергену гриба встречается чаще, чем положительные реакции высвобождения гистамина и гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) в кожных тестах. Такое несоответствие между результатами отдельных тестов может быть связано с неспецифическим взаимодействием аллергенов с карбогидратной частью молекул IgE, а также низкой биологической активностью последних, обусловленных их невысокой аффинностью [5].

К настоящему времени установлены два основных механизма, способствующих развитию аллергической реакции I типа: во-первых, немедленная аллергия может развиваться по классическому типу — вследствие преобладания цитокинов, активирующих Тх 2; во-вторых, развитие ГНТ может быть результатом снижения продукции IFN–γ (синтезируемого преимущественно Тх1), что нарушает состояние баланса между Тх 1 и Тх 2 в пользу последних. Развитие сенсибилизации немедленного типа к C. albicans по второму сценарию описано, в частности, при атопическом дерматите (АД). У таких пациентов не повышен синтез IL-4 в ответ на стимуляцию лимфоцитов аллергеном гриба. Напротив, продукция IFN-γ значительно снижена, при этом имеет место отрицательная корреляция между продукцией IFN-γ мононуклеарными клетками, активированными аллергеном гриба, и уровнем специфического IgE в сыворотке крови [13]. Механизмы, лежащие в основе данного эффекта, к настоящему времени не изучены; возможно, он является следствием снижения ингибирующего действия IFN-γ на дифференцировку Тх2 из Тх0 и на активацию пролиферации Тх2 цитокином IL-4.

Аллергическая реакции III (иммунокомплексного) типа к Candida возникает в результате активации комплемента иммунными комплексами, фиксированными в тканях. Как правило, эта реакция сопровождается увеличением в сыворотке крови титров комплемент-фиксирующих антител к антигену гриба, снижением активации комплемента по классическому пути и концентрации отдельных компонентов комплемента, участвующих в реализации реакции III типа. Содержание промежуточных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИКп), обладающих наиболее повреждающим действием на ткани, увеличено не постоянно, что зависит не только от уровня их накопления и элиминации, но и от выраженности транссудации белков из сыворотки крови в «шоковые» органы, где протекает аллергическая реакция. У больных атопией при развитии III типа реакции содержание промежуточных иммунных комплексов в циркуляции, как правило, преобладает над количеством мелких, что, видимо, связано с транссудацией из сыворотки крови в первую очередь белков невысокой молекулярной массы [14]. В кожных пробах иммунокомплексный тип реакции проявляется местным отеком и выраженной гиперемией, развивающимися через 5-6 часов после введения аллергена гриба (отсроченная реакция).

Положительные кожные пробы к C. albicans иммунокомплексного типа обнаружены у больных с разнообразными нозологическими формами аллергических заболеваний: бронхиальной астме (БА), экземе, нейродермите, рините, коньюнктивите [15]. При положительной аллергической реакции III типа на внутрикожное введение полисахаридного аллергена C. albicans описан случай циклически рецидивирующий (на протяжении нескольких месяцев с интервалом 2-3 недели) местный васкулит, что, как предполагают, было обусловлено не достаточно эффективной элиминацией аллергена гриба из места инъецирования и стимуляцией синтеза комплемент фиксирующих антител [16]. Описаны случаи развития аллергического бронхо-легочного кандидоза, осложненного аллергическим васкулитом [17,18]. У ряда работников птицефабрик, контактирующих с готовыми продуктами гидролизного производства кормовых дрожжей, развивался экзогенный аллергический альвеолит, сопровождающийся высокими титрами IgG-антител в сыворотке крови к Candida и смешанным (I+III) типом аллергической реакции во внутрикожных тестах с аллергеном C. albicans [19].

Примечательно, что при постановке кожных проб с аллергеном C. albicans среди больных с иммунокомплексным типом реакции чаще всего обнаруживают именно смешанный тип реагирования, где наряду с III типом имеет место ГНТ, что может способствовать повышению проницаемости сосудов и транссудации белков из циркуляции в ткани [20,19].

По-видимому, роль ЦИК в патогенезе аллергических заболеваний весьма существенна. У больных бронхиальной астмой (БА), сенсибилизированных к C. albicans, промежуточные циркулирующие иммунные комплексы, содержавшие аллерген гриба, обнаружены в 20,8% случаев [21]. Имеются сведения о значимости ЦИК, образованных с участием низкоаффинных антител, в патогенезе АД. У таких больных имеет место сильная обратная корреляционная связь (-0,95) между содержанием высокоавидных антител и индексом SCORAD (Severity Scoring of Atopic Dermatitis), характеризующим распространенность и интенсивность кожных проявлений. Показано, что длительная персистенция ЦИК, содержащих низкоаффинные антитела, ведет к сенсибилизации организма и дисфункции Тх [22]. Полисахариды C. albicans, будучи поликлональными активаторами гуморального иммунного ответа, способствовуют накоплению в циркуляции значительных количеств низкоаффинных антител, образующих с антигеном промежуточные и мелкие иммунные комплексы [23]. Помимо непосредственного повреждающего действия на ткани организма, промежуточные и мелкие иммунные комплексы, содержащие IgG, обладают выраженными иммуномодулирующими свойствами. В частности, в макрофагах и моноцитах они стимулируют синтез IL-10, который угнетает продукцию провоспалительного цитокина IL-12, и таким образом способствуют развитию иммунного ответа по Т-хэлперному 2 типу. В связи с этим сведения о содержании иммунных комплексов в сыворотке крови имеют принципиальное значение для выбора адекватной терапии при аллергии и инфекционной патологии, в частности кандидоза.

Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) к C. albicans обычно расценивают позитивной реакцией, препятствующей распространению кандидоинфекции в организме. В то же время, в литературе описана патологическая аллергическая реакция IУ типа – «cиндромная замедленная реакция». Она характеризуется выраженным обострением клинических симптомов заболевания через 24-48 часов после постановки внутрикожных проб с аллергеном Candida. In vitro показано, что, в отличие от нормального варианта ГЗТ, при синдромной замедленной реакции через 1 сутки после совместной инкубации цельной крови с аллергеном гриба обнаруживают T-клетки CD69+ (ранний маркер активации) [24]. У 56 — 72% больных псориазом в «prick – тесте» выявлена ГЗТ к аллергену гриба, которая усугубляла клиническую симптоматику основного заболевания [25].

При стимуляции антигеном Candida лимфоцитов больных АД уровень синтеза IFN-γ, (продуцируемого Т-клетками CD8+), коррелировал с выраженностью повреждения кожных покровов [26, 27]. Таким образом, ГЗТ к Candida не всегда носит защитный характер, а в ряде случаев протекает по типу аллергической реакции.

Сенсибилизация организма к Candida может развиваться двумя путями: экзогенным и эндогенным [28]. Экзогенный путь является следствием контакта человека с аллергенами грибов окружающей среды, при этом микогенная сенсибилизация проявляется обычно как профессиональная патология у рабочих предприятий по производству кормовых дрожжей и белково-витаминных концентратов, у жителей селитебных зон (проживающих в районах расположения таких предприятий), а также животноводов, контактирующих с готовыми продуктами производства. Наиболее часто сенсибилизация к аллергену гриба происходит эндогенным путем при хронических формах кандидоза или длительном носительстве грибов рода Candida в организме. Эндогенная сенсибилизация встречается и как профессиональная патология у медсестер, работников предприятий по выпуску лекарственных препаратов и производства комбикормов, что связано с частым кандидоносительством у лиц этих профессий [1, 28-31]. На развитие микогенной сенсибилизации и аллергии оказывают влияние многие факторы: наследственная предрасположенность к аллергическим заболеваниям, доза аллергена и длительность контакта с ним, путь поступления аллергена в организм и др.

Наследственность является одним из основных факторов, способствующих развитию микогенной сенсибилизации и аллергии. Среди лиц с профессиональной сенсибилизацией к БВК установлена повышенная частота встречаемости HLA-антигенов В18, Cw4. У больных аллергозами такими иммуногенетическими маркерами являются HLA-антигены DR7, Cw4 и D8. Для «резистентных» лиц характерна низкая встречаемость DR7 [32]. У рабочих, занятых в производстве гидролизных кормовых дрожжей, имеет место тесная связь возникновения профессиональных аллергодерматозов с антигеном HLA-B16 [33].

Развитие сенсибилизации и аллергии к Candida зависит от дозы аллергена гриба, поступающего в организм. У больных хроническим кандидозным вульвовагинитом отмечена зависимость развития немедленного типа гиперчувствительности от выраженности колонизации гениталий C. albicans. При высеваемости гриба из влагалища до 5·10 3 КОЕ/мл ГНТ выявляли в 11,0% случаев, при высеваемости 5·103-5·104 КОЕ/мл – в 47,4% [34].

Многие исследователи придают особую значимость повышенной пролиферации Candida spp. в кишечнике, что, видимо, обусловлено высокой степенью всасываемости аллергенов гриба из желудочно-кишечного тракта. Грибковые аллергены сенсибилизируют организм человека в дозе 1·10-9 – 1·10-6 г [35].

При сенсибилизации к аллергену C. albicans контаминация кишечника Candida spp. обнаружена у 88,4% детей, больных БА [9], в 50% случаев при АД [36,37]. Макеева Н.В. с соавторами (2002) показали, что кандидоносительство в кишечнике от 7,0·102 до 7,7·103 КОЕ/г уже может вызывать накопление IgG и реагиновых антител к C. albicans. При этом отмечена прямая корреляция частоты выявления сенсибилизации организма с уровнем обсемененности фекалий грибами.

Среди больных псориазом при обсемененности кишечника C. albicans более 3000 КОЕ/мл повышенное содержание IgE к Candida-аллергену обнаружено у 63,6% пациентов, в то время как у больных без признаков микогенной сенсибилизации – лишь у 23,1% пациентов [25]. При хроническом кандидозном вульвовагините ГНТ к аллергену C. albicans выявлялась у 28,9% женщин, при сочетании же вульвовагинита с высокой контаминацией Candida spp. желудочно-кишечного тракта – уже в 53,3% случаев [38].

При тяжелом течении атопичесого дерматита во многих случаях отмечена положительная корреляция ГНТ к аллергену Candida с присутствием C. albicans в носоглотке больных [39]. У больных АД с высокими уровнями IgE к аллергену Сandida показано, что любая локализация кандидоинфекции или кандидоносительства может утяжелять течение основного заболевания. При пероральном применении антифунгальных препаратов, оказывающих преимущественно местное действие на желудочно-кишечный тракт (нистатин, амфотерицин Б), положительный эффект лечения отмечали у 1/3 пациентов, использование же в терапии флуконазола — препарата общего действия, хорошо всасывающегося из кишечника, было эффективно у подавляющего большинства пациентов [40].

Важным фактором в возникновении микогенной сенсибилизации является длительность контакта с аллергизирующим агентом. При БА у детей повышение уровня спе­цифического IgE на начальном этапе кандидоинфекции отмечено в 52,0% случаев, при длительном течении поверхностного кандидоза – уже у 87,5% [9]. У больных кандидозным вульвовагинитом показана прямая взаимосвязь развития ГНТ к Candida с длительностью заболевания. Так, в группах практически здоровых и транзиторных кандидоносителей число лиц с сенсибилизацией к C. albicans составляло 7,5 — 8,5%, при хроническом течении кандидоза с длительностью заболевания до 3 лет выявляемость ГНТ возрастала до 21,4% случаев, а при течении кандидоинфекции свыше 3-летнего периода достигала уже 35,4% [34].

В развитии микогенной сенсибилизации имеют значение возрастные особенности пациентов. Если среди лиц 11-20 лет повышенную чувствительность к Candida выявляли у 14-15% обследованных, то в возрасте 50 лет и старше – у 83-95% [35]. Среди больных БА в возрасте от 3 до 70 лет повышенная концентрация IgE к С. albicans отмечена у 10,4% лиц, в то время как в возрастной группе от 51 до 60 лет количество пациентов, сенсибилизированных к аллергену гриба, достигало 27,3% [41]. У больных множественной экземой подобные данные обнаружены в скарификационных пробах и укольных тестах не только с С. albicans, но и с ингаляционным аллергенами (Dermatophagoides farinae /клеща домашней пыли/) и домашней пыли [42]. Повышенная склонность к аллергизации в зрелом возрасте, видимо, связана с известным фактом снижения супрессорной активности Т-клеток у этого контингента.

Важная особенность ГНТ к Candida состоит в том, что она в 93-100% случаев развивается у лиц с повышенной концентрацией общего IgE на фоне уже сформировавшейся моно- или поливалентной аллергии к другим (часто не родственным) аллергенам [1, 5, 9, 10]. Причины этого явления исследовали в двух направлениях: во-первых, проводили сравнение аллергенности Candida с другими видами аллергенов; во-вторых, у C. albicans и других грибов изучали наличие общих антигенных детерминант, способных стимулировать синтез антител и вступать в перекрестные реакции.

При исследованиях, проведенных у больных аллергическими заболеваниями, обнаружено, что C. albicans обладает меньшей аллергенной активностью, чем, например, D. farinae и Malassezia furfur (Рityrosporum ovale). В частности, у больных АД в ответ на стимуляцию мононуклеаров периферической крови аллергеном C. albicans синтез ИЛ-5 (продуцируемого Тх2) был значительно ниже (7,2 пг/мл), чем при стимуляции аллергеном клеща домашней пыли (23,4 пг/мл). У больных атопической формой БА отмечали подобную закономерность: концентрация IL-5 при стимуляции мононуклеаров периферической крови аллергеном D. farinae составляла в среднем 177,8 пг/мл, в то время как при их активации аллергеном гриба – только 100,0 пг/мл. Напротив, продукция IFN-γ (синтезируемого Тх1) была более выражена в ответ на стимуляцию аллергеном C. аlbicans (6,5 пг/мл у больных АД и 60,3 пг/мл у пациентов с БА), в то время как синтез этого цитокина в ответ на стимуляцию клеток аллергеном D. farinae был менее выражен (4,3 пг/мл и 12,6 пг/мл соответственно) [43].

Сходные результаты получены при сравнительном исследовании аллергенности C. albicans и M. furfur у больных АД. Показано, что синтез ИЛ-4 (продуцируемого Тх2) был более выражен при стимуляции лимфоцитов аллергеном M. furfur, в то время как синтез IFN-γ – под влиянием аллергена Candida [6].

Из сказанного следует, что C. albicans обладает меньшей аллергенной активностью и более выраженными антигенными свойствами по сравнению с другими исследованными аллергенами. По-видимому, пусковым механизмом поливалентной аллергии является сдвиг равновесия «Тх1/Тх2» в пользу последних под действием высокоаллергенных веществ. Тх2 и тучные клетки синтезируют IL-4, вызывающий дальнейшее отклонение дифференцировки Тх0 в Тх2, а также пролиферацию В-лимфоцитов и переключение продукции IgM на синтез IgE [43]. Такой фон создает предпосылки для формирования ГНТ к аллергену Candida.

Отмечены различия в особенностях межклеточной кооперации в ответ на аллергены C. albicans и D. farinae. Если в стимуляции лимфоцитов аллергеном D. farinae участвуют CD54, CD80 и CD86, то в стимуляции C. albicans – только CD54 и CD86. Это обстоятельство может быть одной из причин относительно невысокого уровня синтеза IgE -антител к аллергену Candida при микогенной сенсибилизации, поскольку СD80 является молекулой-костимулятором, усиливающим синтез антител [26]. Действительно, на практике при постановке кожных тестов с аллергеном Candida положительная реакция немедленного типа, как правило, не достигает тех максимальных величин, которые могут возникать на ряд других аллергенов.

Сенсибилизация к C. albicans обычно сопровождается повышением титров IgE-антител одновременно к аллергенам других грибов, что может быть связано с наличием у них общих антигенных детерминант. Candida spp., помимо общих внутриродовых антигенов, имеют общие эпитопы с Saccharomyces cerevisiae, M. furfur, Trichosporon spp., Geotrichum spp., Brettanomyces spp. [44, 45]. IgE и IgG к маннану С. albicans вступают в перекрестные реакции с маннаном других грибов этого рода, а также с S. cerevisiae, M. furfur [46, 7]. Отмечают взаимосвязь аллергии к Сandida spp. с сенсибилизацией к ферменту энолазе S. cerevisiae (пекарских дрожжей), обладающей сравнительно высокими аллергенными свойствами.

У больных с атопическими заболеваниями органов дыхания, сенсибилизированных одновременно к ингаляционным аллергенам (D. farinae, перо подушки, пыльца) и C. albicans, ГНТ к энолазе выявлена в 95% случаев, в то время как без сенсибилизации к C. albicans – только у 10% пациентов, что указывает на взаимосвязь сенсибилизации к S. cerevisiae и C. albicans [47].

Многочисленными данными отечественной и зарубежной литературы подтверждается тот факт, что при атопических заболеваниях и различных формах кандидоза микогенная аллергия к Candida spp. обычно возникает у лиц с наиболее тяжелыми вариантами клинического течения [1,2,10,48, 49]. При колонизации организма Candida spp. у пациентов с атопическими заболеваниями и аллергизацией к Candida эффективность применения антифунгальных препаратов при лечении основного заболевания достигает 50-65% [39], а положительный эффект специфической иммунотерапии аллергеном Candida при кандидозе составляет 64% и более [50]. Эти факты подтверждают отягощающее влияние аллергии к Candida spp. на течение основного заболевания и важность ее своевременной профилактики и терапии.

1. Соболев А.В. Аллергические заболевания органов дыхания, вызываемые грибами: Автореф. дис… докт.мед. наук. – СПб., 1997. – 41с.

2. Соболев А.В., Васильева Н.В. Микогенная аллергия (этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение и профилактика) // Аллергология. Частная аллергология. Под ред. Г.Б.Федосеева. — СПб.: Нордмедиздат, 2001. — Том 2. – С. 200 – 211.

3. Маккензи Д.У.П. Иммунный ответ при грибковых инфекциях /В кн.: Иммунологические аспекты инфекционных заболеваний. Под ред. Дика Дж.- М.: Медицина, 1982. — С. 36-95.

4. Зуева Е.В. Антигенно-активные компоненты Candida albicans для выявления повышенной чувствительности немедленного типа: Автореф. дис… канд. биол. наук.- Л., 1990. – 18 с.

5. Nissen D., Petersen L.J., Esch R. and oths. IgE-sensitization to cellular and culture filtrates of fungal extracts in patients with atopic dermatitis // Ann. Allergy Asthma Immunol. – 1998. – Vol.81, №3. – P. 247-55.

6. Savolainen J., Lintu P., Kosonen J., and oths. Pityrosporum and Candida specific and non-specific humoral, cellular and cytokine responses in atopic dermatitis patients // Clin. Exp. Allergy.- 2001.- Vol.31,№1.-P. 125-134.

7. Akiyama K. The role of fungal allergy in bronchial asthma// Nippon Ishinkin Gakkai Zasshi. — 2000. — Vol.41,№ 3.- P. 149-55.

8. Корнишева В.Г. Микозы кожи и подкожной клетчатки: Автореф. дис… докт. мед. наук. – СПб., 1998. – 31с.

9. Романюк Ф.П. Микозы у детей, вызываемые условно-патогенными грибами: Автореф. дис. докт. мед. наук. — Л., 1998. – 44 с.

10. Гамиля М. А. С. Респираторные микоаллергозы и пневмомикозы у детей: Автореф. дис… канд. мед. наук. – СПб., 2000. – 25 с.

11. Lebedeva T.N., Ignatieva S. M., Minina S.V., and oths. Peculiarities of humoral immunity in patients with candidosis //8-th congress of the European Confederation of Medical Mycology. – Budapest, 25-27 August, 2002. – P.34.

12. Мирзабалаева А.К. Кандидоз и актиномикоз гениталий у женщин: Аллергические заболевания органов дыхания, вызываемые грибами: Автореф. дис… докт. мед. наук.– СПб., 2001. – 39 с.

13. Kimura М., Tsuruta S, Yoshida T. Measurement of Candida-specific lymphocyte proliferation by flow cytometry in children with atopic dermatitis //Arerugi.- 1998.- Vol.47, № 4. — P. 449-56.

14. Лебедева Т.Н., Соболев А.В., Игнатьева С.М. с соавт. Циркулирующие иммунные комплексы у больных с атопией и гиперсенсибилизацией к Candida albican //Ж. Проблемы мед. микологии.- 2003.- Том 5, №2.- С.36.

15. Соболев А.В. Клинико-иммунологическая характеристика, некоторые аспекты профилактики аллергических заболеваний, вызванных грибами рода Candida: Автореф. дис… канд. мед. наук. – Л. 1989. – 16 с.

16. Pepys J. Clinical immunopathology of diseases due to fungi // Working Group on Mycotic Infections. Harbung, 26-29 Oct., 1983.

17. Akiyama K., Mathison D.A., Ricer I.B., and oths. // Chest. – 1984. – Vol. 85, № 5. – P. 699 — 701.

18. Matsumoto H., Niimi A., Suzuki K., and oths. Allergic granulomatous angiitis (Churg-Strauss syndrome) associated with allergic bronchopulmonary candidiasis // Respiration. – 2000. — Vol.67, №5. – P. 577-579.

19. Соболнв А.В., Кириллов Ю.А. Фиброзирующие процессы в легких, обусловленные грибами // Материалы международного микологического симпозиума «Микозы и иммунодефициты». — Л., 1991. — С. 86.

20. Gettner S. Studies on the immune response to antigens of Candida albicans // Ph.D. thesis. — Univ.London. — 1979.

21. Лебедева Т.Н., Минина С.В., Соболев А.В., Митрофанов В.С. Специфические иммунные комплексы у больных микогенной аллергией // Ж. Проблемы медицинской микологии.- 2001.- Том 3, № 2. – С. 63 – 64.

22. Трофимова И.Б. Факторы риска развития атопического дерматита //Аллергология. — 2000. – С.10 — 13.

23. Лебедева Т.Н. Гуморальный иммунитет при кандидозе: Автореф. дис… докт. мед. наук. — Л., 1993. – 31с.

24. Brunet J.L., Peyramond D., Cozon G.J. Diagnosis of normal and abnormal delayed hypersensitivity to Candida albicans. Importance of evaluating lymphocyte activation by flow cytometr // Allerg. Immunol. (Paris). — 2001. — Vol.33, №3. – P. 115-119.

25. Курбанов Б.М. Микогенная сенсибилизация у больных псориазом: Автореф. дис. канд. мед. наук. – СПб., 1999. – 23 с.

26. Kawamura M.S., Aiba S., Tagami H. The importance of CD54 and CD86 costimulation in T cells stimulated with Candida albicans and Dermatophagoides farinae antigens in patients with atopic dermatitis // Arch. Dermatol. Res. — 1998.- Vol.290, № 11. – P. 603-609.

27. Savolainen J., Kosonen J., Lintu P., and oths. Candida albicans mannan- and protein-induced humoral, cellular and cytokine responses in atopic dermatitis patients // Clin. Exp. Allergy. — 1999. — Vol.29,№6. – P. 824-31.

28. Кашкин П. Н., Шеклаков Н. Д. Руководство по медицинской микологии. — М.: Медицина, 1978. – 325 с.

29. Ашбель С.И., Богословская И.А., Филюшина З.Г., Кирьянова И.А. О влиянии кандидозной инфекции на течение вызываемых антибиотиками профессиональных заболеваний // Исследования по глубоким микозам. Материалы 9-ой Ленинградской микологической конференции. – Л, 1976. – С. 7 – 9.

30. Namyslowski G., Rogala B., Mrowka-Kata K., Poninska-Polanczuk J. The role of imperfect fungi in etiopathogenesis of allergic rhinitis // Otolaryngol. Pol. — 1998.-Vol.52, №3.-P. 277-280.

31. Talluri G., Marella V.K., Shirazian D., Wise G.J. Immune response in patients with persistent candiduria and occult candidemia // J. Urol. – 1999. – Vol.162, №4. — P. 1361-1364.

32. Егорова И.В. Иммуногенетические маркеры аллергозов от воздействия продуктов биосинтеза белка // III Международный микологический симпозиум «Патогнез, дагностика и терапия микозов и микогенной аллергии» — С.Пб., 24-26 окт., — 1995. – С. 46.

33. Кошкин В.С., Зайцева Г.А. Иммуногенетическая предрасположенность к аллергодерматозам у рабочих микробиологической промышленности // Современная микология в России. Первый съезд микологов. Тезисы докладов. — М., 2002. — С. 361.

34. Лебедева Т. Н. Некоторые биологические свойства возбудителя и иммунный ответ организма при кандидозе: Автореф. дис. канд. мед. наук. — Л., 1984.– 21с.

35. Елинов Н.П. Основы биотехнологии. – СПб.: Наука, 1995.- С.233-239.

36. Маркин А.В., Корнишева В.Г., Горланов И.А. Вторичная пиококковая инфекция и пролиферация грибов рода Candida в кишечнике при атопическом дерматите у детей // Современная микология в России. Первый съезд микологов. Тезисы докладов.- М., 2002. — С.328.

37. Соколова Г.А., Айзикович Л.А. Атопический дерматит, хронические вирусные инфекции, дисбиоз кишечника у детей в условиях микст-патологии // Современная микология в России. Первый съезд микологов. Тезисы докладов. – М., 2002. — С. 377.

38. Мирзабалаева А.К. Клинико-иммунологическая характеристика кандидоза гениталий у женщин репродуктивного возраста: Автореф. дис… канд. мед. наук. – СПб., 1992. – 20 с.

39. Hiruma M., Maeng D.J., Kobayashi M., and oths. Fungi and atopic dermatitis // Nippon Ishinkin Gakkai Zasshi.- 1999.- Vol.40, №2. – P.79-83.

40. Adachi A., Horikawa T., Ichihashi M., and oths. Role of Candida allergen in atopic dermatitis and efficacy of oral therapy with various antifungal agents // Arerugi.- 1999. — Vol.48, №7.- P.19-25.

41. Tsai J.J., Chen W.C. Different age of asthmatic patients affected by different aeroallergens // J. Microbiol. Immunol. Infect. 1999.- Vol.32, №4.- P. 283-288.

42. Aoyama H., Tanaka M., Hara M., and oths. Nummular eczema: An addition of senile xerosis and unique cutaneous reactivities to environmental aeroallergens // Dermatology. — 1999. — Vol.199, №2.- С. 135-139.

43. Kimura M, Tsuruta S, Yoshida T. Measurement of Candida-specific lymphocyte proliferation by flow cytometry in children with atopic dermatitis// Arerugi.- 1998. — Vol.474. – P. 449-456.

44. Savolainen J., Kosonen J., Lintu P., and oths. Candida albicans mannan- and protein-induced humoral, cellular and cytokine responses in atopic dermatitis patients // Clin. Exp. Allergy. — 1999. — Vol.29, №6. – P. 824-831.

45. Силуянова Н.А. Сравнительное изучение антигенных свойств дрожжеродобных грибов: Автореф. дис. канд. биол. наук.- Л., 1963 . — 13 с.

46. Little C.H., Georgiou G.M., Marceglia A., and oths. Measurement of T-cell-derived antigen binding molecules and immunoglobulin G specific to Candida albicans mannan in sera of patients with recurrent vulvovaginal candidiasis // Infect. Immun. — 2000. — Vol.68, №7. — P. 3840-3847.

47. Lintu P., Savolainen J., Kalimo K., and oths. Cross-reacting IgE and IgG antibodies to Pityrosporum ovale mannan and other yeasts in atopic dermatitis // Allergy.- 1999. — Vol.54, №10.- P. 1067-1073.

48. Nittner-Marszalska M., Wojcicka-Kustrzeba I., Bogacka E., and oths. Skin prick test response to enzyme enolase of the baker’s yeast (Saccharomyces cerevisiae) in diagnosis of respiratory allergy // Med. Sci. Monit.- 2001.- Vol.7, №1.- P.121-4.

49. Романюк Ф.П. Микозы у детей, вызываемые условно-патогенными грибами: Автореф. дис. докт. мед. наук. — Л., 1998. – 44 с.

Дрожжи размножаются быстрее, если их попеременно то охлаждать, то нагревать

Температура 30-33°С оптимальна для размножения дрожжей, но только в том случае, если ее поддерживать постоянно. Экспериментально показано, что повышение температуры до сверхоптимальной (37,5-40°С) стимулирует ускоренное размножение дрожжей, если до этого они жили при более низкой температуре (14-30°С). При длительном воздействии повышенной температуры дрожжи теряют терморезистентность, однако способны восстановить ее за всего за одно поколение при 20°С. По-видимому, это свойство является адаптацией к суточным колебаниям температуры в природе. Предполагается, что механизм, позволяющий дрожжам проявлять терморезистентность, локализован в клеточной мембране и его функционирование зависит от энергетической и хемиосмотической систем клеток.

Дрожжи Saccharomyces cerevisiae применяются в производстве алкогольной и хлебопекарной продукции, также они широко используются в научных исследованиях. Так, S. Cerevisiae стали первыми эукариотами, чей геном был полностью секвенирован. Этот же вид послужил одним из модельных объектов при изучении способности микроорганизмов к опережающему реагированию, т.е. к предвидению изменения условий окружающей среды (см.: У микробов обнаружена способность к предвидению. «Элементы», 23.06.09). На культуре S. Cerevisiae ведутся исследования механизмов экспрессии генов, роли белков теплового шока и многие другие.

Дрожжи S. Cerevisiae в природе обитают на поверхности поврежденных сладких и сочных плодов, в нектаре цветов или в местах истечения растительных соков. В течение суток температура естественной среды обитания дрожжей подвергается резким колебаниям. Естественно предположить, что в процессе эволюции дрожжи должны были хорошо приспособиться к таким перепадам.

Работа сотрудника НИИ Биологии и биофизики при Томском государственном университете В.А. Калюжина посвящена поиску этих адаптаций. Автор исследовал развитие устойчивости S. cerevisiae к повышению температуры. Показателем устойчивости принимается скорость размножения (почкования) дрожжевых клеток.

В первой серии опытов 12 поколений дрожжей выращивали в насыщенной питательными веществами среде при оптимальной кислотности (pH=4) и постоянной температуре. Разные подопытные популяции содержались при температурах от 14 до 40°С, что примерно соответствует диапазону температурных колебаний в естественных условиях обитания в летний период. Быстрее всего дрожжи размножались при 30-33°С (табл. 1).

Температура культивирования, о С Время генерации клеток
(время удвоения числа клеток), ч
Удельная скорость роста, µ, ч -1
14 8.7±0.27 0.08±0.01
20 5±0.1 0.14±0.03
25 3±0.1 0.23±0.005
30 2.3±0.04 0.3±0.0075
33 2.2±0.04 0.32±0.005
36 3±0.1 0.14±0.005
37.5 5±0.1 0.14±0.005
39 9.9±0.7 0.07±0.005

Таблица 1. Скорость размножения дрожжей при постоянной температуре (из обсуждаемой статьи В.А.Калюжина)

Следующая серия экспериментов – выращивание культур сначала при низкой температуре t1, а затем при более высокой t2 (остальные условия не менялись) – показала, что при переходах t1t2 в диапазоне t2 от 20 до 36°С скорость размножения дрожжей достигает значения, отмеченного при культивировании в стационарном режиме при температуре t2, в первом же поколении (табл. 2). Однако при повышении температуры до сверхоптимальной (37,5-40°С) скорость размножения дрожжей значительно возрастала по сравнению с культурами стационарных температур начального и конечного режимов (при 40-45°С клетки все же быстро погибали). Клетки были способны поддерживать высокий темп деления при сверхоптимальной температуре t2 на протяжении 4-6 часов (2-4 поколений). После этого скорость размножения снижалась до того уровня, который характерен для дрожжей, выращиваемых при постоянной температуре t2.

Температурный переход
t1t2, °С
Время генерации клеток
(время удвоения числа клеток) при t2, ч
I II III IV
14→20 4.75±0.5 5±0.2 5±0.1 5±0.1
20→25 3.2±0.35 3.1±0.12 3±0.1 3±0.1
25→30 2.3±0.08 2.3±0.06 2.3±0.04 2.3±0.04
30→36 3±0.1 2.5±0.2 2.8±0.2 3±0.1
30→37.5 2.5±0.2 2.6±0.2 2.6±0.2 2.7±0.3
30→39 2.7±0.2 3.2±0.3 3.6±0.4 3.8±0.5
30→40 4.2±0.8 Остановка размножения дрожжей
14→30 2.4±0.1 2.3±0.15 2.3±0.1 2.3±0.08
20→30 2.4±0.2 2.3±0.15 2.3±0.1 2.3±0.06
14→39 3.3±0.3 2.7±0.3 2.8±0.4 3.5±0.8
20→37.5 2.6±0.12 2.7±0.14 2.8±0.2 3.5±0.6

Таблица 2. Скорость размножения дрожжей при переходе от низких к высоким температурам. Римскими цифрами показан порядковый номер поколения, начиная с момента увеличения температуры (из обсуждаемой статьи В.А.Калюжина)

Таким образом, переход к повышенным температурам стимулировал ускоренное размножение дрожжей, ранее живших в более прохладных условиях. В.А. Калюжин называет данное свойство терморезистентностью и полагает, что это адаптация, позволяющая дрожжам в природе благополучно пережить период послеполуденного максимума температур.

Автор исследовал факторы, необходимые для формирования внутриклеточных условий, обеспечивающих терморезистентность.

Дрожжи в течение 12 поколений выращивали при 37,5°С (время одной генерации – 5 часов, см. табл. 1). Затем температуру снижали до 20°С (время одной генерации также 5 часов), выдерживали в течение различных интервалов времени и вновь подогревали до 37,5°С. Оказалось, что достаточно 4-6 часового пребывания культуры в прохладе, чтобы время первой генерации при повышении температуры составило 2,6 часа – как при переходе 20→37,5°С (табл. 2). Следовательно, для приведения системы терморезистентности в полную «боевую готовность» дрожжам необходимо 4-6 часов пребывания при пониженной температуре. Это сопоставимо с длительностью и величиной ночного понижения температуры в природе, т.е. ночью дрожжи успевают сформировать терморезистентность, которая реализуется днем.

Возможный биохимический механизм системы терморезистентности изучался путем создания дефицита в питательной среде различных веществ (глюкозы, солей азота, фосфора, калия, магния, а также бета-аланина и дестиобиотина – факторов роста растительного происхождения, которые нужны дрожжам для нормального развития).

Выяснилось, что культуры дрожжей, лимитированные глюкозой, фосфором или калием, прекращали рост при 37,5оС уже в первом поколении. Остальные вещества никак не влияли на устойчивость к высоким температурам. Исходя из этого, В.А. Калюжин предположил, что термоустойчивость зависит в основном от биоэнергетических функций клетки. Согласно хемиосмотической теории П.Д. Митчела (см.: В.П. Скулачев. Митчел и его догадка), запасание энергии клеткой (синтез АТФ) возможно благодаря созданию разности концентраций ионов H + в двух отсеках системы, разделенных мембраной. Ионы K + обеспечивают возможность транспорта ионов водорода через мембрану (служат антипортом для ионов H + : выход К + в обмен на Н + . См.: Антонов В.Ф. Мембранный транспорт). Глюкоза является основным и наиболее универсальным источником энергии для обеспечения метаболических процессов (см.: Лемеза Н.А. и др. Энергетический обмен). Фосфор также необходим для синтеза АТФ. Таким образом, полученные результаты неплохо согласуются с предположением о том, что термоустойчивость дрожжей связана с активностью хемиосмотической биоэнергетической системы. В дополнительных опытах было установлено, что при добавлении глюкозы и фосфора к лимитированным по этим параметрам культурам дрожжи восстанавливали утраченное свойство терморезистентности.

Для подтверждения роли биоэнергетической системы в обеспечении терморезистентности были проведены опыты с 2,4-динитрофенолом (ДНФ), который ингибирует фосфорилирование, т.е. синтез АТФ из АДФ и фосфата. В присутствии ДНФ рост дрожжей прекращался в первый час после повышения температуры до 37,5°С, однако после удаления ДНФ терморезистентность восстанавливалась.

При закислении среды (до pH 2,35) дрожжи также прекращали размножаться в первый час после повышения температуры до 37,5°С и снова начинали при повышении pH до 4.

В.А. Калюжин считает, что поскольку «pH фактор оказывает влияние в основном на хемиосмотическую систему плазмолеммы клетки,… ДНФ ингибирует не только систему, расположенную в плазмалемме, но и митохондральный комплекс хемиосмотической системы», то «проявление терморезистентности осуществляется за счет активности хемиосмотической энергетической системы, локализованной в плазмалемме дрожжевой клетки».

Автор обращает внимание на то, что дрожжи, лимитированные источником азота, необходимым для синтеза белков, не теряют свойства терморезистентности. Поэтому, скорее всего, в формировании терморезистентности синтез белков, в том числе белков теплового шока, ключевой роли не играет.

Таким образом, терморезистентность дрожжей, являющаяся адаптацией к суточным колебаниям температуры в природных условиях, формируется в период понижения температуры и зависит в основном от активности хемиосмотической энергетической системы.

Описанное свойство терморезистентности может быть использовано в прикладной биотехнологии для управления скоростью роста дрожжей и, вероятно, других культур при помощи температурного фактора.

БАД Эубикор — отзыв

БАД «Эубикор»: спасает от всех заболеваний, перечисленных в справочнике внутренних болезней, или только обещает вечную жизнь и цветущую молодость? Разбор состава, показания, противопоказания, а также подробная инструкция по применению + фото.

С биологически активной добавкой к пище «Эубикор» я познакомилась уже около 7 лет назад. Как-то так случилось тогда, что я заканчивала институт, много работала, сидела за учебниками, постоянно нервничала и питалась не правильно. В связи с таким не здоровым и стрессорным образом жизни у меня начались проблемы с кожей (стали беспокоить многочисленные высыпания) и кишечником (то послабления, то наоборот). Вот и начала я искать препарат, чтобы «одним выстрелом двух зайцев убить».

Обратила внимание на симпатичную коробочку с порошками внутри, инструкция к которым обещала мне избавление от всех заболеваний на свете. И стул нормализует, и диспептические явления, такие как изжога, вздутие, тошнота, устраняет, а еще избавляет от аллергии, выводит из организма токсины различного происхождения, повышает иммунитет, снижает уровень холестерина и сахара крови, а еще снижает вероятность возникновения онкологических заболеваний и восстанавливает микрофлору кишечника!

Представляете? И все это один только препарат! Семь бед — один ответ! Шикарно, надо брать!

Сразу становится интересно, что же такое содержится в этих порошках, что они обладают такой чудодейственной силой?

Состав: пшеничные отруби и инактивированная дрожжевая культура Saccharomyces cerevisiae (vini).

Что же это получается? Обычная клетчатка и непонятные грибки? Почему же препарат имеет такое множество областей применения?

Оказывается дело именно в воздействии составляющих веществ на организм.

  • Клетчатка обладает высокими сорбционными свойствами, связывает токсичные вещества, стимулирует перистальтику кишечника при его атонии и оказывает обволакивающее действие при его гиперактивности. Препятствует проникновению в кровоток вредных веществ, поступающих с пищей, а также выводит не нужные организму вещества, образующиеся в нем самом. Все эти положительные свойства клетчатки известны уже давно и с успехом используются в гастроэнтерологии.
  • Saccharomyces cerevisiae, они же Пекарские дрожжи, с успехом применяются в качестве пробиотика, поскольку конкурируют с патогенными микроорганизмами в просвете кишечника за жизненное пространство и не дают им активно размножаться, нарушая микрофлору и вызывая дисбактериоз, особенно при лечении антибактериальными препаратами, поскольку сахаромицеты не чувствительны к антибиотикам. Собственная микрофлора часто бывает к ним более чувствительна, чем патогенная, отсюда и нарушения бактериального баланса и дисфункция кишечника. Помимо этого, они стимулируют иммунную систему, устойчивы к воздействию желудочного сока и солям желчных кислот, в результате чего попадают в кишечник в не измененном состоянии.

Так что все обещания производителя в общем-то укладываются в научно обоснованную теорию.

Противопоказаний эта биологически активная добавка практически не имеет, только индивидуальная непереносимость препарата, например, у людей с непереносимостью глютена или аллергические реакции на дрожжеподобные грибы, что случается, но крайне редко.

Во время приема препарата следует увеличить количество потребляемой жидкости, как и при приеме любого другого вида клетчатки, поскольку вместо эффекта нормализации работы желудочно-кишечного тракта, можно получить совершенно противоположный результат.

Выпускается «Эубикор» в двух дозировках: для взрослых пакетики по 3 грамма в упаковках по 30 и 60 штук, и для детей в дозировке 1,5 грамма по 30 пакетиков.

Кратность приема зависит от того состояния, с целью коррекции которого препарат принимается. Но в любом случае это курсовое использование, не менее 2-х недель. Порошки можно добавлять в не горячую пищу или кефир. Кстати в последнем варианте можно использовать как дополнение к диете.

У меня от приема «Эубикора» остались только положительные эмоции. Работа кишечника нормализовалась, кожа стала немного лучше, в ту весну я действительно не болела, но на мой взгляд эффект не очень долгосрочный. Если не заниматься своим образом жизни в целом, то возлагать большие надежды на препарат не стоит. Во время приема антибиотиков он, конечно, поможет, а вот при длительном сидячем образе жизни и поедании рафинированной пищи не спасет от напастей.

Упаковка в 60 пакетиков стоит около 250 рублей, что при покупке нескольких упаковок для прохождения курса несколько бьет по карману. За это снижаю баллы, потому что на мой взгляд элементарно синтезируемые в лабораторных условиях грибы не стоят столько. Да и ожидаемый эффект не оказался сверхестественным.

Однако это не мешает мне периодически принимать его курсом и иметь в домашней аптечке на случай отравлений, особенно в летний период.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ ДРУГИЕ ОТЗЫВЫ О ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТАХ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА:

Слабительное Флит-фосфо-сода для подготовки толстой кишки к диагностическим исследованиям

Бейби Калм для устранения колик у малышей

Боботик от колик у грудничков

БАД «Локло» похож по показаниям на «Эубикор», может являться его заменителем

Дрожжи saccharomyces cerevisiae, используемые в качестве пробиотика, и композиция на их основе

Владельцы патента RU 2490324:

Изобретение относится к штаммам дрожжей Saccharomyces cerevisiae CNCM I-3856 и Saccharomyces cerevisiae var. boulardii CNCM I-3799, используемых в качестве пробиотика, пригодного при производстве пищевых или фармацевтических композиций. Предложена также композиция, содержащая штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae CNCM I-3856 и/или Saccharomyces cerevisiae var. boulardii CNCM 1-3799 и/или по меньшей мере один из париентальных маннопротеинов EL 05 и EL 06 штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae CNCM I-3856. Изобретение способствует уменьшению боли в кишечнике, индуцированию противовоспалительного действия при отсутствии провоспалительного действия, затруднению и уменьшению адгезии и заселения желудочно-кишечного тракта бактериями, являющимися патогенными и/или имеющими инвазивный характер. 3 н.з. и 9 з.п. ф-лы, 30 ил., 6 табл., 9 пр.

Настоящее изобретение относится к области питания и здоровья человека и/или животного.

Изобретение более предпочтительно относится к новым штаммам дрожжей и новым дрожжам, получаемым исходя из новых штаммов. Такие дрожжи являются особенно полезными для комфортного состояния пищеварительного тракта и/или для предупреждения и/или лечения нарушений пищеварительного тракта человека или животного.

В литературе описано множество микроорганизмов для полезного применения у человека в пищеварительном тракте и в целях питания, см., например, WO 2006/021965.

Такие микроорганизмы традиционно обозначают термином «пробиотик», относящимся к активным микроорганизмам, способным приносить организму-хозяину пользу в отношении здоровья в том случае, когда их введение осуществляется в достаточном количестве (Joint FAO/WHO Expert Consultation Probiotics in food, FAO Food and nutrition paper Nr 85, ISBN 92-5-105513-0).

Полезный результат при пероральном введении микроорганизмов в большой степени зависит не только от штамма используемого микроорганизма, но также и от формы введения. Даже среди одного вида, в зависимости от используемых штаммов, наблюдаемые эффекты на практике очень сильно варьируют и являются иногда положительными, иногда отрицательными или нейтральными, как, например, для вида Escherichia coli, в котором можно найти как патогенные штаммы (например, типа энтеротоксиногенных или энтерогеморрагических), так и полезные штаммы, как, например, штамм Nissle 1917 (M. de Vrese; P.R. Marteau. Probiotics and Prebiotics: Effects on Diarrhea. 2007, J. Nutr., 137 (3 Suppl. 2), 803S-811S). Таким образом, в настоящее время в отношении заданного штамма невозможно предсказать, что при введении такого штамма можно рассчитывать на полезный эффект в отношении здоровья человека, и даже предусмотреть природу его возможного полезного эффекта или его интенсивность.

Некоторые штаммы микроорганизмов, в частности среди дрожжей и молочных бактерий, уже были идентифицированы в отношении некоторых случаев полезного действия на желудочно-кишечный тракт. Тем не менее, получение комплексного полезного действия на желудочно-кишечный тракт часто требует сопутствующего введения нескольких штаммов различной природы (I. Goktepe; V.K. Juneja; M. Ahmedna (eds). Probiotics in Food Safety and Human Health. 2006, CRC Taylor & Francis, ISBN 1-57444-514-6).

Кроме того, было замечено, что достаточно многие микроорганизмы, в частности молочные бактерии, обладают провоспалительным действием. Такой провоспалительный эффект может оказаться особенно вредным и нежелательным, например, в случае аутоиммунных заболеваний или иммуннодефицита.

Описаны некоторые фракции дрожжей и/или производные продукты дрожжей в отношении их полезного действия на пищеварительный тракт.

Так, например, маннопротеины, являющиеся производными продуктами дрожжей, описаны в отношении их ингибирующего действия на адгезию патогенов. Описаны также продукты клеточных стенок дрожжей в отношении их действия подобно волокнам. Однако, существует множество штаммов дрожжей Saccharomyces cerevisiae, которые совсем не оказывают полезное действие или такие же эффекты.

Кроме того, в зависимости от используемых штаммов и форм вводимых дрожжей эффекты также могут очень сильно варьировать.

Таким образом, существует потребность в возможности располагать новыми штаммами микроорганизмов, которые могут оказывать полезное действие в отношении здоровья профилактически и/или терапевтически на известные или предполагаемые патологии или нарушения или на общее состояние как физического, так и психического здоровья.

Таким образом, объектом настоящего изобретения является новый штамм Saccharomyces cerevisiae, депонированный в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3856, и новый штамм Saccharomyces cerevisiae var. boulardii, депонированный в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3799.

Объектом настоящего изобретения являются также дрожжи Saccharomyces cerevisiae, полученные исходя из штамма, депонированного в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3856, и дрожжи Saccharomyces var. boulardii, полученные исходя из штамма, депонированного в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3799.

Другим объектом настоящего изобретения является композиция, содержащая дрожжи Saccharomyces cerevisiae, полученные исходя из штамма, депонированного в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3856, и/или дрожжи Saccharomyces var. boulardii, полученные исходя из штамма, депонированного в Национальной коллекции культур микроорганизмов под № CNCM I-3799, и/или по меньшей мере один производный продукт дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выбранный из экстрактов дрожжей, производных продуктов клеточных стенок, париетальных глюканов, париетальных маннопротеинов, липидных фракций дрожжей, фракций нуклеиновых кислот дрожжей (РНК, ДНК).

Композиция по настоящему изобретению имеет следующие преимущества:

— способность, в частности, в сухих формах сопротивляться и выживать при переходе желудочного барьера, что позволяет оптимизировать ее действие на желудочно-кишечный тракт;

— отсутствие провоспалительного действия или очень слабое такое действие;

— способность уменьшать боли в кишечнике;

— способность затруднять и уменьшать адгезию и заселение бактериями, являющимися патогенными и/или имеющими инвазивный характер, желудочно-кишечного тракта, в частности тонкого кишечника и толстой кишки.

Такая новая композиция, обладающая такой комбинацией характеристик, до настоящего времени еще не была описана или идентифицирована.

Таким образом, данная композиция представляет собой исключительный интерес.

Другим объектом настоящего изобретения является применение упомянутой композиции для получения пищевой добавки и/или пробиотика, и/или продукта для лечебно-профилактического питания, и/или биологически активной добавки, и/или функциональных ингредиентов, и/или лечебно-косметического средства, и/или фармацевтически активного вещества, предназначенных для человека и/или животного.

В то же время настоящее изобретение относится к применению композиции, такой, как определено ранее, для получения пищевых композиций, предназначенных для улучшения комфортного состояния желудочно-кишечного тракта и/или улучшения кишечной микрофлоры.

Объектом настоящего изобретения является также применение композиции, такой, как определено ранее, для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или профилактики расстройств кишечника, функциональных нарушений кишечника или заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Объектом настоящего изобретения является также применение композиции, такой, как определено ранее, для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или профилактики патологий или расстройств кишечника, характеризующихся состоянием гипералгезии.

Последним объектом настоящего изобретения является набор, содержащий по меньшей мере один вид дрожжей и/или по меньшей мере один производный продукт дрожжей, таких, как определено ранее, в форме, приемлемой для перорального введения.

Штамм, депонированный заявителем в соответствии с Будапештским договором в Национальной коллекции культур микроорганизмов (институт Пастера, Париж) под № CNCM I-3856, в дальнейшем описании для краткости обозначается «ScPro1».

Штамм, также депонированный заявителем в соответствии с Будапештским договором в Национальной коллекции культур микроорганизмов (институт Пастера, Париж) под № CNCM I-3799, в дальнейшем описании для краткости обозначается «SCB1».

Также для краткости производный продукт дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выбранный из экстрактов дрожжей, производных продуктов клеточных стенок, париетальных глюканов, париетальных маннопротеинов, липидных фракций дрожжей, фракций нуклеиновых кислот дрожжей (РНК, ДНК) и их смесей, в дальнейшем описании упоминается как «производное».

Под пробиотиком понимают активные микроорганизмы, которые, в случае их введения в достаточном количестве, оказывают положительное действие на здоровье, комфортное состояние и хорошее самочувствие помимо традиционных питательных эффектов.

Под продуктом для лечебно-профилактического питания или биологически активной добавкой, или функциональным пищевым продуктом, или лечебно-косметическим средством понимают пищевой продукт, который содержит ингредиенты, оказывающие полезное действие на здоровье или способные улучшить физиологические функции.

Под пищевой добавкой понимают пищевой продукт, предназначением которого является дополнение нормального пищевого режима. Пищевая добавка представляет собой концентрированный источник питательных веществ или других веществ, обладающих питательным или физиологическим действием, в том случае, когда их используют индивидуально или в комбинации в малых количествах.

Под пищевыми продуктами, предназначенными для специального питания (DDAP), понимают пищевые продукты, целью которых является особое питание, предназначенное для четко определенной группы населения, такой, как грудные дети, дети младшего возраста, спортсмены.

Пищевая композиция, такая, как упомянуто в настоящем изобретении, может представлять собой пищевую добавку или DDAP.

Штаммы по настоящему изобретению были выявлены заявителем благодаря их многочисленным преимуществам и, в частности, благодаря их способности индуцировать полезное действие на пищеварительный тракт человека и, в частности, на тонкий кишечник и толстую кишку, а также на организм в целом.

На практике было замечено, что дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные неожиданным образом способны индуцировать противовоспалительное действие в противоположность достаточно большому числу штаммов дрожжей и при этом без провоспалительного действия.

На практике дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные вызывают увеличение секреции интерлейкина IL-10, вовлеченного в противовоспалительные сигналы. Кроме того, в отличие от действия пробиотических бактерий типа лактобактерий дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные не индуцируют синтез провоспалительного цитокина IL-12. Продуцирование провоспалительных цитокинов TNFα и IFNγ также заметно меньше по сравнению с бактериальными пробиотиками. В то же время испытания позволили доказать противовоспалительный эффект in vivo дрожжей ScPro1 и, в частности, уменьшение вдвое степени воспаления толстой кишки и уменьшение на треть кишечного некроза.

Кроме того, дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные в их сухих формах способны преодолевать желудочный барьер без каких-либо отрицательных последствий на их выживаемость или их целостность, при этом данные дрожжи не внедряются во внутреннюю среду толстой кишки.

Заявителем впервые и неожиданно доказано, что дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные способны увеличивать сопротивляемость к боли, в частности, на модели с крысой in vivo.

В дополнение к данному полезному действию дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные способны ингибировать заселение и/или инвазию на уровне кишечника микроорганизмов, являющихся патогенными и/или имеющих инвазивный характер. Введение данных дрожжей вызывает уменьшение численности энтеробактерий на уровне толстой кишки и кишечной микрофлоры, устойчивой к антибиотикам.

В частности, заявителем была показана профилактическая и терапевтическая активность против заселения кишечника дрожжами Candida albicans и воспалений, провоцируемых и поддерживаемых данным патогеном. В то же время, данные дрожжи проявляют ингибирующее действие на способность к адгезии и инвазии штаммов, являющихся патогенными и/или имеющих инвазивный характер, патотипов Escherichia coli, выделенных из биопсийных материалов тонкого кишечника больных, страдающих болезнью Крона.

По настоящему изобретению дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные могут быть введены в активной или реактивируемой форме предпочтительно пероральным путем.

Под терминами «активная форма» или «активные» по настоящему изобретению понимают то обстоятельство, что дрожжи обладают активным или реактивируемым метаболизмом или способны к размножению. Речь идет, в частности, о дрожжах в сухом или свежем виде.

Как правило, дрожжи в свежем виде находятся в форме прессованных или крупитчатых дрожжей. Они могут находиться также в форме дрожжей в виде суспензии на водной основе, называемых также жидкими дрожжами. В данном случае дрожжи предпочтительно являются инкапсулированными. Способы инкапсулирования и различные типы капсул хорошо известны специалистам в данной области техники.

Среди сухих форм дрожжей можно упомянуть дрожжи, которые могут находиться в сухой быстрорастворимой или сухой активной форме. Под сухими дрожжами понимают любые дрожжи, имеющие содержание сухого вещества больше 90% и предпочтительно в интервале приблизительно от 92 до 96%.

Среди сухих дрожжей также можно упомянуть быстрозамороженные или незамороженные дрожжи со средней влажностью.

Быстрорастворимые сухие дрожжи предназначены главным образом для крупных и мелких хлебопекарных предприятий. Другие варианты применения и сбыта возможны на основе пищевого назначения (технология лекарственных форм, спиртовое брожение). Особенность данных сухих дрожжей состоит в том, что они не требуют увлажнения перед прибавлением к муке.

Данные дрожжи получают обезвоживанием дрожжей под действием градиента горячего воздуха, позволяющего превращать пастообразный продукт (прессованные или жидкие дрожжи) в продукт в виде тонкой сухой вермишели, который при этом остается активным. Затем продукт с целью обеспечения стабильности должен быть расфасован в отсутствии кислорода.

Сухие активные дрожжи представляют собой активные дрожжи, высушенные при низкой температуре с целью сохранения их ферментирующей способности и обеспечения достаточно длительного хранения. Дрожжи находятся в форме сферических частиц.

Данные дрожжи получают обезвоживанием дрожжей при совместном действии тепла и механического воздействия, которые позволяют превращать дрожжи в пастообразной форме в сухой продукт, сохраняя их жизнеспособность.

Выбранные сухие активные дрожжи получают экструзией и высушиванием в псевдоожиженном слое биомассы (активные клетки дрожжей). Такие сухие активные дрожжи, то есть сухие дрожжи, имеющие высокое содержание активных клеток дрожжей, находятся в форме гранул в общем случае с диаметром от 0,1 мкм до 2,5 мм и содержанием H2O от 4 до 8% масс.

Такие сухие формы обладают преимуществом, состоящим в том, что они обеспечивают более хорошую гастрорезистентность по сравнению с формой свежих дрожжей и оптимизируют полезное действие дрожжей по настоящему изобретению. Дрожжи по настоящему изобретению предпочтительно находятся в форме сухих активных дрожжей.

В общем случае известно, что провоспалительные цитокины стимулируют воспалительные механизмы, которые при этом могут быть ответственными за достаточно многие клинические проблемы, в частности, в случаях аутоиммунных заболеваний или иммуннодефицита.

Так, например, дрожжи по настоящему изобретению могут быть использованы для профилактики и/или лечения как хронических, так и острых заболеваний или воспалительных расстройств кишечника, необязательно связанных с диареей или запорами.

В первом варианте осуществления настоящего изобретения расстройства и заболевания необязательно связаны с диареей.

Во втором варианте осуществления настоящего изобретения расстройства и заболевания не связаны с диареей. В частности, дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные могут быть полезными для профилактики или лечения колитов, которые характеризуются в основном воспалением толстой кишки.

В частности, данные дрожжи являются в хорошей степени приемлемыми для профилактики и/или лечения хронических воспалительных заболеваний кишечника (MICI), в частности, язвенного колита, геморрагического ректоколита, целиакии или болезни Крона.

Данные заболевания характеризуются, в частности, обостренным иммунным ответом, в который вовлечены многие воспалительные каскады. Так, например, в рамках профилактики или лечения данных заболеваний пробиотиком и/или продуктом для лечебно-профилактического питания, и/или функциональным пищевым продуктом, и/или биологически активной добавкой, и/или лечебно-косметическим средством, является важным, чтобы провоспалительные эффекты были как можно более слабыми.

Таким образом, дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные по настоящему изобретению являются наиболее предпочтительно приемлемыми для такого применения. Данные дрожжи обладают несколькими дополнительными преимуществами.

Первым преимуществом является то, что они обладают способностью увеличивать сопротивляемость к боли. Второе преимущество, в частности в случае болезни Крона, состоит в том, что данные дрожжи способны, в частности, ингибировать способность к адгезии и инвазии штаммов, являющихся патогенными и/или имеющих инвазивный характер E. coli, происходящих от больных, страдающих данным заболеванием.

Воспалительный ответ может быть, в частности, обусловлен инвазией любых патогенных микроорганизмов.

Так, например, дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные по настоящему изобретению проявляют хорошую эффективность при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений или заболеваний, обусловленных заселением кишечника микроорганизмами, являющимися патогенными и/или имеющими инвазивный характер прокариотов, таких, как бактерии, или эукариотов, таких, как грибы.

Желудочно-кишечные нарушения или заболевания могут представлять собой хронические воспалительные кишечные заболевания, такие, как язвенный колит, целиакия, болезнь Крона, геморрагический ректоколит.

Помимо того, что дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные позволяют увеличивать сопротивляемость к боли, они представляют собой также интерес для профилактики или лечения патологий или расстройств кишечника, сопровождаемых состоянием гипералгезии. Такие патологии или расстройства могут представлять собой предпочтительно функциональные кишечные расстройства, хронические воспалительные заболевания кишечника (MICI) или пищевую непереносимость (аллергии, выработка условных рефлексов и т.д.), характеризующиеся хронической висцеральной болью.

Данные дрожжи предпочтительно приемлемы для профилактики или лечения гипералгезии, в частности, синдрома раздражения кишечника (SII) любой формы (запор, диарея или их комбинация), а также хронических висцеральных болей, не относящихся к SII, таких, как функциональные абдоминальные боли без затруднений дефекации (FAPS: Functional Abdominal Pain) и боли, связанные с пищевой непереносимостью и целиакией.

Дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные, или любые композиции, содержащие их, могут быть также приемлемыми в качестве профилактики у пациентов, имеющих предрасположенность или повышенную чувствительность к нарушениям или заболеваниям такого типа, или в качестве лечения, например, в случае кризисов или в течение более длительных периодов. Композиции и способы по настоящему изобретению могут уменьшать страдания больных, ослаблять симптомы или причину таких нарушений.

Объединение действия данных дрожжей и/или их производных по настоящему изобретению на боль, воспаление и микроорганизмы, являющиеся патогенными и/или имеющие инвазивный характер, вызывает некоторым образом улучшение самочувствия, здоровья и/или комфортного состояния желудочно-кишечного тракта человека или животного.

Композиция по настоящему изобретению может содержать дрожжи ScPro1 и/или дрожжи SCB1, и/или по меньшей мере одно производное дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выбранное из экстрактов дрожжей, производных продуктов клеточных стенок, париетальных глюканов, париетальных маннопротеинов, липидных фракций дрожжей, фракций нуклеиновых кислот дрожжей (РНК, ДНК), в количестве в интервале приблизительно от 10 7 до 6·10 10 КОЕ и предпочтительно в интервале от 10 8 до 2·10 10 КОЕ или в интервале от 1 мг до 10 г и предпочтительно в интервале от 1 мг до 1 г. Такое количество может представлять собой суточное количество, принимаемое в один или несколько приемов в течение суток.

Предпочтительно дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные применяют при терапевтическом или нетерапевтическом назначении в суточной дозе в интервале от 10 7 до 6·10 10 КОЕ (колониеобразующих единиц) и предпочтительно в интервале от 10 8 до 2·10 10 КОЕ.

В случае, когда дрожжи и/или их производные находятся в активной, а не в реактивируемой форме, суточная доза, приемлемая при терапевтическом или нетерапевтическом назначении, находится предпочтительно в интервале от 1 мг до 10 г и более предпочтительно в интервале от 1 мг до 1 г. Эффективная суточная доза может быть введена в один, два, три или четыре приема.

Дрожжи и/или их производные по настоящему изобретению или композиции, содержащие их, предпочтительно вводят пероральным путем. Их количество может составлять терапевтически эффективную дозу, что означает, что по меньшей мере один из симптомов уменьшается или подавляется.

Дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные могут быть включены в пищевую композицию, предназначенную для человека или животного, и/или введены с эксципиентами или наполнителями, приемлемыми для перорального введения.

Композиция, предназначенная для питания человека, может представлять собой жидкость, пасту или твердое вещество. В частности, композиция может представлять собой молочный продукт, такой, как сыр, масло, йогурт или сливки, продукт на основе фруктов, такой, как фруктовый сок, компот или фруктовая паста, напиток или твердый пищевой продукт, например, легкие закуски, галеты, или другой продукт. Таким образом, композиция содержит дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные и компоненты пищевого продукта или напитка.

Дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные также могут быть включены в фармацевтическую композицию. Фармацевтическая композиция является приемлемой для перорального введения. Таким образом, она содержит дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные, а также соответствующую традиционную основу, выбранную из эксципиентов, разрешенных для применения в фармацевтических композициях. Композиция может быть изготовлена в виде жидкости, такой, как сироп или ампулы для питья, или в виде таблеток, желатиновых капсул, пакетиков, капсул или порошков и других приемлемых галеновых препаратов.

Кроме того, дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные могут быть введены с другими пробиотиками и/или другими функциональными ингредиентами, в частности, с пробиотическими бактериями, в частности, для наиболее полного профилактического действия.

В качестве примера можно упомянуть молочные бактерии родов Lactobacillus, Bifidobacterium, Pediococcus, Propionibacterium или Leuconostoc.

Дрожжи ScPro1 и/или SCB1 и/или их производные также могут быть введены с другими активными веществами, такими как антибиотики, аналгетические средства, противодиарейные средства, слабительные средства и их смеси.

Далее настоящее изобретение поясняется примерами и фигурами, приведенными в порядке пояснения и неограничительным образом:

— на фиг.1 показано изменение выживаемости дрожжей ScPro1 в пищеварительной системе, моделирующей толстую кишку человека, соответственно примеру 2;

— на фиг.2 показано действие дрожжей ScPro1 на микрофлору толстой кишки соответственно примеру 2;

— на фиг.3 и 4 показано изменение численности клеток Candida albicans в испражнениях мышей в опытах 1 и 2 примера 5, соответствующих модели профилактики (фиг.3) и лечения (фиг.4);

— на фиг.5 показана процентная доля остаточной адгезии клеток Escherichia coli AIEC LF82 на эпителиальных клетках кишечника человека в зависимости от количества дрожжей ScPro1 при предварительной инкубации; клетки дрожжей инкубировали с эпителиальными клетками кишечника в течение часа. Инфицирование клеток штаммом AIEC LF82 осуществляли в присутствии дрожжей ScPro1 соответственно примеру 6;

— на фиг.6 показана процентная доля остаточной адгезии клеток Escherichia coli AIEC LF82 на эпителиальных клетках кишечника человека в зависимости от количества дрожжей ScPro1 при совместной инкубации; клетки дрожжей и клетки Escherichia coli инкубировали одновременно с эпителиальными клетками кишечника в течение часа соответственно примеру 6;

— на фиг.7 показана оценка интенсивности воспаления кишечника мышей согласно макроскопической шкале Wallace после введения дрожжей ScPro1 и SCB1 соответственно примеру 4;

— на фиг.8 показана оценка интенсивности воспаления интестинального эпителия кишечника мышей согласно гистологической шкале Ameho после введения дрожжей ScPro1 и SCB1 соответственно примеру 4;

— на фиг.9 показана оценка интенсивности воспаления кишечника мышей согласно макроскопической шкале Wallace после введения дрожжей ScPro1 и SCB1, введенных по отдельности или в комбинации, соответственно примеру 4;

— на фиг.10 показана оценка интенсивности воспаления интестинального эпителия мышей согласно гистологической шкале Ameho после введения дрожжей ScPro1 и SCB1, введенных по отдельности или в комбинации, соответственно примеру 4;

— на фиг.11 показан уровень экспрессии иРНК гена, кодирующего белок IL-10, через один и три часа после приведения в контакт дрожжей или их производных по настоящему изобретению с эпителиальными клетками кишечника человека соответственно примеру 7;

— на фиг.12 показан уровень экспрессии иРНК гена, кодирующего нуклеарный рецептор PPARα, через один и три часа после приведения в контакт дрожжей или их производных по настоящему изобретению с эпителиальными клетками кишечника человека соответственно примеру 7;

— на фиг.13 показано модулирование экспрессии иРНК гена, кодирующего белок IL-10, через один и три часа после приведения в контакт производных дрожжей по настоящему изобретению с эпителиальными клетками кишечника человека соответственно примеру 7;

— на фиг.14 показана экспрессия гена, кодирующего белок IL-10, в эпителиальных клетках кишечника мышей после введения дрожжей и/или их производных по настоящему изобретению (пример 4);

— на фиг.15 показана экспрессия гена, кодирующего нуклеарный рецептор PPARα, в эпителиальных клетках кишечника мышей после введения дрожжей и/или их производных по настоящему изобретению (пример 4);

— на фиг.16 показано количество цитокина IL-10 в пг/мл, секретированного интестинальными клетками биопсийных материалов больных, не обязательно страдающих болезнью Крона, после приведения их в контакт с дрожжами и/или их производными по настоящему изобретению (пример 8);

— на фиг.17 показано количество цитокина TNF-α в пг/мл, секретированного интестинальными клетками биопсийных материалов больных, не обязательно страдающих болезнью Крона, после приведения их в контакт с дрожжами и/или их производными по настоящему изобретению (пример 8);

— на фиг.18 показаны результаты испытаний по определению способности связывания пили типа 1 с маннопротеиновыми фракциями (EL05 и EL06) дрожжей ScPro1;

— на фиг.19A и 19B показана соответственно средняя процентная доля остаточной адгезии и остаточной инвазии штамма AIEC LF82 по отношению к клеткам T84 в случае совместной инкубации с возрастающими концентрациями дрожжей (пример 6) — *p F = 1 − 2 − ( t / T ) b

где F означает порцию удаляемой пищи, t означает время, T означает время полувыведения пищевого продукта, а b означает параметр, описывающий форму кривой. Принятые параметры: T = 15 мин; b = 1.

Параметры опорожнения тонкого кишечника: опорожнение тонкого кишечника осуществляли соответственно модифицированной зависимости Elashoff (при этом введение параметра d обеспечивает замедление опорожнения в конце пищеварения, Fm = F + d·t 3 ). Принятые параметры: T = 150 мин; b = 2,4; d = -10 -7 (ср. фиг.2).

Заданные значения pH:

желудок (мин/ед. pH): 0/6,0; 10/3,2; 20/2,4; 40/1,8; 60/1,6; 90/1,5; 300/1,5;

двенадцатиперстная кишка: 6,4;

подвздошная кишка: 7,2.

NaHCO3 в трех участках тонкого кишечника;

экстракт желчи в двенадцатиперстную кишку;

экстракт поджелудочной железы в двенадцатиперстную кишку;

Удаление «малых» порций кишечного химуса осуществляли на двух уровнях TIM1 (тощая кишка и подвздошная кишка) посредством гемодиализаторов. Диализ кишечного химуса осуществляли непрерывно с солевым раствором, состав которого был близок к составу плазмы крови. Диализаты собирали в диализные мешки.

Отбор проб осуществляли в процессе пищеварения на разных уровнях тракта с целью контроля выживаемости испытуемых дрожжей.

Подсчеты численности дрожжей осуществляли соответственно традиционным микробиологическим методикам и принятому отбору проб: в желудке через 10, 20, 30 и 45 мин, на выходе из тонкого кишечника с накоплением в течение часа и в конечном остатке.

Методика подсчета изложена далее.

Для каждой отобранной пробы быстро осуществляли последовательное десятикратное разведение стерильным физиологическим раствором (NaCl, 8,5 г/л). Затем 0,1 мл каждого разведения наносили и затем распределяли по поверхности агаровой среды, разлитой в чашки Петри (две чашки на одно разведение). Чашки инкубировали в течение 48 ч при 35°C перед подсчетом «колониеобразующих единиц» (КОЕ).

Результаты подсчета выражали в КОЕ/мл (необработанные данные) и в процентном отношении клеток активных дрожжей по сравнению с числом клеток изначально введенных дрожжей для определения уровня выживаемости дрожжей в желудке и на выходе из тонкого кишечника.

В приведенной далее таблице обобщены теоретические уровни выживаемости (при 100%-й жизнеспособности) и реальные значения, полученные для каждого штамма на уровне желудка, в накопленной пробе на выходе из тонкого кишечника после 5 ч пищеварения и в накопленной пробе системы после 5 ч пищеварения.

Продукты пищеварения Введенные дрожжи, КОЕ На выходе из желудка через
T = 45 мин
На выходе из тонкого кишечника через
T = 5 ч
Общая выживаемость через
T = 5 ч
ScPro1, образец 1 3,5·10 10 89% 100% 106%
ScPro1, образец 2 2,0·10 10 88% 95% 106%
SCB1 1 1,5·10 10 83% 76% 81%
SCB1 2 1,5·10 10 85% 69% 76%

Данные результаты хорошо демонстрируют превосходную выживаемость в желудочно-кишечном тракте дрожжей ScPro1 и SCB1.

ПРИМЕР 2. Выживаемость дрожжей ScPro1 в искусственной пищеварительной среде, моделирующей кишечник человека

Исследование выживаемости дрожжей ScPro1 во время ферментации в толстой кишке и влияние дрожжей на кишечную микрофлору

Дрожжи ScPro1 в сухой активной форме были испытаны и исследованы in vitro в искусственной пищеварительной среде, моделирующей пищеварение человека, и, в частности, путем исследования изменения и воздействия жизнеспособных испытуемых дрожжей на среду во время ферментации в толстой кишке.

Ферментация в толстой кишке является непрерывной ферментацией с последовательным поступлением среды для сохранения микрофлоры. Данная среда содержит главным образом сложные углеводные соединения, не переваренные в верхней части пищеварительного тракта (крахмал, пектин, целлюлоза т.п.), в большей или меньшей степени гидролизованные белковые соединения и муцин.

Ферментированные соединения извлекаются из среды толстой кишки также последовательно. Среда проходит через систему диализа, обеспечивающую непрерывное удаление растворимых продуктов ферментации.

Диализат собирают для анализа жирных кислот с короткими цепями (AGCC). Среду выдерживают в анаэробных условиях, создаваемых за счет собственных газов ферментации, при этом среда имеет окислительно-восстановительный потенциал меньше -300 мВ. В заключение pH доводят до заданного значения, равного 6.

Каждый цикл пищеварения включал в себя: период стабилизации микрофлоры в течение 2-3 дней после засева толстой кишки, период обработки (по меньшей мере в течение 3 дней) по меньшей мере с одной ежедневной добавкой продукта и период прекращения обработки в течение 3 дней. В каждом опыте контролировали и/или регистрировали следующие параметры:

— изменение различных аэробных и анаэробных бактериальных популяций;

— изменение основных продуктов ферментации (AGCC и газы);

— детектирование стандартной ферментативной активности;

— температура, pH и окислительно-восстановительный потенциал.

Ферментацию осуществляли в пенициллиновом флаконе вместимостью 60 мл, закрытом герметизируемой пробкой с септой и заполненном на 30 мл средой толстой кишки (культуральная среда со свежей фекальной микрофлорой). Образец дрожжей прибавляли к 30 мл среды.

Среда толстой кишки состояла, с одной стороны, из микробной суспензии, полученной из свежих испражнений, в буферном фосфатном растворе, а с другой стороны, из типичного пищевого продукта, используемого также для культивирования микрофлоры толстой кишки в искусственной толстой кишке.

После смешивания среды толстой кишки с испытуемым продуктом флакон закупоривали и герметизировали.

Все данные манипуляции производили в вытяжном анаэробном шкафу (в атмосфере смеси газов, не содержащей кислород). Флакон помещали в роторный инкубатор (37°C — 200 об/мин) на 24 ч.

Для каждого продукта испытание осуществляли в двух пробах. При этом в тех же самых условиях готовили также 4 флакона с контрольными пробами (без испытуемого продукта). При этом два флакона обрабатывали немедленно (начальное время), а два флакона инкубировали так же, как и испытуемые флаконы.

Ферментацию останавливали через 24 ч, а затем флаконы обрабатывали.

Продуцирование ферментационных газов. Объем газов, образующихся при ферментации, определяли посредством системы Мариотта (принцип измерения объема воды, вытесняемой давлением газов, содержащихся в пенициллиновом флаконе). При этом анализ газов, содержащихся во флаконе, осуществляли способом CPG (H2, CO2, CH4, O2).

Продуцирование жирных кислот с короткими цепями. Осуществляли отбор первой пробы содержимого толстой кишки. Пробу или замораживали или сразу обрабатывали для определения концентрации AGCC (летучие жирные кислоты с короткими цепями) в надосадочной культуральной жидкости. Данный анализ осуществляли способом CPG. Исследованные метаболиты представляли собой уксусную, пропионовую, масляную, изомасляную, валериановую, изовалериановую, капроновую, изокапроновую и гептановую кислоты.

Микробиологический анализ. Осуществляли отбор второй пробы содержимого толстой кишки и сразу обрабатывали (последовательное десятикратное разведение восстановительной разбавляющей средой) для подсчета численности общей анаэробной, факультативной аэробно-анаэробной и грибковой микрофлоры.

Результаты по выживаемости дрожжей ScPro1 представлены на фиг.1. На данной фигуре каждая вертикальная стрелка указывает на введение дрожжей ScPro1.

Было отмечено, что дрожжи ScPro1 проявляют хорошую выживаемость до 3-го дня после введения и значительную гибель между 4-м и 7-м днями периода введения. Данное обстоятельство показывает, что дрожжи не внедряются во внутреннюю среду толстой кишки.

Результаты микробиологического анализа представлены на фиг.2. Они показывают уменьшение численности энтеробактерий в присутствии дрожжей ScPro1 с повышением после прекращения введения дрожжей. Во время введения дрожжей ScPro1 также было отмечено, что значительно уменьшилась микрофлора, устойчивая к антибиотикам (хлорамфеникол, гентамицин).

Результаты по действию дрожжей ScPro1 на продуцирование летучих жирных кислот с короткими цепями (AGCC) обобщены в приведенной далее таблице (в мМ в среде толстой кишки).

Перед обработкой Во время обработки После обработки
Ацетат 71,4 ± 2,3 57,6 ± 4,2 60,6 ± 0,7
Пропионат 22,8 ± 0,6 26,5 ± 4,2 35,7 ± 1,1
Бутират 35,0 ± 1,6 36,5 ± 2,2 26,6 ± 4,2
Изобутират 3,2 ± 0,3 3,3 ± 0,2 3,4 ± 0,1
Изовалерат 5,6 ± 0,5 5,2 ± 0,2 5,3 ± 0,0
Валерат 8,0 ± 0,6 7,8 ± 1,4 9,1 ± 0,9
Изокапронат 0,1 ± 0,1 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0
Капронат 9,0 ± 1,1 7,3 ± 0,3 5,7 ± 0,7
Гептаноат 0,2 ± 0,2 0,0 ± 0,1 0,0 ± 0,0
Итого 155,3 ± 2,7 144,1 ± 6,8 146,4 ± 3,4

Во время обработки было отмечено уменьшение содержания ацетатов, частично в пользу пропионатов, что предполагает уменьшение активности ацетогенной микрофлоры.

Среди других контролируемых параметров не было замечено явное действие обработки на:

— продуцирование газов (по количеству и содержанию);

— общую и простую (стабильную во времени) концентрацию сахаров;

ПРИМЕР 3. Исследование влияния дрожжей ScPro1 и SCB1 на индуцирование продуцирования цитокинов

Было исследовано влияние активных дрожжей ScPro1 и SCB1 на индуцирование продуцирования цитокинов в периферических мононуклеарных клетках крови человека (PBMC).

Дрожжи ScPro1 и SCB1 были испытаны в сухой быстрорастворимой форме и сухой активной форме в отношении их способности индуцировать продуцирование цитокинов IL-10, IL-12, TNFα, TNFγ в PBMC человека.

Получение периферических мононуклеарных клеток крови человека

Свежую человеческую кровь, полученную от доноров с хорошим здоровьем в Центре гемотрансфузии, разбавляли в 2 раза PBS-Ca (GIBCO) и очищали с градиентом фиколла (GIBCO). После центрифугирования при 400 g в течение 30 минут при 20°C периферические мононуклеарные клетки крови (PBMC) образуют в сыворотке слой в форме круга. PBMC тщательно собирали аспирацией, суспендировали в 50 мл конечного объема с использованием PBS-Ca и промывали 3 раза таким же буферным раствором с центрифугированием в течение 10 минут при 20°C и 350 g. Затем PBMC снова суспендировали, используя полную среду RPMI (GIBCO), обогащенную 10% масс./об. эмбриональной телячьей сыворотки (инактивированной при 56°C в течение 30 минут), 1% масс./об. L-глутамина (GIBCO) и гентамицином (150 мкг/мл) (GIBCO). Количество PBMC подсчитывали под микроскопом, отрегулированным на концентрацию 2·10 6 клетка/мл, и распределяли (в 1 мл аликвоты раствора) по 24-луночным чашкам для культивирования клеток (Corning, Inc.).

После культивирования, осуществленного в течение ночи, Lactobacillus, Lactococcus и Escherichia coli (контрольные штаммы) промывали 2 раза буферным раствором PBS, pH = 7,2, перед последующим суспендированием в PBS с концентрацией 2·10 9 КОЕ/мл.

Концентрация дрожжей, использованная в первой серии опытов, составляла 2·10 8 КОЕ/мл. Для исследования сравнения исходной дозы можно было осуществить последовательные разведения 10 на 10 для сравнения действия при концентрациях 2·10 7 , 2·10 8 и 2·10 9 КОЕ/мл.

Инкубация периферических мононуклеарных клеток крови человека

10 мкл рабочей суспензии помещали в лунки чашек, содержащие PBMC, и инкубировали при 37°C в атмосфере смеси 5% CO2 и 95% атмосферного воздуха. После инкубации в течение 24 часов надосадочную жидкость отсасывали, центрифугировали при 2000 об/мин (модель Эппендорфа), извлекали осадок и хранили при -20°C.

Контрольный образец состоял из грамположительных бактерий (Lactobacillus и Lactococcus), грамотрицательных бактерий (Escherichia coli) и буферного раствора при отсутствии дрожжей.

Количественное определение цитокинов

Уровни экспрессии цитокинов определяли способом ELISA. Планшеты для анализа ELISA покрывали антителом (в течение ночи), а антитело насыщали 1%-м раствором PBS/BSA (бычьего сывороточного альбумина). Градуировочную кривую получали с известными концентрациями цитокинов с пределами обнаружения от 15,62 до 2000 пг/мл (инкубация в течение ночи). Исследование и количественное определение антицитокина производили измерением активности стрептавидина с субстратом TMB (тетраметилбензидин, Pharmingen2). Были использованы коммерческие наборы Pharmingen в соответствии с описанием изготовителя. Были выбраны четыре цитокина: 3 провоспалительных (TNFα, IFNγ, IL-12) и один противовоспалительный (IL-10).

Ответы 4 цитокинов на 5 различных доноров оценивали при соотношении «дрожжи/PBMC», равном 1/1.

Результаты количественного определения 4 цитокинов, секретированных в надосадочную культуральную жидкость, обобщены в приведенной далее таблице A. Данные представлены как среднее значение (Moy) количественного определения по 5 донорам. В таблице приведены также значения стандартной ошибки среднего значения (Sem).

Таблица A
IL-10 (пг/мл) IFNγ (пг/мл) TNFα (пг/мл) IL-12 (пг/мл)
Moy Sem Moy Sem Moy Sem Moy Sem
Негативная контрольная проба 0 0 50 0 50 0 0 0
E. coli 2474 839 57376 29591 11185 3875 15 15
Lactococcus lactis 111 43 136103 62706 25362 9818 1101 543
Bifidobacterium longum 1072 355 33780 27164 14517 5601 22 20
Lactobacilus acidophilus 435 259 85543 46838 18369 6857 529 343
SCB1 569 291 27807 19231 6492 2698 14 10
ScPro1 442 292 15218 9304 3643 1847 8 5

1) продуцирование в случае дрожжей ScPro1 и SCB1 очень малого, в некоторых случаях не обнаруживаемого количества IL-12, индуцированного PBMC, в отличие от сравнительных бактерий;

2) существенные уровни IL-10 в обоих случаях активных дрожжей, позволившие выявить, что SCB1 имеет более хороший результат, чем ScPro1;

3) явно меньшие по сравнению с различными испытуемыми пробиотическими бактериями количества IFNγ и TNFα, секретированные под действием дрожжей ScPro1 и SCB1.

— очевидно, что дрожжи ScPro1 и SCB1 в присутствии PBMC не индуцируют экспрессию провоспалительного цитокина IL-12 в противоположность тому, что традиционно наблюдают в случае пробиотических лактобактерий;

— дрожжи ScPro1 и SCB1 в присутствии PBMC индуцируют существенные уровни IL-10 (противовоспалительного);

— количества IFN-γ и TNF-α, секретированных PBMC в присутствии дрожжей ScPro1 или SCB1, явно меньше, чем в случае пробиотических бактерий.

Пример 4. Оценка защитного действия дрожжей ScPro1 и SCB1 в случае химически индуцированного колита (TNBS) в модели с мышью

Традиционно используемая предложенная модель с животным была адаптирована для измерения противовоспалительного действия дрожжей.

В данном опыте были использованы мыши линии Balb/c в возрасте 6 недель. Мыши были акклиматизированы в условиях лаборатории в течение недели перед опытом со свободным доступом к воде и пище. Каждый образец испытывали на группе из 10 мышей. Колит индуцировали в цикле со свободным доступом к питьевой воде, содержавшей 5% (масс./об.) TNBS, в течение 7 дней. Дрожжи вводили перорально один раз в день через желудочный зонд за 3 дня до начала индуцирования колита посредством TNBS и в течение периода обработки TNBS (7 дней).

Кроме двух испытуемых групп использовали контрольную группу (негативный контроль), в которой применяли только физиологический раствор.

Параметры испытаний, полученные по результатам обработки, приведены далее.

— Макроскопическое оценивание воспаления кишечника (шкала Wallace). Толстая кишка каждой мыши была осмотрена под препаровальной лупы (5-кратное увеличение) для оценки макроскопических повреждений по шкале Wallace от 0 до 10 в зависимости от критериев оценки, характеризующих степень воспаления, таких, как гиперемия, толщина стенки толстой кишки и площадь изъязвления.

— Гистологическое оценивание воспаления (шкала Ameho). Для осуществления гистологического оценивания по шкале Ameho от 0 до 6 в зависимости от степени инфильтрации воспаления, наличия эрозии, изъязвлений или некрозов и глубины, а также распространения повреждений по поверхности использовали участок толстой кишки, отбираемый точно в 2 см от анального канала. Количественное определение деградации и повреждений кишечника осуществляли 2 независимых эксперта.

— Количественное определение экспрессии генов, кодирующих IL-10 и PPARα. С этой целью из тканей толстой кишки выделяли общую РНК посредством набора RNeasy (Macherey Nagel, Хердт, Франция) согласно инструкции изготовителя. Количественное определение информационной РНК осуществляли, используя спектрофотометр. После обработки при 37°C в течение 30 минут с 20-50 единицами препарата DNase I RNase-free (Roche Diagnostics Corporation, Индианаполис, Индиана, США) были использованы праймеры олиго-DT (Roche Diagnostics Corporation, Индианаполис, Индиана, США) для синтеза простых одноцепочечных кольцевых ДНК. Информационные РНК количественно определяли с помощью набора SYBR green Master Mix (Applera, Куртабеф, Франция) и олигонуклеотидов человека, предназначенных для исследований in vitro (см. табл. B, приведенную далее), посредством прибора GeneAmp Abiprism 700 (Applera, Куртабеф, Франция). В каждом опыте использовали эталонные и неэталонные контрольные образцы. Для каждого образца осуществляли три измерения. Интенсивность окраски препарата SYBR vert определяли с использованием программы Abiprism 7000 SDS (Applera, Куртабеф, Франция). Все результаты нормализованы по сравнению с геном, кодирующим β-актин.

Таблица B
Гены Последовательности нуклеотидных затравок
β-актин F: 5′-AAgTCCCTCACCCTCCCAAAAg-3′
R: 5′-AAgCAATgCTgTCACCTTCCC-3′
PPARα F: 5′-ACgATgCTgTCCTCCTTgATg-3′
R: 5′-gTgTgATAAAgCCATTGCCgT-3′
IL-10 F: 5′-CAgTCAgCCAgACCCACAT-3′
R: 5′-gCTCCACTgCCTTgCTTT-3′

Дрожжи ScPro1 и SCB1 были испытаны в описанной ранее стандартной модели профилактики. Контроль массы тела животных перед индуцированием колита показал, что композиции дрожжей, вводимые мышам, очень хорошо переносились.

Воспаление кишечника, оцененное по шкале Wallace, в случае дрожжей ScPro1 (сухая активная форма, 1 мг/сутки) и SCB1 уменьшилось на 60% по сравнению с позитивным контролем. Дрожжи SCB1 также вызывали уменьшение воспаления. Некроз кишечника, оцененный по шкале Ameho, в случае дрожжей ScPro1 (сухая быстрорастворимая форма, от 1 мг до 100 мкг/сутки) уменьшился на треть по сравнению с позитивным контролем.

Дрожжи ScPro1 и SCB1, введенные по отдельности или совместно, повысили уровень экспрессии генов, кодирующих противовоспалительный интерлейкин IL-10 и нуклеарный рецептор PPARα

На фиг.7-10 хорошо видны превосходные значения макроскопических показателей по шкалам Wallace и Ameho для дрожжей ScPro1 и SCB1 с различными суточными дозами.

На фиг.7 и 8 представлены соответственно макроскопический показатель по шкале Wallace и гистологический показатель по шкале Ameho для дрожжей для ScPro1 и SCB1 в сухой быстрорастворимой форме, вводимых ежедневно в количестве от 10 мкг до 1 мг.

Цифрами при каждом столбце графиков, показанных на фиг.7 и 8, обозначены следующие варианты:

1 означает TNBS, взятый отдельно;

2 означает TNBS + ScPro1 (1 мг);

3 означает TNBS + ScPro1 (100 мкг);

4 означает TNBS + SCB1 (1 мг);

5 означает TNBS + SCB1 (100 мкг).

Можно заметить, что дрожжи ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме, вводимые с дозой 100 мкг/сутки, в значительной степени уменьшают повреждения на макроскопическом и гистологическом уровнях.

На фиг.9 и 10 представлены соответственно макроскопический показатель по шкале Wallace и гистологический показатель по шкале Ameho для дрожжей ScPro1 и SCB1, взятых по отдельности или в комбинации в сухой быстрорастворимой форме или в сухой активной форме и вводимых ежедневно в количестве от 100 мкг до 1 мг.

На фиг.14 и 15 показаны соответственно уровни экспрессии генов, кодирующих противовоспалительный интерлейкин и нуклеарный рецептор PPARα, на уровне интестинальных клеток.

Цифрами при каждом столбце графиков, показанных на фиг.9, 10, 14 и 15, обозначены следующие варианты:

1 означает TNBS, взятый отдельно;

2 означает TNBS + ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме (100 мкг);

3 означает TNBS + ScPro1 в сухой активной форме (100 мкг);

4 означает TNBS + SCB1 в сухой активной форме (100 мкг);

5 означает TNBS + ScPro1 в сухой активной форме (1 мг);

6 означает TNBS + ScPro1 в сухой активной форме (100 мкг);

7 означает TNBS + ScPro1 в сухой активной форме (100 мкг) + SCB1 (100 мкг).

Можно отметить, что дрожжи ScPro1 в сухой активной форме в значительной степени вызывают повреждения на макроскопическом уровне и существует синергический противовоспалительный эффект комбинации ScPro1 и SCB1 как на макроскопическом уровне, так и на гистологическом уровне.

Дрожжи ScPro1 и SCB1 повысили соответственно в 2,9 и 3,1 раза уровень экспрессии гена, кодирующего противовоспалительный интерлейкин IL-10, при дозах 100 мкг. Комбинация ScPro1 + SCB1 (столбец № 7) повысила в 2,7 раза данный уровень экспрессии (фиг.14).

Дрожжи ScPro1 и SCB1 повысили соответственно в 1,5 и 1,6 раза уровень экспрессии гена, кодирующего нуклеарный рецептор PPARα, при дозах 100 мкг. Комбинация ScPro1 + SCB1 (столбец № 7) повысила в 1,7 раза данный уровень экспрессии (фиг.15).

ПРИМЕР 5. Исследование влияния дрожжей ScPro1 и SCB1 на заселение дрожжами Candida albicans на уровне кишечника в случае химически индуцированного воспаления в модели с мышью

Целью исследования является определение эффектов введения дрожжей ScPro1 и SCB1 пробиотического типа на заселение кишечника патогенными дрожжами Candida albicans и его эффект потенцирования воспаления в случае химически индуцированного колита в модели с мышью.

Испытуемые дрожжи приняты в сухой быстрорастворимой форме.

Мыши-самки линии Balb/C имели возраст от 4 до 6 недель. Со дня J0 до дня J14 животные получали DSS (Dextran Sodium Sulfate (сульфат декстраннатрия) с концентрацией 1,5% в питьевой воде для химического индуцирования воспаления.

Было осуществлено три опыта.

В первом опыте со дня J5 мышам через канюлю вводили 5·10 7 клеток дрожжей ScPro1 в 200 мкл PBS (буферный фосфатный раствор). Данную процедуру повторяли ежедневно в течение 19 дней. В день J0 мышам через канюлю вводили 5·10 7 клеток дрожжей штамма C. albicans SC5314 в 200 мкл PBS.

Во втором опыте в день J0 мышам через канюлю вводили 5·10 7 дрожжевых клеток штамма C. albicans SC5314 в 200 мкл PBS. Через 4 дня части мышей через желудочный зонд вводили по 5·10 7 клеток дрожжей ScPro1 в 200 мкл PBS. Данную процедуру повторяли ежедневно в течение 14 дней.

В третьем опыте в день J0 мышам через канюлю вводили 5·10 7 клеток дрожжей штамма C. albicans SC5314 в 200 мкл PBS. Через час части мышей через желудочный зонд вводили по 5·10 7 клеток дрожжей ScPro1 в 200 мкл PBS. Данную процедуру повторяли ежедневно в течение 14 дней.

Животных (участвовавших в опытах 1, 2 и 3) ежедневно контролировали по следующим показателям:

— консистенция испражнений, анальное кровотечение, масса тела (клинический показатель);

— ретрокультивирование 1 мг испражнений, гомогенизированных в 1 мл PBS, 10 мкл которого засевали на среду Candi-select; после культивирования в течение 24 ч при 37°C подсчитывали КОЕ C. albicans (окрашенных в синий цвет) и S. cerevisiae (окрашенных в зеленый цвет);

— животных забивали по окончании испытания. Сразу отбирали кровь пункцией в сердце, декантировали при комнатной температуре, сыворотку отделяли центрифугированием и хранили при -80°C. Отбирали толстую кишку и делили на 4 части, из которых 3 замораживали, а 1 помещали в фиксатор (PFA, 4%) для гистологического исследования.

Как можно видеть на фиг.3, в первом опыте (испытание на профилактическое действие) в данной модели химически индуцированного колита наблюдается, что введение DSS в значительной степени увеличивает заселение слизистых оболочек кишечника дрожжами C. albicans, начиная с дня J4 (DSS + Ca). Представляет большой интерес, что введение пробиотических дрожжей ScPro1 в течение 19 дней в значительной степени уменьшает заселение дрожжами C. albicans, индуцированное посредством DSS.

Как видно из фиг.4, во втором опыте (испытание на терапевтическое действие) наблюдается, что введение пробиотических дрожжей ScPro1 или SCB1 уменьшает заселение, индуцированное посредством DSS. Кроме того, действие дрожжей ScPro1 заметно даже после прекращения обработки посредством DSS в день J14.

Из изложенного следует, что введение дрожжей ScPro1 или дрожжей SCB1 в значительной степени уменьшает заселение дрожжами C. albicans, причем как в условиях профилактики, так и в условиях терапии. Следует заметить, что такое защитное действие продолжается даже после прекращения терапии.

ПРИМЕР 6. Исследование ингибирующего действия дрожжей ScPro1 или SCB1 или их производных на способность к адгезии и инвазии патогенных штаммов E. coli, выделенных из биопсийных материалов тонкого кишечника больных, страдающих болезнью Крона

Влияние активных дрожжей ScPro1, SCB1 и их производных было исследовано в отношении их ингибирующего действия на способность к адгезии и инвазии патогенных штаммов E. coli, выделенных из биопсийных материалов тонкого кишечника больных, страдающих болезнью Крона.

Штаммы E. coli, сокращенно называемые AIEC от Adherent-Invasive E. coli и выделенные из биопсийных материалов тонкого кишечника больных, страдающих болезнью Крона (MC), способны прикрепляться и захватывать эпителиальные клетки кишечника.

Штамм E. coli LF82, выделенный из хронически поврежденного участка тонкого кишечника у больного, страдающего болезнью Крона, обладает всеми характеристиками инвазивного бактериального патогена. Характеристика фенотипа «адгезия-инвазия» штамма LF82 и отсутствие генетических определителей инвазии, уже описанных у E. coli, Shigella и Salmonella, привело к детерминированию существования новой патогенной группы E. coli, которая может быть связана с болезнью Крона и обозначена AIEC. После фагоцитоза макрофагами мыши или человека штамм AIEC LF82 выживает и размножается в широкой вакуоли, при этом сохраняя целостность клетки-хозяина. В ответ на инфекцию макрофаги секретируют значительное количество TNFα. Степень распространения штаммов AIEC на уровне повреждений тонкого кишечника больных, страдающих MC, равна 36,4%.

Процесс адгезии бактерии на клетках эукариотов является результатом специфического взаимодействия между лигандом, присутствующим на поверхности бактерии и называемым адгезином, и рецептором протеиновой, гликопротеиновой или гликолипидной природы, экспрессируемым на поверхности эпителиальной клетки-хозяина. Касательно бактерий было доказано, что адгезин FimH пили типа 1 вовлечен в адгезию бактерий AIEC на эпителиальных клетках кишечника. Бактериальный адгезин FimH распознает энтероцитарный рецептор CEACAM6 (называемый также CD66c или NCA), представляющий собой гликопротеин, богатый остатками маннозы и аномально сверхэкспрессируемый на уровне тонкого кишечника у 90% больных, страдающих MC.

В качестве штамма-прототипа был использован штамм AIEC LF82, отличающийся своей способностью к адгезии и инвазии на эпителиальных клетках кишечника в культуре.

Данное исследование было проведено также с 10 штаммами AIEC, выделенными у больных, страдающих MC, для подтверждения результатов, полученных со штаммом AIEC LF82.

Штамм E. coli DAEC (Diffuse Adherent Escherichia Coli) C1845, который прикрепляется к эпителиальным клеткам по механизму, не зависящему от маннозы (адгезины Afa/Dr), был использован в качестве негативной контрольной пробы.

Испытания на агглютинацию

С активными дрожжами ScPro1 и SCB1 были осуществлены испытания на количественную агглютинацию как в присутствии бактерий AIEC, так и в присутствии экстрактов очищенных пили типа 1, полученных исходя из штамма AIEC LF82 согласно методике, описанной Boudeau и соавт. (2001, Mol. Microbiol. 39:1272-84). Индекс агглютинации определяли по фиксированной концентрации дрожжей и переменной концентрации бактерий или очищенных пили типа 1.

В случае фракций дрожжей маннопротеинового типа, для которых не наблюдается агглютинация, определение способности связывания пили типа 1 осуществляли способом ELISA.

Такие испытания традиционно осуществляют в микропланшетах. Фракции дрожжей фиксируют на микропланшете. Различные разведения очищенных пили типа 1 приводят в контакт с фракциями дрожжей. После промывок пили типа 1 открывают посредством антител анти-пили типа 1, полученных от кролика (Boudeau и соавт., 2001). После промывки используют вторичные антитела, связанные с пероксидазой. Количественное определение осуществляют с помощью субстрата пероксидазы (H2O2) и хромогена (тетраметилбензидина) путем измерения оптической плотности на микропланшетном фотометре при 450 нм.

Испытания на ингибирование взаимодействия бактерий AIEC с рецептором CEACAM6, экспрессируемым на поверхности эпителиальных клеток кишечника, дрожжами ScPro1 или SCB1

Для испытания на ингибирование in vitro (предварительная и совместная инкубация) были взяты недифференцированные эпителиальные клетки кишечника T84, в значительной степени экспрессирующие рецептор CEACAM6. Клетки T84 культивировали в атмосфере с 5% CO2 при 37°C в щелочной среде DMEM (среда Игла в модификации Дульбекко), дополненной 50% Ham-F12 (Life Technology) и 10% эмбриональной телячьей сыворотки, декомплементированной при нагревании. К данной среде прибавляли 1% аминокислот, не являющихся незаменимыми (Life Technology), 1% глутамина (Life Technology), 200 ед./л пенициллина, 50 мг/л стрептомицина, 0,25 мг/л амфотерицина B и 1% смеси витамин X-100 для среды MEM (Minimum Essential Medium) (Life Technology). Клетки засевали из расчета 4·10 5 клеток на лунку в 1 мл и инкубировали в течение 48 ч при 37°C в атмосфере с 5% CO2. Затем слой клеток T84 промывали раствором PBS и далее в каждую из лунок прибавляли 1 мл инфицируемой среды (DMEM/F12 + 10% SVF). Бактериальную суспензию в PBS с оптической плотностью DO620, равной 0,1, готовили исходя из штамма AIEC LF82, культивированного в течение ночи при 37°C в бульоне Луриа-Бертани (LB). Клетки T84 инфицировали мультиплетным источником инфекции (MOI) из расчета 10 бактерий на 1 клетку, прибавляя 25 мкл бактериальной суспензии с оптической плотностью DO620, равной 0,1, к инфицируемой среде. Планшет на 24 лунки инкубировали в течение 3 ч при 37°C в атмосфере, обогащенной CO2. Определение остаточной адгезии и остаточной инвазии бактерий осуществляли соответственно описанному далее.

Осуществляли опыт с клетками CHO-K1, не экспрессирующими CEACAM6, и такими же генетически модифицированными клетками, стабильно экспрессирующими CEACAM6 (CHO-K1/CEACAM6). Клетки CHO-K1 культивировали в среде DMEM/F12, содержавшей 5% эмбриональной телячьей сыворотки, 1% L-глутамина, 200 ед./л пенициллина, 50 мг/л стрептомицина и 0,25 мг/л амфотерицина B. Клетки CHO-K1 культивировали в среде DMEM/F12, содержавшей 5% эмбриональной телячьей сыворотки, 1% L-глутамина и 600 мкг/л гигромицина. Клетки засевали в 24-луночный планшет из расчета 2·10 5 клеток на лунку. После инкубации в течение 7-8 ч при 37°C среду заменяли новой культуральной средой, дополненной 5 мкМ бутирата натрия, для индуцирования экспрессии CEACAM6. Для контролирования экспрессии белка CEACAM6 трансфицированными клетками осуществляли вестерн-блоттинг.

После инкубации в течение 20-24 ч при 37°C клетки инкубировали с возрастающими концентрациями штамма дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме в течение 1 ч (опыт предварительной инкубации), затем их инфицировали посредством MOI 20 (4·10 6 бактерий на лунку) для соблюдения соотношения «бактерии/дрожжи», использованного ранее при проведении испытаний с клетками T84. После инкубации в течение 3 ч при 37°C прикрепленные бактерии подсчитывали в отсутствии или в присутствии дрожжей соответственно описанному далее.

В другом опыте использовали операционный материал, полученный от больных. Энтероциты, полученные из биопсийных материалов тонкого кишечника 3 больных, страдающих болезнью Крона, промывали раствором PBS и затем предварительно инкубировали в пробирке Эппендорфа вместимостью 2 мл в 1 мл среды DMEM, содержавшей 20% эмбриональной телячьей сыворотки, в присутствии 0, 1,25, 2,5 или 5 мг/мл штамма дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме. Содержимое пробирки перемешивали вращением в течение 15 мин при 37°C, затем энтероциты инфицировали в присутствии дрожжей 50 мкл культуры в среде LB в течение ночи штаммом AIEC LF82. Далее осуществляли инкубацию в течение 3 ч при перемешивании. Энтероциты промывали 2 раза раствором PBS, затем наносили между предметной пластиной и покровным стеклом и наблюдали с помощью фазоконтрастной микроскопии. Подсчеты бактерий, прикрепленных к щеточной каемке энтероцитов, осуществляли в отсутствии или в присутствии дрожжей. Опыт осуществляли также с не имеющим пили мутантом LF82-delta fimH для определения базального уровня адгезии бактерий AIEC, не распознающих пили типа 1 рецепторами CEACAM6. Испытания на ингибирование адгезии были проведены также в присутствии антитела анти-CEACAM6.

Методика анализа для определения остаточной адгезии и остаточной инвазии бактерий на эпителиальных клетках кишечника T84

Клеточный слой промывали раствором PBS 4 раза по 1 мл, затем клетки подвергали лизису путем инкубации в течение 5 мин при комнатной температуре с 500 мкл 1%-го раствора Triton X-100 в дистиллированной воде. Лизаты разбавляли и затем наносили на агар LB-Agar для определения числа КОЕ, соответствующего числу прикрепленных бактерий.

Для подсчета инвазивных бактерий клеточный слой промывали раствором PBS через 3 ч после инфицирования, затем в течение 1 ч инкубировали 1 мл инфицированной среды, содержавшей 100 мкг/мл гентамицина для уничтожения внеклеточных бактерий. Инвазивные бактерии подсчитывали после лизиса клеток, последовательных разведений и нанесения на агар LB-agar.

Уровни адгезии и инвазии штамма AIEC LF82 анализировали по сравнению с клетками, инфицированными штаммом AIEC LF82 и не подвергавшимися какой-либо обработке дрожжами или производными дрожжей.

Все результаты выражены соответственно соотношению R:

R = число прикрепленных или инвазивных бактерий в присутствии дрожжей ScPro1/число прикрепленных или инвазивных бактерий в отсутствии обработки.

Методика 1. Модель совместной инкубации

Клетки T84 и суспензию бактерий получали соответственно методике, описанной ранее в испытании на адгезию и инвазию. Дрожжи или производные дрожжей суспендировали в PBS с определенной концентрацией и 25 мкл такой суспензии прибавляли к инфицируемой среде клеток T84 (1 мл). Затем клетки сразу инфицировали бактериальным штаммом MOI 10. Смесь «суспензия бактерий/дрожжи, инкубированные в присутствии клеток» гомогенизировали, а затем 24-луночный планшет инкубировали в течение 3 ч при 37°C. Уровни адгезии и инвазии бактериального штамма определяли соответственно описанному ранее и при этом в отсутствии и в присутствии дрожжей или экстрактов дрожжей при инфицировании. Соотношение между уровнем бактериальной адгезии или инвазии в отсутствии дрожжей (100%) и уровнем бактериальной адгезии или инвазии в присутствии дрожжей представляет собой уровень остаточной адгезии или остаточной инвазии бактерий.

Методика 2. Модель преварительной инкубации

Клетки T84 и суспензия бактерий получали соответственно методике, описанной ранее в испытании на адгезию и инвазию. Суспензию дрожжей или производных дрожжей прибавляли к инфицируемой среде (1 мл) клеток T84 в объеме 25 мкл. Суспензию дрожжей гомогенизировали, а затем инкубировали в течение 1 ч при 37°C в 24-луночном планшете для культивирования клеток. После данной инкубации клетки T84 инфицировали бактериальным штаммом MOI 10 в присутствии дрожжей в течение 3 ч при 37°C. Подсчет прикрепленных и инвазивных бактерий осуществляли соответственно описанному ранее в присутствии или в отсутствии дрожжей для определения процентной доли остаточной адгезии или остаточной инвазии, при этом 100% означает адгезию или инвазию в отсутствии дрожжей.

— Верификация экспрессии CEACAM6

Иммуноцитохимическую маркировку осуществляли для каждой партии культивированных клеток для проверки наличия и оценивания количества экспрессированного CEACAM6. Клетки культивировали на стерильных стеклянных пластинах. Клеточный слой промывали раствором PBS, затем фиксировали 3%-м параформальдегидом при pH = 7,4 в течение 10 минут при комнатной температуре. Клетки инкубировали с моноклональным антителом анти-CEACAM6 (клон 9A7, Genovac), разбавленным в соотношении 1/100 смесью «PBS-5% лошадиной сыворотки», во влажной атмосфере в течение часа. После промывки раствором PBS клетки приводили в контакт с вторичным антителом, связанным с флуорохромом (анти-мышиный FITC, Zymed) и разбавленным в соотношении 1/500 смесью «PBS-5% лошадиной сыворотки», в течение 1 часа во влажной атмосфере. Стеклянные пластины фиксировали на предметном стекле Moewiol и затем визуализировали с помощью флюоресцентного микроскопа.

— Проверка отсутствия клеточной цитотоксичности

Отсутствие клеточной цитотоксичности, индуцированной различными дозами дрожжей, проверяли количественным анализом лактатдегидрогеназы (LDH) в инкубационной среде «дрожжи/клетки» или «FDL/клетки» (Glasser и соавт., 2001).

Испытания на агглютинацию с LF82

Титры агглютинации, полученные с LF82 в присутствии дрожжей ScPro1 или SCB1 в культуре (= свежем виде) или в сухом виде (высушивание до сухой быстрорастворимой или лиофилизованной формы), обобщены в приведенной далее таблице, в которой представлены результаты от 3 до 5 независимых опытов.

Титр агглютинации
Дрожжи Форма Среднее значение Минимальное значение титра Максимальное значение титра
ScPro1 Свежая культура 1/7 1/3 1/12
ScPro1 Сухая быстрорастворимая форма 1/58 1/20 1/96
ScPro1 Сухая лиофилизованная форма 1/43 1/24 1/64
SCB1 Свежая культура 1/28 1/12 1/40
SCB1 Сухая быстрорастворимая форма 1/16 1/12 1/20
SCB1 Сухая лиофилизованная форма 1/19 1/16 1/24

Были получены достоверно хорошие результаты агглютинации с LF82 в случае сухих дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме и SCB1 в сухой быстрорастворимой форме.

Для данных дрожжей была доказана значимость благоприятного воздействия способа и, в частности, способа сушки на их потенциал агглютинации.

Испытания на агглютинацию с очищенными пили

Титры агглютинации, полученные с очищенными пили в присутствии дрожжей ScPro1 в культуре (= свежем виде) или в сухой быстрорастворимой форме и дрожжей SCB1 (в сухой форме) обобщены в приведенной далее таблице.

Титр агглютинации
Дрожжи Форма Опыт 1 Опыт 2 Опыт 3
ScPro1 Свежие прессованные дрожжи 1/300 1/300 1/400
ScPro1 Сухая быстрорастворимая форма 1/600 1/600 1/300
SCB1 Сухая лиофилизованная форма 1/300 1/300 1/200

Данное испытание подтверждает, что для агглютинации в значительной степени необходимо взаимодействие «пили-дрожжи». Учитывая, что пили необходимы для распознавания маннозных структур, именно последние распознаются у дрожжей и принимают участие в наблюдаемом феномене агглютинации. Лучшие результаты получены в случае дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме.

Результаты испытаний по определению способности связывания пили типа 1 с маннопротеиновыми фракциями дрожжей ScPro1

На фиг.18 ясно показано, что очищенные пили типа 1, полученные из штамма AIEC LF82, специфически фиксируются на маннопротеинах дрожжей. Следует заметить, что способ получения (термический или ферментативный) таких маннопротеинов (EL05 и EL06) оказывает незначительное влияние на константу сродства к пили.

Результаты по ингибированию взаимодействия бактерий AIEC с рецептором CEACAM6, экспрессируемым на поверхности эпителиальных клеток кишечника

1/ Распределение образцов дрожжей или производных дрожжей по способности ингибирования адгезии и инвазии штамма AIEC LF82 на эпителиальных клетках кишечника T84 в модели совместной инкубации.

Были исследованы дрожжи ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме (3,09·10 7 клетка/мг), ScPro1 в сухой форме (1,86·10 7 клетка/мг) и SCB1 в сухой быстрорастворимой форме (5,83·10 7 клетка/мг), а также маннопротеины дрожжей EL05 (в сухой форме).

В качестве сравнительного образца прибавляли дрожжи Ultra-levure ® (Biocodex, 2,054·10 7 клетка/мг).

Сравнение ингибирующей способности дрожжей с одинаковым количеством дрожжей в модели совместной инкубации

После промывки раствором PBS и центрифугирования в течение 15 мин при 7500 об/мин образцы дрожжей снова суспендировали в PBS с концентрацией 4·10 8 клетка/мл. Разведение дрожжей в PBS осуществляли с соотношением 1/2, 1/10, 1/20 и 1/100.

Было осуществлено три независимых опыта согласно методике 1. Результаты на фиг.19A и 19B (остаточная адгезия и остаточная инвазия) представлены в виде средних значений уровней остаточной адгезии и остаточной инвазии и интервалов ошибки, соответствующей стандартной ошибке среднего значения.

На фиг.19A и 19B показаны следующие полученные результаты:

— дрожжи ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме и ScPro1 в сухой форме сильно ингибируют адгезию штамма LF82 на клетках T84 в зависимости от дозы. Ингибирование дрожжами ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме в количестве 5·10 5 клетка/мл является более значительным по сравнению с дрожжами ScPro1 в сухой форме в количестве 5·10 6 клетка/мл;

— дрожжи SCB1 в сухой быстрорастворимой форме ингибируют адгезию менее сильно, чем 2 других образца дрожжей: остаточная адгезия при дозе 1·10 7 клетка/мл составляет 45,7% по сравнению с 18,7 и 8% остаточной адгезии для штаммов ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме и ScPro1 в сухой форме соответственно;

— дрожжи ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме значительно ингибируют инвазию клеток T84 штаммом AIEC LF82 при дозе 1·10 5 клетка/мл. При дозе 1·10 7 клетка/мл уровень остаточной инвазии составляет 16,3%;

— для дрожжей ScPro1 в сухой форме и SCB1 в сухой быстрорастворимой форме ингибирующее действие является более медленным при дозе 1·10 6 и 5·10 6 клетка/мл соответственно.

Испытания на ингибирование маннопротеинами EL05 в модели совместной инкубации

Маннопротеины дрожжей EL05 суспендировали в PBS с концентрацией 160 мг/мл. Осуществляли последовательные разведения в PBS с соотношением 1/2, 1/4, 1/8 и 1/40 и прибавляли 25 мкл каждой суспензии маннопротеинов к инфицируемой среде согласно методике 1.

Было осуществлено три независимых опыта. Результаты, показанные на фиг.20A и 20B (остаточная адгезия и остаточная инвазия), представлены в виде средних значений уровней остаточной адгезии и интервалов ошибки, соответствующей стандартной ошибке среднего значения.

На данных фигурах показано, что маннопротеины дрожжей EL05 обладают способностью ингибирования адгезии и инвазии штамма AIEC LF82 на клетках T84 в зависимости от дозы в модели совместной инкубации.

2/ Распределение образцов дрожжей или производных дрожжей по способности ингибирования адгезии и инвазии штамма AIEC LF82 на эпителиальных клетках кишечника T84 в модели предварительной инкубации.

В модели предварительной инкубации были использованы такие же образцы дрожжей и фракций, что и в модели совместной инкубации.

Сравнение ингибирующей способности дрожжей с одинаковым количеством дрожжей в модели предварительной инкубации

После промывки раствором PBS и центрифугирования в течение 15 мин при 7500 об/мин образцы дрожжей снова суспендировали в PBS с концентрацией 4·10 8 клетка/мл. Разведение дрожжей в PBS осуществляли с соотношением 1/2, 1/10, 1/20 и 1/100. Было осуществлено три независимых опыта согласно методике 2.

Результаты, показанные на фиг.21A и 21B (остаточная адгезия и остаточная инвазия), представлены в виде средних значений уровней остаточной адгезии и остаточной инвазии и интервалов ошибки, соответствующей стандартной ошибке среднего значения.

Предварительная обработка клеток T84 дрожжами обеспечивает значительное ингибирование адгезии штамма LF82 при дозе 5·10 6 клетка/мл штамма ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме и ScPro1 в сухой форме. Тем не менее, в случае дрожжей SCB1 в сухой быстрорастворимой форме с такой дозой какого-либо значительного ингибирования не было замечено.

Предварительная обработка клеток T84 дрожжами обеспечивает ингибирование инвазии штамма LF82 при дозе 1·10 5 клетка/мл штамма дрожжей ScPro1 в сухой форме.

При дозе 5·10 5 клетка/мл 3 образца дрожжей индуцируют значительное уменьшение инвазии штамма LF82.

Испытания на ингибирование маннопротеинами EL05 в модели предварительной инкубации

Маннопротеины дрожжей EL05 суспендировали в PBS с концентрацией 160 мг/мл. Осуществляли последовательные разведения в PBS с соотношением 1/2, 1/4, 1/8 и 1/40 и прибавляли 25 мкл каждой суспензии маннопротеинов к инфицируемой среде согласно методике 2. Было осуществлено три независимых опыта. Результаты, показанные на фиг.22A и 22B (остаточная адгезия и остаточная инвазия), представлены в виде средних значений уровней остаточной адгезии и интервалов ошибки, соответствующей стандартной ошибке среднего значения.

Таким образом, маннопротеины EL05 позволяют ингибировать в зависимости от дозы адгезию и инвазию штамма LF82 при концентрации 2 мг/мл.

Результаты испытаний на ингибирование дрожжами адгезии штамма AIEC LF82 в случае CHO-K1, экспрессирующих или не экспрессирующих рецептор CEACAM6, в модели предварительной инкубации

Было осуществлено пять независимых опытов согласно упомянутой ранее методике 2.

На фиг.23 показано, что наблюдается значительное ингибирование адгезии штамма AIEC LF82 на клетках CHO/CEACAM6 при предварительной инкубации с 25 мкг/мл дрожжей. В случае таких клеток замечено ингибирующее действие в зависимости от дозы.

Адгезия штамма AIEC LF82 также наблюдается на клетках CHO-K1, что несомненно обусловлено экспрессией маннозосодержащих белков, экспрессируемых на поверхности таких клеток. Однако, предварительная инкубация штамма LF82 с дрожжами ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме не обеспечивает ингибирование в значительной степени адгезии на нетрансфицированных клетках.

Таким образом, данное обстоятельство свидетельствует, что дрожжи воздействуют на адгезию штамма LF82 с рецепторами CEACAM6, экспрессируемыми клетками.

Результаты ингибирования адгезии штамма AIEC LF82 на уровне щеточной каемки энтероцитов больных, страдающих болезнью Крона, в модели предварительной инкубации

На фиг.24 показаны средние индексы адгезии, полученные в ходе эксперимента и рассчитанные в присутствии или в отсутствии возрастающих концентраций дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме (мг/мл) или в присутствии антитела анти-CEACAM6. По результатам, представленным на данной фигуре, можно констатировать зависящее от дозы значительное уменьшение адгезии штамма AIEC LF82 к щеточной каемке энтероцитов больных в случае присутствия штамма дрожжей ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме. При дозе дрожжей 5 мг/мл остаточная адгезия штамма AIEC LF82 подобна адгезии, наблюдаемой в присутствии антитела анти-CEACAM6, или адгезии, наблюдаемой в случае мутанта, лишенного пили типа 1.

Из данного исследования вытекает, что:

— дрожжи ScPro1 и SCB1, в частности, в сухой быстрорастворимой форме проявляют большую способность агглютинации штамма LF82;

— дрожжи ScPro1 и SCB1 способны ингибировать in vitro адгезию и инвазию эпителиальных клеток человека (T84, энтероциты из биопсийных материалов тонкого кишечника) и клеток CHO, экспрессирующих рецептор CEACAM6 человека, в случае бактерий E. coli в зависимости от дозы;

— маннопротеины способны ингибировать in vitro адгезию и инвазию эпителиальных клеток человека (T84, энтероциты из биопсийных материалов тонкого кишечника) и клеток CHO, экспрессирующих рецептор CEACAM6 человека, в случае бактерий E. coli в зависимости от дозы;

— in vitro дрожжи ScPro1 способны в больших концентрациях частично защищать приблизительно 80% клеток, инфицированных бактериями.

ПРИМЕР 7. Исследование регуляторной роли дрожжей ScPro1, SCB1 и производных дрожжей в экспрессии генов, кодирующих IL-10 и PPARα, в эпителиальных клетках кишечника человека, культивируемых in vitro

Был исследован пробиотический характер дрожжей ScPro1 и SCB1, вводимых по отдельности или в комбинации, и/или фракций дрожжей и их способность ингибировать возникновение воспаления за счет взаимодействия с некоторыми кишечными рецепторами.

Испытания in vitro

В частности, было исследовано действие дрожжей и производных дрожжей по настоящему изобретению на различные рецепторы эпителиальных клетках кишечника путем анализа in vitro двух линий клеток рака толстой кишки CaCo-2 (ATCC HTB-37) и HT-29 (ATCC HTB-38).

С этой целью осуществляли транскрипционный анализ путем экстракции РНК по приведенной далее методике.

Клетки подвергали лизису в тризоле. Затем с растворимой фракцией осуществляли стадию с дезоксирибонуклеазой, прибавляя 200 мкл раствора, содержавшего 10 единиц ингибитора рибонуклеазы и 10 единиц дезоксирибонуклеазы.

10 мкг РНК были ретротранскрибированы в присутствии 200 единиц инверсной транскриптазы, дитиотреитола, олиго-dT15 и дезоксирибонуклеотидов.

Амплифицировали кДНК по известной методике конкурентной полимеразной цепной реакции (по-английски PCR, Polymerase Chain Reaction), используя специфические смысловые и антисмысловые затравки, в частности, гены, такие, как IL-10 и PPARα.

После 40 циклов амплификации, осуществленных в присутствии 1,25 единицы Ampli Taq Gold 5000, и разделения различных образцов на 3%-м геле агарозы интенсивность полос определяли с помощью диссектора.

Результаты выражены как число молекул иРНК на 10 5 молекул β-актина в качестве внутреннего стандарта.

Результаты, приведенные на фиг.11, представляют собой значения экспрессии иРНК через час (индекс A) и через 3 часа (индекс B) после приведения в контакт дрожжей или их производных с эпителиальными клетками кишечника, экспрессирующими ген, кодирующий противовоспалительный белок IL-10.

На фиг.11 цифрами обозначены испытанные дрожжи/производные дрожжей, которые показали уровень быстрой экспрессии, превышающий 4-кратный сравнительный сигнал:

3 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae;

5 означает дрожжи ScPro1 по настоящему изобретению;

6 означает экстракт дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

12 означает фракцию РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Данные результаты хорошо демонстрируют, что дрожжи и производные дрожжей Saccharomyces cerevisiae по настоящему изобретению индуцируют быструю экспрессию, уже через час, гена, кодирующего противовоспалительный цитокин IL-10.

Действительно, по сравнению с необработанным контрольным образцом экспрессия иРНК в случае дрожжей и их производных по настоящему изобретению превышает 4-кратное значение по оси ординат, которое уже соответствует превосходному уровню быстрой экспрессии.

Другие результаты представлены на фиг.13. На данной фигуре показано изменение в зависимости от количества внесенных производных дрожжей экспрессии иРНК гена, кодирующего белок IL-10.

Показанные на фиг.13 значения экспрессии были измерены через час (1 ч) и через три часа (3 ч). Варианты экспрессии в случае дрожжей и экстрактов дрожжей Saccharomyces cerevisiae по настоящему изобретению обозначены цифрами:

5 означает дрожжи ScPro1 по настоящему изобретению;

6 означает экстракт дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

8 означает париетальный β-глюкан Saccharomyces cerevisiae;

9 означает париетальный маннопротеин дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

11 означает фракцию ДНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

12 означает фракцию РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Экспрессию измеряли при различных концентрациях дрожжей и/или их производных.

Чем темнее цвет столбца на фиг.13, тем больше концентрация дрожжей/производного.

Результаты, представленные на фиг.13, показывают, что экстракты дрожжей Saccharomyces cerevisiae по настоящему изобретению индуцируют быструю экспрессию иРНК противовоспалительного цитокина (IL-10).

Результаты, приведенные на фиг.12, представляют собой значения экспрессии иРНК через час (индекс A) и через 3 часа (индекс B) после приведения в контакт дрожжей или их производных с эпителиальными клетками кишечника, экспрессирующими ген, кодирующий нуклеарный рецептор PPARα.

На фиг.12 цифрами обозначены испытанные дрожжи/производные дрожжей, которые показали уровень медленной экспрессии, превышающий 3-кратный сравнительный сигнал:

1 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae ScPro1 по настоящему изобретению в сухой активной форме;

4 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae;

5 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae ScPro1 по настоящему изобретению в сухой активной форме;

8 означает фракцию клеточных стенок дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

9 означает фракцию париетальных β-глюканов дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

10 означает фракцию париетальных маннопротеинов дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

11 означает фракцию ДНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

12 означает фракцию РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Данные результаты хорошо демонстрируют, что дрожжи и производные дрожжей Saccharomyces cerevisiae по настоящему изобретению индуцируют медленную экспрессию, через три часа, гена, кодирующего нуклеарный рецептор PPARα.

Действительно, экспрессия иРНК в случае дрожжей и их производных по настоящему изобретению превышает 3-кратное значение по оси ординат, которое уже соответствует превосходному уровню медленной экспрессии.

ПРИМЕР 8. Исследование ex vivo регуляторной роли дрожжей и производных дрожжей в экспрессии генов, кодирующих IL-10 и TNF-α, в эпителиальных клетках кишечника человека выделенных из биопсийных материалов больных, страдающих болезнью Крона

Влияние дрожжей и/или производных дрожжей на секрецию цитокинов IL-10 (противовоспалительного) и TNF-α (провоспалительного) было исследовано ex vivo на биопсийных материалах больных, страдающих или не страдающих болезнью Крона.

Биопсийные материалы кишечника отбирали у больных, страдавших или не страдавших болезнью Крона, затем помещали на 24 ч в среду HBSS-CMF, дополненную пенициллином и стрептомицином, при 37°C в атмосфере, содержавшей 5% CO2. После промывки биопсийные материалы приводили в контакт с дрожжами или производными дрожжей в течение 4 часов в среде RPMI 1640. Надосадочную жидкость отделяли для анализа способом ELISA. Затем биопсийные материалы подвергали лизису с целью экстракции как иРНК, так и общего белка.

Подтверждение секреции цитокинов осуществляли иммунологическим анализом надосадочных жидкостей культур клеток и белковых экстрактов способом ELISA. Белки денатурировали в течение 5 минут при 95°C в осадительном буферном растворе (об./об.; 75 мМ Tris, pH = 6,8; 5% глицерина; 0,25% бромфенолового синего; 2% SDS, 5% β-меркаптоэтанола), наносили (50 мкг) и разделяли на 10%-м геле полиакриламида. После разделения белки переносили на мембрану PVDF (Hybond-P, Amersham Pharmacia Biotech, Орсе, Франция) способом полусухого электропереноса (Hoefer TE77, Amersham Pharmacia Biotech, Орсе, Франция) в течение 1 часа при 16 В. PPARα и IL-10 выделяли с использованием поликлональных антисывороток кролика, анти-PPARα человека и анти-IL-10 человека, разбавленных в соотношении 1/500, и количественно определяли по хемилюминесценции (E.C.L. Amersham Pharmacia Biotech, Орсе, Франция) на пленке Biomax-MR (Kodak) посредством программы Gel Analyst (CLARA VISION, Париж, Франция).

На фиг.16 и 17 показаны результаты, полученные для IL-10 и TNF-α соответственно. По оси ординат отложено количество цитокинов, измеренное в пг/мл. Каждая точка соответствует результату измерения, полученному с биопсийным материалом больного, страдающего болезнью Крона в стадии обострения (кружок черного цвета), больного, страдающего болезнью Крона в стадии ремиссии (кружок серого цвета), и здоровых людей (кружок белого цвета). Прямоугольник соответствует среднему значению измерений.

На данных фигурах:

— 1 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae ScPro1 по настоящему изобретению в сухой активной форме;

— 3 означает дрожжи Saccharomyces cerevisiae;

— 8 означает фракцию клеточных стенок дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

— 11 означает фракцию ДНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae;

— 12 означает фракцию РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

На фиг.16 показано, что дрожжи ScPro1 по настоящему изобретению увеличивают в 2 раза секрецию противовоспалительного цитокина IL-10 эпителиальными клетками больных, страдающих болезнью Крона или находящихся в стадии ремиссии, по сравнению со здоровыми людьми и негативной контрольной пробой (-), соответствующей измерениям, выполненным в присутствии только физиологического раствора.

На фиг.17 показано, что дрожжи ScPro1 по настоящему изобретению не вызывают увеличение секреции провоспалительного цитокина TNF-α кишечными клетками, выделенными из биопсийных материалов больных, страдающих болезнью Крона или находящихся в стадии ремиссии. Ни дрожжи ScPro1, ни какие-либо другие испытуемые дрожжи или производные дрожжей не индуцируют какую-либо секрецию TNF-α.

ПРИМЕР 9. Исследование аналгетических свойств дрожжей и производных дрожжей в модели с крысами при колоректальном расширении

Опыт со здоровыми крысами

1/ Материалы и методы

В данном исследовании были использованы крысы-самцы линии Sprague Dawley (Charles River, Арбресль, Франция) с массой тела в интервале от 175 до 200 г. Крысы проходили акклиматизацию в условиях питомника в течение недели перед экспериментом. Животных содержали по пять особей в клетке со свободным доступом к воде и пище. Все испытания проводили согласно рекомендациям Committee for Research and Ethical Issues, входящего в International Association for the Study of Pain [6]. Для избежания или минимизации дискомфорта животных были предприняты меры предосторожности.

2/ Оценивание чувствительности толстой кишки

Болевую рецепцию животных оценивали, измеряя давление внутри толстой кишки, необходимое для вызывания поведенческого ответа. Такое давление создавали колоректальным расширением посредством раздувания баллона, введенного в толстую кишку. Поведенческий ответ характеризуется поднятием задней части тела животного и ясно наблюдаемым абдоминальным сокращением, соответствующим сильным сокращениям [7-9]. Крыс анестезировали летучим обезболивающим средством (2%-й изофлюран) и интраректально вводили баллон (методика согласно процедуре, описанной Bourdu [8]) как можно менее травматично на глубину 7 см от ануса. Катетер прикрепляли к основанию хвоста липкой лентой. Через 5 минут крыс помещали в середине коробки из плексигласа, и катетер присоединяли к электронному баростату (Distender Series IIRTM, G & J Electronics). Давление повышали непрерывно до отключения по болевому рефлексу или до достижения предельного значения давления, равного 80 мм рт. ст.

3/ Вводимые соединения

Дрожжи вводили через желудочный зонд один раз в день в течение 15 дней.

Для позитивного контроля за 30 мин до колоректального расширения внутрибрюшинно вводили морфий с дозой 1 мг/кг.

В исследовании использовали 8 групп крыс:

— 10 контрольных крыс, получавших PBS;

— 10 крыс, получавших ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме (100 мкг/день), (группа 1);

— 10 крыс, получавших ScPro1 в сухой форме (100 мкг/день), (группа 2);

— 10 крыс, получавших штамм SCB1 (100 мкг/день), (группа 3);

— 10 крыс, получавших штаммы ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме (50 мкг/день) + SCB1 в сухой быстрорастворимой форме (50 мкг/день), (группа 4);

— 10 крыс, получавших 1 инъекцию морфия (1 мг/кг, за 30 мин до расширения) (группа 5).

На фиг.26 показано, что дрожжи ScPro1, с одной стороны, введенные в сухой быстрорастворимой форме отдельно (группа 1) или в комбинации со штаммом SCB1 (группа 4), а с другой стороны, введенные в сухой активной форме (группа 2), увеличивают порог восприятия боли, значительно уменьшая, таким образом, восприятие висцеральной боли по сравнению с крысами, которым ничего не вводили.

Приведенные далее результаты даны в мм рт. ст. по сравнению с контрольной группой:

— 74,5 ± 3,07 против 53,6 ± 3,9, p = 0,07 для штамма ScPro1 в сухой быстрорастворимой форме — (группа 1);

— 66,5 ± 3,36 против 53,6 ± 3,9, p = 0,04 для комбинации штаммов ScPro1 и SCB1 в сухой быстрорастворимой форме — (группа 4);

— 72 ± 2,59 против 53,6 ± 3,9, p 7 до 6·10 10 КОЕ и предпочтительно от 10 8 до 2·10 10 КОЕ дрожжей штамма по п.1 и/или дрожжей штамма по п.2.

7. Композиция по любому из пп.3-5, отличающаяся тем, что она содержит от 1 мг до 10 г и предпочтительно от 1 мг до 1 г дрожжей штамма по п.1 и/или дрожжей штамма по п.2 и/или по меньшей мере одного из париетальных маннопротеинов EL 05 и EL 06 дрожжей штамма по п.1.

8. Композиция по любому из пп.3-7 для использования при производстве пищевых композиций, предназначенных для улучшения комфортного состояния желудочно-кишечного тракта и/или улучшения кишечной микрофлоры.

9. Композиция по любому из пп.3-7 для использования при производстве фармацевтических композиций, предназначенных для лечения и/или профилактики расстройств кишечника, функциональных нарушений кишечника или заболеваний желудочно-кишечного тракта.

10. Композиция по любому из пп.3-7, для использования при производстве фармацевтических композиций, предназначенных для лечения и/или для профилактики патологий или расстройств кишечника, сопровождаемых состоянием гипералгезии.

11. Композиция по любому из пп.8-10, обеспечивающая введение дрожжей в суточной дозе от 10 7 до 6·10 10 КОЕ и предпочтительно от 10 8 до 2·10 10 КОЕ.

12. Композиция по любому из пп.8-10, обеспечивающая введение дрожжей и/или по меньшей мере одного из париетальных маннопротеинов EL 05 и EL 06 дрожжей штамма по п.1 в суточной дозе от 1 мг до 10 г.

Что надо знать про сахаромицеты буларди (S.boulardii)?

В этой статье я познакомлю вас с пищевой добавкой сахаромицеты буларди , которая является не простым пробиотиком, а обладающим лекарственными свойствами. Вы узнаете особенность этого препарата — пробиотика, какими лекарственными свойствами он обладают, при каких заболеваниях может помочь.

Автор этой статьи доктор Алан Кристиансен.

Сахаромицеты буларди (S. boulardii) являются штаммом дрожжей.

Интересна история их открытия.

Saccharomyces boulardii являются одной из форм пивных дрожжей, которые были официально обнаружены французским ученым, когда он посещал страны Юго-Восточной Азии.

Он заметил, что коренные жители регулярно жуют кожуру фруктов личи и мангустина в качестве способа борьбы с диареей и другими симптомами, связанными с холерой.

Ученому стало любопытно, и в 1923 году он выделил из кожуры этих фруктов дрожжи, которые назвал сахаромицетами Boulardii.

Имя этого ученого Анри Boulard. Теперь понятно, почему эти дрожжи так называются?

Дальнейшее научное изучение этих дрожжей показало, что они являются эффективным пробиотиком для лечения многих заболеваний, но об этом вы узнаете чуть позже.

Сейчас давайте узнаем главную особенность этих дрожжей или грибка.

1) Попадая в желудочно-кишечный тракт человека эти дрожжи, не поселяются там, они проходят через него, оказывают свое лечебное действие и покидают кишечник.

То есть ими нельзя заселить кишечник, они не закрепляются и не размножаются там.

Для получения лечебного эффекта их надо регулярно принимать.

2) Чтобы превратить эти дрожжи в пробиотик, S.boulardii, как правило, подвергают сублимационной сушке, чтобы сделать его химически стабильным.

Этот процесс известен как лиофилизация или «лио» для краткости.

Поэтому эти пробиотики часто называют «сахаромицеты буларди LYO»

Что помогают вылечить сахаромицеты буларди?

Вы не поверите, но этот пробиотик может помочь в лечение разных болезней.

1. Акне.

Что такое акне, знают, наверное, все люди. В молодости эти высыпания на лице часто омрачают жизнь. Бывают они и у взрослых людей.

Может ли грибок помочь очистить лицо от этих ненавистных акне?

По данным немецких исследователей, да, может.

Предварительное исследование показало, что более 80% тех, кто принимал S. boulardii отметили полное или значительное заживление акне в течение 5 месяцев.

2. Диарея

Исследования показали, S. boulardii является эффективным средством для лечения острой диареи у детей и взрослых.

Это краткосрочный понос, который обычно длится не более двух недель.

Анализ 12 исследований показал, что прием только одной 500 мг дозы S. boulardii каждый день значительно снижает риск диареи путешественников.

Одним из самых больших преимуществ этого пробиотика над другими является то, что его не нужно хранить в холодильнике.

Исследователи теперь полагают, что S. boulardii на самом деле, способствует восстановлению от диареи, помогая более быстрому восстановлению кишечных бактерий, необходимых для нормального функционирования кишечника.

3. Синдром раздраженного кишечника (IBS).

Синдром раздраженного кишечника (СРК) является хроническим заболеванием, которое вызывает очень неприятные кишечные симптомы.

Исследования показали, что S. boulardii может уменьшить боль, спазмы, вздутие живота и слишком частые движения кишечника у больных с IBS.

4. Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК).

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК), в основном состоит из болезни Крона и язвенного колита.

Оба из них являются чрезвычайно болезненными состояниями, которые вызывают повреждение желудочно-кишечного тракта.

С. boulardii выступает в качестве противовоспалительного средства в желудочно-кишечном тракте, и было показано, что оно способно предотвратить вспышки при болезни Крона, а также чрезмерно частые движения кишечника и воспаление кишечника при язвенном колите.

5. Clostridium Difficile.

Clostridium несговорчивая (C. Difficile) является бактерией, которая имеется у многих людей в их желудочно-кишечном тракте.

У небольшого процента детей и взрослых, C. дифф. может создать опасные вторичные инфекции, которые особенно часто наблюдаются после приема антибактериальной терапии в больнице.

Так как антибиотики могут создать эту инфекцию, ее крайне сложно лечить.

К счастью, было обнаружено, что S. boulardii уменьшает появление инфекций, вызываемых C. дифф. у госпитализированных взрослых пациентов и детей, проходивших лечение антибиотиками.

6. Хеликобактер пилори.

Helicobacter Pylori (H.) является бактерией, которая вызывает язвы желудка, а иногда и язвы тонкой кишки.

H. Pylori была также связана с раком желудка у восприимчивых людей.

Было показано, что S. boulardii уничтожает эти бактерии.

7. Укрепляет дырявый кишечник.

S. boulardii может сделать больше, чем просто помочь дырявому кишечнику.

Она действительно может исцелить его.

S. boulardii укрепляет и обеспечивает более плотные контакты между клетками.

Укрепление стенок кишечника делает их барьером против инфекций, так как через укрепленные стенки кишечника могут пройти только нужные вещества определенного размера.

8. Поднимает уровни IGA ( иммуноглобулина A).

Эти бактерии лечат кишечник и другим способом.

S. boulardii лечит дырявый кишечник повышением уровня иммуноглобулинов IgA.

IgA является одним из основных антител в кишечном тракте, они защищают нас от инфекции.

К сожалению IgA часто становятся нарушенными или ослабленными.

Было показано, что добавки S. boulardii повышают уровень этого критического вещества.

9. Способствует перевариванию дисахаридов.

Дисахариды являются сахара ( лактоза, сахароза, мальтоза), которые организму становится трудно переварить, когда кишечный тракт не работает правильно.

Это происходит из-за отсутствия дисахаридазы, фермента, необходимого для переработки дисахаридов.

Поэтому людям часто трудно должным образом переварить хорошие углеводы, такие как бобы или овощи.

Добавление S. boulardii в режим питания помогает организму человека вырабатывать больше этого фермента и приводит к улучшению углеводного пищеварения.

10. Уменьшают воспаление.

С. boulardii уменьшают воспаление по всему желудочно-кишечному тракту.

Это помогает клеткам, которые выстилают желудочно-кишечный тракт, восстановить дырявый кишечник и восстановить его ворсинки, чтобы увеличить поглощение питательных веществ.

Когда кишечник является менее воспаленными, аутоиммунные условия также улучшаются.

11. Другие преимущества сахаромицетов буларди.

Преимущества не заканчиваются улучшением кожи и здоровья кишечника.

Так как S. boulardii такое сильное противовоспалительное средство, оно может действовать довольно мощно по всему телу:

— улучшать иммунную функцию,
— снижать пищевую аллергию,
— снижать риск инфекции
— увеличивать поглощение питательных веществ из пищи в организм.

12. Многие преимущества сахаромицетов буларди как пробиотика.

1) S. Boulardii являеся эффективным пробиотиком, так как они создают маннан-олигосахариды (MOS).

Маннан — олигосахариды представляют собой соединения, которые предотвращают присоединение вредных бактерий к клеткам желудочно-кишечного тракта, это инактивирует вредные штаммы бактерий.

S. Boulardii достаточно сильны, чтобы выжить в желудке при действии на них кислоты и ферментов переваривающих белок.

Это дает возможность сахаромицетам буларди путешествовать по кишечнику, оказывать помощь клеткам тонкого и толстого кишечника.

1. Сахаромицеты буларди не поселяются в кишечнике, но они проходят без разрушения весь желудочно-кишечный тракт, оказывают лечебное действие и покидают его.

2. Для создания пробиотика используется метод сублимационной сушки, поэтому он удобен при транспортировке и не требует холодного режима хранения.

3. Является эффективным для лечения акне, диареи, синдроме раздраженного кишечника, воспалительных заболеваниях кишечника, клостридиуме defficile, хеликобактер пилори, укрепляет дырявый кишечник, увеличивает количество иммуноглобулинов А (IgA), снижает пищевые аллергии, увеличивает поглощение питательных веществ из пищи.

Он также является полностью безопасным, чтобы взять его с собой в путешествие вместо пробиотиков на основе бактериальных препаратов.

Приходилось ли Вам слышать про добавку сахаромицеты буларди или использовать их?

Напишите в комментариях, поделитесь своими впечатлениями.
И будьте здоровы!

Галина Лушанова

Галина Лушанова имеет высшее образование (окончила НГУ по специальности цитолог-генетик), к.б.н. по специальности фармакология. Прошла обучение по диетологии, является действительным членом сообщества «Диетологи России». Ведет блог «Пища и Здоровье» с 2011г. Организатор Первой в России онлайн школы «Пища и Здоровье»

Подпишитесь на новости блога

Да где же их взять?

А где можно приобрести сахаромицеты буларди? И сколько они стоят? Заранее благодарна, Наталья.

В России продается препарат «Энтерол». Цена в Интернете от 200 до 600 рублей.

Вот по этой ссылке ://medside.ru/enterol можно посмотреть.

10 капсул или 10 порошков — средняя цена 439 рублей. Это на 3 дня. Дорого.

На Vitacost.com продаются «Сахаромицеты буларди» 90 капсул около 30 долларов. В день надо 3 капсулы, то есть упаковка на 30 дней, то есть 3 капсулы стоят 1 доллар и лечение за день стоит 1 доллар. Если курс доллара к рублю стоит 60 рублей, то стоимость лечения за день 60 рублей.

Считайте, что лучше, «кормить» торговцев лекарств в России (препарат не производят в России) или бизнес в Америке.

Я буду несказанно рада, если Вы найдете производителя «Сахаромицетов буларди LEO» в России.

Я уже ответила на этот вопрос. Спасибо за вопрос.

Здравствуйте Галина,да,интересный пробиотик. Я начал пить бифидум, семена льна, прошли боли в кишечнике.Причина- принимаю иммунодепрессанты(азатиоприн,метротрексат и т.д.) при РА. Судя по спектру действия, буларди сильнее и качественнее работает в ЖКТ.Будем искать:)

Спасибо большое за отличное статью. А как долго его можно употреблять? В Энтероле написано 14 дней. А при лечении акне написано 5 месяцев. И я так понимаю можно уптреблять вместе с глютамином?

Почему вместе с глютамином? Да, в эксперименте исследуемые принимали С.буларди 5 месяцев.Если решите приимать, то через месяц решите, пить их дальше или нет.

РА — это ревматоидный артрит? А на питание без глютена и молочки перешли? Исключение этих продутов из питания снимает боли лучше всяких лекарств. Вы читали статьи
1) про аутоиммунные заболевания 15 статей ссылка на рубрику АБ (все статьи) http://pishhaizdorove.com/category/disease/autoimmunnye-bolezni/
2)про Артрит всего 7 статей http://pishhaizdorove.com/category/disease/autoimmunnye-bolezni/artrity/

Очень полезная для меня информация. Спасибо. Только один вопрос, не сильно ли раслабится поджелудочная от помощи в переработке лактозы и фруктозы ?

Что значит расслабится? С.булларди помогают и укрепляют полезные бактерии.

Спасибо за статью, Галина!
Я правильно понимаю, что моей дочери (да и всей семье) их можно принимать даже сейчас (при наличии в организме триггеров)?

Да,Марина. Сахаромицеты буларди полезны

Здравствуйте, Галина! Вопрос по поводу дозировки «В день надо 3 капсулы» — это для Энтерола?
Я купила на iherb Сахаромицеты Буларди http://ru.iherb.com/pr/Jarrow-Formulas-Saccharomyces-Boulardii-MOS-180-Veggie-Caps/37658
Там написано по 1 капсуле 1-2 раза в день.
Пока принимаем по 1 капсуле утром и вечером.
Кстати, вкус (если открывать капсулу) этих дрожжей похож на дрожжи с рынка, которые продают на развес для выпечки.

Марина! Надо принимать так, как написано. 3 капсулы — это в инструкции энтерола было написано и я в комментариях использоваа для расчета стоимости.

Прочитав статью Галины, практически сразу заказала эти дрожжи.

Самое интересное, что эффект у ребенка аллергика был заметен через 1 неделю приема этих дрожжей: пищевая аллергия снижает свои обороты (раньше даже от яблока появлялся кашель).

Вот только не знаю, сколько времени нам надо их пить, чтобы полностью восстановить жкт. Сначала пропили 2 недели, потом сделали перерыв на 2 недели, сейчас опять пьем.

Марина! Большое Вам спасибо за комментарий! Как я рада, что помогла Вам, что Вы использовали информацию и ребенку стало легче. Это лекарство — не антибиотик. Иностранцы и по 5 месяцев его пили. Наблюдайте, я не знаю врачей, которые бы могли Вам дать рекомендацию по этому вопросу.

Галина сахаромицеты буларди можно принимать для лечения отдельно, или только в комплексе с антибиотиками? Принимать до еды?

Для лечения дыряаого кишечника применять сахаромицеты буларди БЕЗ антибиотиков

Галина,здравствуйте. Спасибо большое за информацию .я уже 3 дня и ночи сижу изучаю ваши статья. Я сегодня купила Энтерол. Как пить утром Сначала Л- тираксин через пол часа Энтерол и через час только завтракать да ?

Асия! Утром принимайте L -тироксин. Через час завтракайте, только не все продукты можно есть на завтрак, Вы помните об этом? Перед обедом или ужином принимайте сахаромицеты буларди.

Галина спасибо большое, я так и буду принимать.

Галина,добрый вечер! Спасибо за полезную информацию! Хотелось попробовать энтерол или американский вариант СБ для сына(у него Болезнь Крона),но в составе есть лактозы моногидрат. А у него очень яркая и быстрая аллергическая реакция даже на каплю — следы молока в продуктах,вплоть до отека Квинке и астматического приступа.Наверное,сыну опасно принимать этот препарат?

Ольга! Я давно в «восторге» от тех форм лекарств, которые продаются у нас. Идите на сайт vitacost.com или iherb.com и ищите нормальные сахаромицеты буларди. Вот одна ссылка на витакост https://www.vitacost.com/allergy-research-group-saccharomyces-boulardii-9-billion-50-vegetarian-capsules Никаких лактоз в составе
Вот ссылка на iherb.com https://ru.iherb.com/pr/Now-Foods-Saccharomyces-Boulardii-Gastrointestinal-Support-60-Veggie-Caps/37505
Наш Российский Интернет не лучшее место для поиска лекарств. Я уже не один раз это писала.

Галина , добрый день, могли бы вы подсказать можно ли добавлять в выпечку СБ вместо обычных сухих дрожжей? И какие вы можете посоветовать? (Реб на бгбк диете, диагноз РАС)
Смотела на айхербе от компании Jaroow Formula, но их нет нигде в наличии.

Айнура! Сахаромицеты буларди можно добавлять вместо сухих дрожжей. Только тесту требуется больше времени, чтобы оно подошло.
В предыдущих комментариях к этой статье есть ссылки, где сахаромицеты буларди продаются. Посмотрите внимательно комментарии.

Ой, забыла добавить… можно ли их пить при молочнице.

Спасибо большое за ответ! На всякий случай копирую первую часть вопроса (может быть, не отправилось):

1)Подскажите, пожалуйста, поможет ли Энтерол при таких симптомах, как изжога, вздутие живота, диагностировали хеликобактер пилори, но антибиотики мне не идут… А терпеть такое состояние ежесекундно очень сложно…

2)И ещё я пью эутирокс по утрам, если я буду брать Энтерол до обеда и до ужина, то это получится 2 капсулы в день, этого будет достаточно? За сколько минут до еды их нужно принимать?? И как долго можно?? Заранее благодарю за ответы)

«Как вылечить хеликобактер пилори»https://pishhaizdorove.com/kak-vylechit-xelikobakter-pilori/

«Хеликобактер пилори и Хашимото»https://pishhaizdorove.com/xelikoabakter-pilori-i-xashimoto/

«Три природных средства от Хеликобактор пилори»https://pishhaizdorove.com/tri-prirodnyx-sredstva-ot-xelikobakter-pilori/

Галина, огромное спасибо за такой подробный ответ! И извините, если что, я всё понимаю и очень вам благодарна, вы делаете бесценную работу. Дело в том, что я из Беларуси, из айхерба посылки к нам идут месяц-полтора… других вариантов заказать нет, увы, так что придётся подождать. Можно ли пока всё-таки пить Энтерол.

Татьяна! Пить можно, но будет ли толк от этого — я не знаю.

Спасибо большое за ответ!)))

Здравствуйте,скажите пожалуйста,можно ли принимать сахаромицеты во время беременности(2 й триместр) ? Есть ли исследования ? И нужно соблюдать строгую диету при этом?

Азиза! Сахаромицеты лучше не надо принимать при беременности, из-за осторожности.
Строгие диеты нельзя принимать (высокоделковую,кетогенную и т.д.), они будут вредны. А вот диета без глютена может быть полезна. Читайте об этом в статье «Что каждая женщина должна знать о глютене» https://pishhaizdorove.com/kazhdaya-zhenshhina-dolzhna-znat-o-glyunete/
И необходимо контролировать свой кишечник, он должен работать как часы. Это нужно не столько Вам, сколько ребенку. И слабительные средства (препараты) не надо использовать. Если есть проблема — проконсультируйтесь сначала с врачом. Потом напишите.

Отличная статья, я даже не знала о существовании такого препарата. Можно ли его принимать совместно с пробиотиками ( пью 2 капсулы утром)? Подходят ли они при аутоимунное протоколе? Мой кишечник никак не заживёт, было бы хорошо если бы они помогли. Вы сами как долго их принимали для устранения проницаемости кишечника?

Юлия! Этот препарат теперь имеет «прописку» в моем доме. Сейчас переодически принимаю.

Осень хорошо, надо быстрее заказать. По поводу пробиотиков? Отменять их на время приёма этого препарата или пить параллельно?

Галина,здравствуйте! Скажите,детям с какого возраста можно пить сахаромицеты?

Анна! Сахаромицеты можно пить детям с 1 года в виде порошка за 1 час до еды. Начинать с 1 раза в день. Детям с 6 лет можно капсулы.

Здравствуйте. дала ребенку не разведенный в жидкости энтерол из капсулы и дала запить водой (разведенный выплевывала), она при этом капризничала, теперь думаю не могла ли она случайно вдохнуть дрожжи, если вдохнула, какие могут быть последствия? После этого не чихала, не кашляля.

Ольга! Я не могу ответить на Ваш вопрос.

Фруктоза не является дисахаридом, это моносахарид.
https ://ru.wikipedia.org/wiki/Фруктоза
https ://ru.wikipedia.org/wiki/Дисахариды

Андрей! Спасибо, что указали на ошибку! Исправила. Спасибо, что читаете блог. Замечания принимаю с благодарностью

Добрый день!
Предложили в аптеке сахаромицеты буларди в препарате Нормобакт Энтеро (дешевле) польского производства! Подскажите пожалуйста провизор мотивировал наличием фруктоолигосахаридов (Нормобакт) и лактулозой (Энтерол) насколько это критично?

Олег!Ответы на Ваши вопросы есть в комментариях к этой статье. Почему энтерол лучше не покупать и есть ссылки где покупать.Читайте

Галина!как пить с антибиотиками(метронидозол)от лямблий?утро после завтрака антибиотик,вечером после ужина тоже антибиотик,сахоромицеты когда лучшн принемать?

Анна!Пробиотики и сахаромицеты буларди принимать тоже 2 раза в день, через час после метронидазола в идеальном случае или после вечернего приема метронидазола.

Галина, добрый день,

Спасибо за статью, очень все подробно. Скажите,пожалуйста, можно ли одновременно принимать сахаромицеты и candida support для лечения кандидоза? Противогрибковые вещества из candida support не сведут на нет действие сахаромицетов?

Таня! Если Вы лечите Кандиду и всерьез, то выбор Вашего лекарства не лучший. Ответы на свои вопросы Вы найдете в статье https://pishhaizdorove.com/kandida-i-chuvstvitelnost-k-produktam-pitaniya/
Если появятся новые вопросы или что-то не поймете, то пишите. С удовольствием отвечу, если смогу.

Спасибо за содержательную статью. Сахаромицеты буларди — чудо!

У мамы была сильная интоксикация. Она кашляла.
В груди все хрипело и сипело.
Черты лица заострились.
Пульс 30-35.
На антибиотики аллергия.
Бисептол помогал временно.
Перестаю давать-явления интоксикации нарастают.

Прочитала Вашу статью. Думаю попробую,ведь иммунитет поднимает.

Срочно в аптеке купила энтерол. И что вы думаете?

К моему величайшему изумлению мама пошла на поправку. Кашель прошел за 5 дней. Пульс уже 58.Цвет лица нормальный.

Т.е. сахаромицеты б. сняли интоксикацию. Огромная Вам благодарность.

Елена! Вот так! У мамы была интоксикация организма от кишечника!
Все наши болезни начинаются в кишечнике! Этому уже не надо удивляться!
Чтобы у человека не заболело — лечите кишечник в ПЕРВУЮ очередь.

Добрый день! Можно ли давать 3месячному ребенку сахаромицеты в уменьшенной дозировке? (например, 1/2 капсулы, разведенная в молоке). Ваш ответ про возраст от года читала. Но у ребенка дисбактериоз, а врач прописывает энтерол, есть в наличии сахаромицеты. И можно ли разводить молоком, а не водой? Спасибо!

Наталья! Я не могу комментировать лечение врача и давать рекомендации для 3 месячного ребенка! Но энтерол — это сахаромицеты буларди. Прочитайте состав «1 капсула содержит:
Действующее вещество: Лиофилизированные Saccharomyces boulardii 250 мг.
Вспомогательные вещества: Лактозы моногидрат, магния стеарат, желатин, титана диоксид.»
Если врач выписала, сказала ли она как принимать капсулы 3 месячному ребенку? Очевидно растворить в воде?
Тогда решайте сами, что лучше растворять в воде — энтерол (сахаромицеты с булдой) или сахаромицеты чистые, без булды.

Спасибо за ответ! Врач прописала по 1/2 капсулы энтерола в день, а вот в чем растворять — не уточнила, вопрос уже дома возник

Наталья! Все понятно!С водичкой тогда лучше.

Добрый день! Сахаримицеты можно еще получить через препарат НОРМОБАКТ ЭНТЕРО, он доступнее энтерола.

Динара! Да, есть такой препарат, получаем его из Польши. Вот состав (пишу для читателей блога)
лиофилизированная дрожжевая культура Saccharomyces boulardii,
фруктоолигосахариды,
гидроксипропилметилцеллюлоза,
Е418 желирующий агент,
Е171 краситель,
Е471 субстанция, предотвращающая слипание (содержит сою).
Ну и зачем мне лично такие наполнители, если в американских капсулах такой отравы нет и они дешевле? И купить их можно на iherb?

Здравствуйте,Галина.Такой вопрос:Дочка 3года и сын 1,9мес очень часто болеют,каждый месяц,вот уже месяц мучаемся с риносинуситом,никак не можем восстановить носовое дыхание,стоит ли попробовать принимать эти сахаромицеты.Планирую заказать на сайте айхерб

Дина! Закажите на айхербе витамин Д3 для дочки, а вот сыну капсулы наверное не подойдут, не проглотит. Купите в каплях.
Сахаромицеты не повредят, но еще можно назальный пробиотик, если не найдете, то купите пробиотик в капсулах. Раскрывайте капсулу, растворяйте в воде и капайте деткам в нос. Себе можете брать сухой пробиотик из капсулы в рот и рассасывать его.

Добрый день! У меня перекрученная форма желчного пузыря. Прием препарата не может привести к увеличению взвеси в желчном? Спасибо!

Юлия! Этого я не знаю и ответить на Ваш вопрос не могу.

Добрый день! У ребенка (4 мес, гв) в посеве мочи высеялась клебсиелла, прошу подскажите, как с ней бороться без антибиотиков? (Даю сахаромицеты, пробиотики). Спасибо заранее!

Наталья! Я не врач!Лечение четырехмесячного ребенка — только у врача. Ему даже травы не все можно давать, поэтому только с врачом решайте этот вопрос. Грудью то кормите?

Да-да, только ею и кормлю. Спасибо за ответ! Я потому и пишу, что назначения врачей — это всегда антибиотики…ищу альтернативные варианты

Наталья! Вы переговорите с детским врачом, не всегда они настаивают на антибиотиках. Спросите прямо, какими природными средствами можно полечить Вашего ребенка при грудном вскармливании.
И еще — откуда взялся этот паразит в моче ребенка? Посев Вашего молока делали?

Здравствуйте, подскажите пожалуйста что принимать при сибр? На его фоне аит, гормоны не хочется. Болят суставы, стул через день, вздутие, головокружение, постоянная усталость. Спасибо.

Валентина! Прежде всего наладить работу кишечника.

Большое спасибо за статью!

А не кажется ли Вам ,Галина, что Вы усиленно рекламируете американский препарат? Заказывать его на каких то сайтах- это тоже небезопасно. Вас не устроил Энтерол только наличием лактозы или что то еще не так?

Ольга!Вы знаете, мне не кажется, что я рекламируь американский препарат. Вы знаете только категорию «реклама» товара или препарата. Я, делая выбор товара или препарата, обращаю внимание на состав, кол-во действующего вещества (для лекарства) в препарате и цену.
Что касается ЭНТЕРОЛА то полный расчет не в его пользу приведен в моем комментарии к этой статье (это 3-ий сверху). Получается дешевле, что очень важно для меня, я пенсионерка.

Галина, а можно ли применять сахаромицеты при онкологии щитавидной железы? ..или это не те дрожжи, которые рекомендовано исключить?)

Юлия! Лучше не надо применять при онкологии сахаромицеты буларди.И любые пищеые грибы тоже.

Галина, все же скажите, при рецедивирующем кандидозе можно сахаромицеты? В вашей статье о кандидозе прочла что проьиотики можно, кроме сахаромицетов? Я думаю, это же ведь тоже дрожжи, не будет ли это провоцировать кандидоз? Спасибо!

Лариса! Рецидифицирующий кандидоз надо лечить не сахаромицетами. Их даже нельзя при разрастании кандиды.О лечении кандиды читайте https://pishhaizdorove.com/kandida-i-chuvstvitelnost-k-produktam-pitaniya/

Здравствуйте, Галина! Дочка (30 лет) принимала энтерол 30 дней, кал стал оформленный, цвет нормальный, вообщем все хорошо. Перестала принимать, кал стал светло-желтый, неоформленный. Что это может быть?

Вера! Значит за 30 дней не успела флора нормализоваться. А пробиотики были с пищей или в добавках?

Здравствуйте, Галина! Подскажите, а после приема аципола, энтерол можно принемать или нужно сделать перерыв?

Елена! По лекарственным препаратам все вопросы решайте с врачами! Я не врач!

Здравствуйте, Галина! Сахарамицеты дочка принимала в капсулах. По одной капсуле 2 раза в день. Скажите, пожалуйста, нужно ли принимать бактерии (пробиотики) одновременно с сахарамацетами.

Вера! Можно принимать вместе, но не в одно и тоже время. Сахаромицеты убивают вредных микробов, но не Кандиду. Если много (есть разрастания кандиды, то есть она беспокоит не только в кишечнике), то сначала надо извести кандиду. Про нее есть статьи на блоге, и как с ней бороться тоже есть статьи

Галина, дочка принимала сахаромицеты из-за дисбактериоза и аутоиммунного гипотериоза, а не из-за кандиды. Дочка (30 лет) принимала энтерол 30 дней, кал стал оформленный, цвет нормальный, вообщем все хорошо. Перестала принимать, кал стал светло-желтый, неоформленный. Что это может быть? Сейчас она опять принимает сахаромицеты из Америки. Боюсь, чтоб по окончании приема опять не наступил откат (ухудшение цвета и консистенции кала).

Вера! Значит за 30 дней
1) она не восстановила свои полезные микробы
2) у нее есть недостаточность аищеварительных или системных ферменов. Пусть попробует попринимать их в обед — самый насыщенный питательными элементами прием пищи. Про ферменты есть несколько статей на блоге

Галина, скажите, пожалуйста, а обоснован ли с вашей точки зрения периодический прием сахаромицетов, например в таком режиме: пьем первые 7-10 дней каждого месяца и так постоянно. Или принимать только при возникновении проблем?

Наталья! Надо знать конкретные проблемы со здоровьем, учитывать, что эти проблемы могут меняться.Но в любом случае Сахаромицеты надо иметь дома.

Энтеролом пользуюсь уже больше 20 лет. Лечу себя и детей. Очень довольна этим препаратом.

Принимаю биологически активную добавку, в состав которой, помимо сахаромицетов буларди входят lactobacillus acidophilus, табебуйя и лактоферрин от молочницы, результат уже радует, хотя пью только неделю, а курс расчитан на 7 недель

Варвара! Рада за Вас, что Вам препарат помогает

Здравствуйте. У меня срк, назначили энтерол. Начала пить, пропила 3 дня, стало только хуже. Понос, молочница сразу, налет на зубах, в общем полный комплект. Бросила. Потом подумала, что может быть все-таки не от препарата, начала пить еще раз. Все тоже самое. Скажите, может перетерпеть и потом будет лучше? Или бросить? Диету соблюдаю…

Валентина! Молочница — это кандида. А при кандиде сахаромицеты (энтерол препарат) не рекомендуются. Вам надо справиться с кандидой. Об этом читайта в статье https://pishhaizdorove.com/kandida-i-chuvstvitelnost-k-produktam-pitaniya/

Здравствуйте,Галина!
Хочу поблагодарить Вас за статью,она оказалась для меня очень полезной.Не могла раньше понять,на кой врач выписал мне капсулы Eubiol c cахаромицеты буларди,теперь всё стало понятно

Добрый день! Прописал гастроэнеролог, но стала рости киста в яичнике 5 см. Надо бросать этот препарат?

Ольга! Это надо к врачу. Я не врач и не знаю этого.

Здравствуйте . Ребенку 4года. Сидим на безглютеновой диете, но замучал постоянные понос. Неделю нормально, а потом опять понос. Попили уже кучу пробиотико. Скажите можно плпринимать сахоромиценты буларди?

Анна! Вы же прочитали статью! У Вас болен ребенок, так спросите врача, особенно если антибиотики пропил ребенок, а толку нет. Я даю информацию, но не лечу, я не врач.

Здравствуйте. Подскажите пожалуйста для ребенка 2 года можно ли вскрывать капсулу и давать содержимое с водой так как ребенок еще не глотает капсулы? О порошке знаю интересует именно такой метод дойдут ли полезные бактерии до кишечника? Спасибо!

Павлина! Бактерии дойдут, но не все. Но прежде чем давать ребенку,проконсультируйтесь с детским врачом, чтобы не повредить его здоровье

Галина Ивановна, подскажите пожалуйста можно ли приментяь вместе с пробиотиками сахарамицыты? Не мешают ли они действию друг друга?

Марина! Можно принимать в один день, но не в одно время, если это необходимо для Вашего организма.

Галина, подскажите, пожалуйста, сахаромицеты помогают бороться с биопленкой? Если нет, то какой препарат Вы можете порекомендовать?
Благодарю!

Галина, добрый день! спасибо большое за статью! у меня АИТ, для поддержания кишечника хотела бы пропить курс сахарамицетов, но я планирую беременность, можно ли в таком случае их применять? или использовать лучше пробиотики из продуктов, типа квашенной капусты. Заранее спасибо за ответ!

Екатерина! Если планируете беременность, то лучше не экспериментировать, ничего лишнего не принимать. Пробиотики из продуктов — хорошо, если Вы сами квасили капусту, огурцы, редиску, морковку и т.д. Чужие бактерии от продавцов с рынка или из магазина Вам не нужны.
Если Вы планируете беременность то проверьте свое здоровье, не считайте себя молодой и здоровой. Могут быть пищевые недостатки и у молодых и здоровых, а они могут привести к болезням у детей. Проверьте у себя обязательно витамин Д3, Витамин В12 в крови, гормон ТТГ и сделайте УЗИ Щитовидной железы. Эти анализы и исследования, если Вы молоды и здоровы, врач вряд ли назначит. И что Вы знаете о болезнях у Ваших родителей (бабушек и дедушек) как Ваших, так и Вашего супруга? Это полезно знать, когда планируете беременность.
Еще советую Вам сделать генетический анализ на гены муковисцедоза и фенилкетонурии.

Спасибо большое за совет! как раз ТТГ у меня выше нормы, пью L-тироксин, вит D тоже в норме, но почти по нижней границе, поэтому по совету врача принимаю аквадетрим. Вит В12 сдавала самостоятельно, показатель в верхней трети, как нужно. на УЗИ изменений никаких нет. Так же принимаю Омегу 3. По болезням родителей толком ничего не знаем, ни я, ни муж. Правильно ли, что на данный момент я решила соблюдать безглютеновую диету, а так же отказываюсь от молочных продуктов и яиц? Видимых аллергий на продукты у меня не было никогда. Но неудачи с беременностью по неясным причинам на протяжении полутора лет, заставляют думать во всех направлениях

Екатрина! Чувствительность глютену может проявляться неудачами с беременностью, выкидашами и реждевременными родами. Рекомендую сдать анализ Иммуннохелс. Витамин Д3 -25ОН должен быть на верхней границе нормы. А вот болезни предков надо знать, узнайте.

Помогут ли сахаромиценты после приема трихопола? Или же стоит попить обычные пробиотики с полезными бактериями?

Ольга! У Вас есть проблемы с кишечником? У Вас есть запоры, поносы, пучит живот после еды? Если есть, то попейте сахаромицеты буларди сначала. А можно и СБ приимать и полезные пробиотики, только в разное время

Мицерол-ратиофарм

Фармакологические свойства

Дрожжевые грибы Saccharomyces угнетают рост патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, таких как Proteus mirabilis и vulgaris, Salmonella typhi и typhimurium, Clostridium difficile, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Shigellae, грибов Candida albicans.

Saccharomyces cerevisiae защищают также от отрицательного воздействия Clostridium difficile, а также холерного вибриона.

Ферментативная активность обусловлена повышением активности ферментов тонкого кишечника (лактазы, сахаразы, мальтазы).

Одним из механизмов, с помощью которого Saccharomyces cerevisiae оказывают иммунозащитное действие в ЖКТ, является стимуляция более эффективной иммунной реакции слизистой оболочки хозяина на антигены.

После перорального применения быстро достигается высокая концентрация Saccharomyces cerevisiae в толстом кишечнике, которая поддерживается на протяжении суток. Saccharomyces cerevisiae не попадают в системный кровоток и в мезентериальные лимфатические узлы. После прекращения лечения Saccharomyces cerevisiae полностью выводятся с калом на протяжении 3–5 дней.

Показания

Взрослым и детям в возрасте старше 2 лет:

• симптоматическое лечение острой диареи, обусловленной нарушением физиологической микрофлоры тонкого и толстого кишечника во время лечения антибиотиками и сульфаниламидами;

• профилактика и симптоматическое лечение диареи во время путешествий;

• профилактика диареи, связанной с кормлением через зонд;

• как вспомогательное средство при лечении продолжительных (хронических) форм угревой сыпи (акне).

Применение

Капсулы принимают перорально, глотая целыми и запивая достаточным количеством жидкости (1 стакан питьевой воды). Для детей младше 6 лет следует открыть капсулу и высыпать ее содержимое в 50 мл воды (¼ стакана) комнатной температуры (20–25 °С).

Взрослым и детям старше 2 лет при лечении острой диареи назначают по 1–2 капсуле в сутки на протяжении 4–7 дней (250–500 мг) .

Для профилактики диареи во время путешествий: за 5 дней перед отъездом — по 1–2 капсулы в сутки (250–500 мг) .

Для профилактики диареи во время лечения антибиотиками и сульфаниламидами: препарат применяют одновременно с антибиотиками и сульфаниламидами по 2 капсулы 2 раза в сутки с первого дня антибиотикотерапии и еще несколько дней после ее завершения.

При диарее, обусловленной кормлением через зонд: ежедневно добавляют содержимое 3 капсул (750 мг ) в 1,5 л питательного р-ра. Продолжительность лечения определяет врач.

При акне: по 1 капсуле 3 раза в сутки (750 мг ). Лечение может длиться до 5 мес.

Противопоказания

Повышенная чувствительность к Saccharomyces cerevisiae HANSEN CBS 5926 и ли другому компоненту препарата; ослабленный иммунитет (ВИЧ-инфекция, трансплантация органов, лейкемия, злокачественные опухоли, облучение, химиотерапия, продолжительное лечение высокими дозами кортизона), а также пациентам с катетером центральной вены.

Побочные эффекты

Могут отмечать метеоризм, тошноту, рвоту, крайне редко — реакции гиперчувствительности: зуд, крапивницу, локальную или генерализованную экзантему, отек кожи и слизистых оболочек, чаще всего в области лица (отек Квинке), приступ удушья, анафилактический шок.

При неблагоприятных реакциях прием препарата прекращают и принимают решение о дальнейшем лечении.

Особые указания

Капсулы Мицерол-ратиофарм не следует применять в положении лежа с горячими напитками или горячей пищей. Если диарея длится более 2 дней с примесью крови или повышением температуры — нужно срочно обратиться к врачу.

При заболеваниях, сопровождающихся диареей, особенно у детей, обращать особое внимание на восполнение жидкости и солей (электролитов) как на важное и первоочередное действие при диареи.

При ухудшении или отсутствии улучшения состояния при лечении акне нужно проконсультироваться с врачом.

Saccharomyces cerevisiae HANSEN CBS 5926 — это живые клетки дрожжевых грибов, которые у пациентов с ослабленной иммунной защитой могут вызывать генерализованные грибковые инфекции путем перенесения с ЖКТ в кровоток или способствовать загрязнению катетеров центральной вены.

Если во время или после терапии препаратом проводится микробиологическое исследование кала, необходимо сообщить о лечении Мицеролом-ратиофарм, поскольку результаты анализа могут будут неверными.

Если прием препарата был пропущен, при следующем приеме дозу не следует удваивать, необходимо придерживаться рекомендуемой.

Не следует применять препарат у детей до 2 лет, в период беременности и кормления грудью, так как опыт клинического применения отсутствует.

При острой печеночной и почечной недостаточности, у пациентов пожилого возраста коррекции дозы не требуется.

Не влияет на способность управлять транспортными средствами и работать со сложными механизмами.

Если симптомы заболевания не исчезают или возникли побочные эффекты, необходимо принять решение относительно дальнейшего лечения.

Взаимодействия

Сочетанное применение препарата с другими противогрибковыми лекарственными средствами может снизить действие Мицерола-ратиофарм.

При одновременном применении ингибиторов МАО (антидепрессантов) возможно повышение АД.

Передозировка

Случайное применение более 1 или 2 капсул, чем рекомендовано, не вызывает отрицательной реакции. При значительной передозировке могут возникнуть метеоризм, тошнота, рвота.

Лечение

Промывание желудка, применение активированного угля и/или симптоматическая терапия.

Saccharomyces cerevisiae CNCM I-3856 при синдроме раздраженного кишечника: индивидуальный метаанализ

Вклад автора: все авторы внесли существенный вклад в разработку и разработку исследования, получение данных, анализ и интерпретацию данных; Cayzeele-Decherf A, Leuillet S и Housez B составили статью, а другие авторы сделали критические изменения, связанные с важным интеллектуальным содержанием рукописи; Все авторы были привлечены для окончательного утверждения версии статьи, которая будет опубликована.

Корреспонденция: Амелия Кейзиль-Дехерф, менеджер клинического исследования, «Лесаффре Хьюз», «Лесаффре Групп», 59700 Марк-ан-Бареул, Франция. ace@lesaffre.fr

Чтобы подтвердить предыдущие выводы о Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) CNCM I-3856 для лечения синдрома раздраженного кишечника (IBS).

Анализ метаданных отдельных пациентов проводился в двух рандомизированных клинических испытаниях, в которых изучалось влияние добавления S.Commvisiae CNCM I-3856 на симптомы желудочно-кишечного тракта (GI) у субъектов IBS. Всего было включено 579 предметов IBS. Исходными данными были ежедневные баллы шкалы живота / дискомфорта и вздутия живота (площадь под кривой (AUC) и еженедельные средства), состояние ответчика и дефекации (частота и частота стула). Статистический анализ проводился в популяции «Намерение для лечения» (ITT), субъектов IBS-C и субъектов IBS-C с показателем боли в животе / дискомфортом выше или равным 2 на базовом уровне («IBS-C ≥ 2 субпопуляция»).

S. cerevisiae CNCM I-3856 значительно улучшила боль в животе / дискомфорт и вздутие живота в течение второго месяца приема [AUC (W5-W8)] с улучшением до минимального клинически значимого порога 10%: уменьшение на 12,3% боли в животе / наблюдается дискомфорт в популяции ITT по сравнению с группой плацебо (P = 0,0134). В субпопуляции IBS-C ≥ 2 наблюдалось уменьшение боли / дискомфорта в животе на 13,1% и снижение набухания на 14,9% по сравнению с группой плацебо (P = 0,0194 и P = 0,0145 соответственно). Симптомы GI значительно снижались во время приема, но статистических различий не сообщалось между группами в конце периода добавок. Статус ответчика определялся как субъект, у которого наблюдалось уменьшение 1 произвольной единицы (a.u.) или 50% показателя дискомфорта брюшной полости от базовой линии в течение не менее 2 недель после последних 4 недель исследования. Значительное различие между группами отмечалось в популяции ITT при рассмотрении первого определения: у субъектов активной группы было 1,510 более высоких шансов быть ответчиком (уменьшение 1 au боли в животе / дискомфорт) по сравнению с субъектами в группе Placebo ( P = 0,0240). В конце периода добавления консистенция стула в активной группе популяции ITT была значительно улучшена и классифицировалась как «нормальная» по сравнению с плацебо (соответственно 3,13 ± 1,177 a.u. против 2,58 ± 1,020 a.u., P = 0,0003). Аналогичные результаты наблюдались в субпопуляции IBS-C ≥ 2 (активная группа: 3,14 ± 1,219 a.u. против группы плацебо: 2,59 ± 1,017 a.u., P = 0,0009).

Этот метаанализ поддерживает предыдущие данные, связывающие S. cerevisiae I-3856 и улучшение симптомов GI, в общей популяции IBS и в подгруппах IBS-C и IBS-C ≥ 2.

Основной совет: поскольку микробиота кишечника считается играющей роль в патофизиологии синдрома раздраженного кишечника, использование пробиотиков вызвало интерес к управлению желудочно-кишечными симптомами синдрома раздраженной толстой кишки (IBS). Однако свойства пробиотиков зависят от деформации. Мы провели индивидуальный метаанализ данных пациентов, чтобы оценить эффективность Saccharomyces cerevisiae CNCM I-3856 для лечения симптомов IBS.

Синдром раздраженного кишечника (IBS) является распространенным функциональным расстройством желудочно-кишечного тракта (GI) с высокой распространенностью, затрагивающим до 20% населения в некоторых географических районах [1]. В IBS наблюдаются различные симптомы GI, главным образом боли в животе, вздутие живота и изменение привычек кишечника. Субъекты также сообщают о некоторых симптомах вне GI и ухудшении качества жизни [2]. Согласно критериям Рима III, диагностика IBS основана на наличии боли в животе и / или дискомфорте, связанной с по меньшей мере двумя из следующих: улучшение с дефекацией, началом, связанным с изменением частоты стула, началом, связанным с изменением форма стула [3]. Диагноз подтверждается отсутствием какого-либо органического расстройства. Некоторые подтипы IBS различаются в зависимости от преобладающей структуры стула: запор-преобладающий IBS (IBS-C), диарея-преобладающий IBS (IBS-D), смешанный IBS (IBS-M) чередующийся запор и диарея и не-подтипы IBS , На сегодняшний день патогенез IBS до сих пор не ясен. Могут быть задействованы различные механизмы, такие как измененная подвижность GI, висцеральная гиперчувствительность, нарушение кишечного барьера, дисфункция оси головного мозга, воспаление кишечника и нарушение кишечной флоры [2,4]. При исследовании IBS кишечная микробиота представляет большой интерес. Во-первых, некоторые случаи IBS начинаются после острого эпизода инфекции GI, которая может изменить разнообразие кишечной микробиоты [5,6]. Во-вторых, считается, что микробиота кишечника участвует в большинстве механизмов IBS [7]. Из-за отсутствия удовлетворительных фармакологических методов лечения, подходящих для долгосрочного применения [8], как пациенты, так и опекуны обращаются к альтернативным методам лечения IBS. При таком подходе пробиотики оказываются интересным и перспективным вариантом. Их добавление может помочь противовесом механизмам, участвующим в IBS [5,9], и облегчить связанные симптомы. Сегодня задача состоит в том, чтобы определить, какие пробиотические штаммы имеют отношение к управлению IBS и условиям их использования (препараты, дозы, продолжительность).

Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) CNCM I-3856, проприетарный дрожжевой штамм от Lesaffre, был изучен для его полезных свойств в смягчении симптомов GI у субъектов IBS. Были проведены и опубликованы два рандомизированных клинических исследования (РКИ) [10,11], в которых участвовало в общей сложности 579 субъектов IBS. Мы решили провести метаанализ отдельных данных пациента (IPD), чтобы подтвердить предыдущие выводы и укрепить выводы по этому конкретному штамму дрожжей.

Методы статистического анализа были предварительно определены в Плане статистического анализа. Мы оценили манускрипты, которые изучали эффект добавления S. cerevisiae CNCM I-3856 на симптомы GI у субъектов IBS. Только два вышеупомянутых клинических испытания были идентифицированы и включены в этот метаанализ.

I-3856 штамм Sacharomyces cerevisiae является запатентованным, хорошо охарактеризованным штаммом Lesaffre, зарегистрированным во Французской национальной коллекции культур микроорганизмов (CNCM). Виды S. cerevisiae характеризуются использованием фенотипических (API® ID32C, Biomerieux SAS) и генотипических ссылочных методов (генетическая амплификация и секвенирование ДНК 26S) [12,13]. Кроме того, штамм I-3856 идентифицирован благодаря методу типизации интермедиатной цепной реакции (ПЦР) [14] и другим генетическим методам (например, полному секвенированию генома).

Все данные были предоставлены спонсором испытаний. В двух испытаниях использовались унифицированные методы сбора.

Saccharomyces cerevisiae

Использование грибов, плесеней, дрожжей, актиномицетов

Их используют для получения:

антибиотиков (пенициллы, цефалоспорины);

каротиноидов (астаксантин, придающий мякоти лососевых рыб красно-оранжевый оттенок, его вырабатывают Rhaffia rhodozima, которых добавляют в корм на рыбозаводах);

белка (Candida, Saccharomyces lipolitica);

сыров типа рокфор и камамбер (пенициллы);

соевого соуса (Aspergillus oryzae).

Из 500 известных видов дрожжей первыми стали использовать Saccharomyces cerevisiae, этот вид используется и наиболее интенсивно.

Дрожжи Saccharomyces cerevisiae – это непатогенные одноклеточные микроорганизмы с диметром клетки примерно 5 мкм, которые во многих отношениях представляют собой эукариотический аналог E.coli. Их генетика, молекулярная биология и метаболизм детально изучены. S. cerevisiae размножаются почкованием и хорошо растут на такой же простой среде, как и E.coli. Их способность к превращению сахара в этанол и углекислый газ издавна использовалась для изготовления алкогольных напитков и хлеба. В настоящее время ежегодно во всем мире расходуется более 1 млн. тонн S. cerevisiae. Дрожжи S. cerevisiae представляют также большой научный интерес. В частности, они являются наиболее удобной моделью для исследования других эукариот, в том числе человека, поскольку многие гены, ответственные за регуляцию клеточного деления S. cerevisiae, сходны с таковыми у человека. Это открытие способствовало идентификации и – характеристике генов человека, отвечающих за развитие новообразований. Широко используемая генетическая система дрожжей (искусственная хромосома) является непременным участником всех исследований по изучению ДНК человека. В 1996 г. была определена полная нуклеотидная последовательность всего набора хромосом S. cerevisiae, что еще более повысило ценность этого микроорганизма для научных исследований. Такая работа на эукариотах была выполнена впервые.

Синтезированный бактериальной клеткой эукариотический белок часто приходится повергать ферментативной модификации, присоединяя к белковой молекуле низкомолекулярные соединения во многих случаях это необходимо для правильного функционирования белка. К сожалению, E.coli и другие прокариоты не способны осуществлять эти модификации, поэтому для получения полноценных эукариотических белков используют S. cerevisiae, а также другие виды дрожжей: Kluyveromyces lactis, Saccharomyces diastaticus, Schizisaccharomyces pombe, Yarrowia lipolytica, Hansenula polymorpha. Наиболее эффективными продуцентами полноценных рекомбинантных белков являются P. pastoris и H. polymorpha.

Дрожжи Kluyveromyces fragilis сбраживают лактозу. Их используют для получения спирта из сыворотки молока.

Saccharomycopsis lipolytica деградирует углеводороды и употребляется для получения белковой массы. Все три вида принадлежат к классу аскомицетов.

Другие полезные виды относятся к классу дейтеромицетов (несовершенных грибов), так как они размножаются не половым путем, а почкованием. Candida utilis растет в сульфитных сточных водах (отходы бумажной промышленности). Trichosporon cutaneum, окисляющий многочисленные органические соединения, включая некоторые токсичные (например, фенол), играет важную роль в системах аэробной переработки стоков.

Промышленные дрожжи обычно не размножаются половым путем, не образуют спор и полиплоидны. Последним объясняется их сила и способность адаптироваться к изменениям среды культивирования (в норме ядро клетки S.cerevisiae содержит 17 или 34 хромосомы, т.е. клетки либо гаплоидны, либо диплоидны).

Плесени вызывают многочисленные превращения в твердых средах. Пищевые продукты на основе сброженных плесневыми грибами Rhizopus oligosporus соевых бобов или пшеницы содержат в 5-7 раз больше рибофлавина и никотиновой кислоты, чем исходный субстрат. Плесени также продуцируют ферменты, используемые в промышленности (амилазы, пектиназы и т.д.), органические кислоты и антибиотики. Их применяют и в производстве сыров, например, камамбера и рокфора.

Искусственное выращивание макромицетов или грибов способно внести важный вклад в обеспечения продовольствием населения земного шара.

Наиболее легко поддаются искусственному выращиванию древоразрушающие грибы.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Saccharomyces cerevisiae: Доминантный вид дрожжей помогает в производстве вина

Ученые открыли, почему один из видов дрожжей стал доминирующим при получении вина, пива и хлеба и как эволюция создала совершенного природного винодела.

В природе существует необыкновенное разнообразие форм дрожжей — ученые насчитали как минимум 1500 различных видов грибковых микроорганизмов. Но когда дело касается вина, здесь в основном преобладает один природный вид. Аналогичная картина наблюдается и в пивоварении, и выпечке хлеба. В этих трех областях предпочтение давным-давно отдается дрожжам Saccharomyces cerevisiae. Каким же образом этому виду удалось завоевать такую популярность?

Биологи из университета Lund в Швеции, специализирующиеся на исследованиях одноклеточных организмов, провели исследования генетического состава различных видов дрожжей и обнаружили, что вид Saccharomyces cerevisiae около 100-200 млн лет назад подвергся серии изменений ДНК. Эта эволюция и помогла превзойти подобные им микроорганизмы и занять лидирующие позиции.

Когда Saccharomyces cerevisiae, которые присутствуют как на кожуре винограда, так и на винодельнях, а также специально добавляются виноделами, входят в контакт с виноградным мустом, они мгновенно начинают потреблять из него сахар, в основном глюкозу и фруктозу. В результате их жизнедеятельности образуется алкоголь, двуокись углерода, тепло и другие соединения, благодаря которым и получается вино. При этом данный вид дрожжей не разрушает антиокислители и другие органические соединения, которые ассоциируются с полезными для здоровья свойствами вина. Правда Saccharomyces cerevisiae — это не единственные дрожжи, которые работают подобным образом. Есть еще, например, вид Dekkera bruxellensis, который отделился от Saccharomyces cerevisiae около 200 млн лет назад. Между ними поначалу не было соперничества до тех пор, пока порядка 150 млн лет назад не началась эра потребления человеческими существами фруктов и овощей. Вот тогда они стали соперниками. С тех пор каждую осень, когда созревают плоды, начинается жестокая конкуренция за сахар между колониями микроорганизмов.

Ученые полагают, что порядка 150 млн лет назад у бактерий вида Saccharomyces Cerevisiae в результате эволюции произошли значительные видоизменения строения ДНК. Эти изменения сделали этот вид более эффективным при выработке им алкоголя в вине (этанола). С ростом концентрации алкоголя в бродящей фруктовой массе другие разновидности дрожжей погибают, оставляя весь оставшийся сахар виду Saccharomyces Cerevisiae. Saccharomyces производят этанол, аккумулируют его, и убивают высокой концентрацией своих соперников-микробов. А после, оставшись в одиночестве, используют его как продукт для реакции с имеющимся кислородом. Эти же дрожжи в дальнейшем развили в себе способность к брожению как в присутствии кислорода, так и без него. Все это привело к тому, что этот вид дрожжей стал предпочтительным среди пивоваров и виноделов. Другие разновидности дрожжей не в состоянии с ними конкурировать в части способности противостоять высокому уровню алкоголя и повышенным температурам, возникающим в процессе брожения за счет выделяемого тепла.

Исследователи надеются, что их работы помогут вывести генетически модифицированные виды Saccharomyces cerevisiae, которые смогут производить вина с пониженным уровнем алкоголя, что является актуальным в наше время, когда в результате изменения климата и фермерских технологий получаются ягоды с высоким уровнем зрелости.

В общем-то, виноделы и винолюбы должны быть благодарны виду Saccharomyces cerevisiae, ведь в результате эволюции он превратился в отличного винодела. Причем этот путь эволюции был выбран не для того, чтобы производить этанол на радость человеку, а как средство выиграть борьбу за выживание среди себе подобных. Благородное человечество — это только побочный продукт в бесконечной борьбе живых существ в природе за свое право жить и занимать доминирующие позиции.

Справочная информация:

Как было сказано выше, разновидность S. Cerevisiae может выживать при тех концентрациях алкоголя, при которых другие виды дрожжей погибают. Но и она может существовать до тех пор, пока уровень этанола не достигнет примерно 15°. Если он выше, то и эта разновидность дрожжей умирает, и процесс брожения останавливается естественным образом. Это интересный феномен. В любом живом организме, включая и человека, доминируют два основных инстинкта: выживания и размножения. Инстикт выживания предполагает, что любое живое существо не будет создавать внешние условия, которые ведут к его гибели. Человек порой нарушает эти правила и ухудшает естественные условия жизни. Но тут все понятно. Человек просто «не знает, что творит». Но дрожжи — простейшие организмы, у них все подчинено законам природы, которые, как клятва Гиппократа, говорят: «Не навреди». Тем не менее, винные дрожжи сами создают условия, которые при достаточном количестве природного сахара, приводят к производству высокого уровня алкоголя и, в конечном счете, к гибели тех же самых дрожжей.

Сахаромицеты Буларди

Сахаромицеты Буларди (лат. Saccharomyces Boulardii) – штамм дрожжевых грибков из класса сахаромицетов, которые представляют собой одноклеточные микроскопические организмы. Впервые их выделил в 1923 году французский ученый Генри Буларди из тропических фруктов: личи и мангустина. Мысль провести такое исследование появилась, когда ученый заметил, что уроженцы Индокитая жуют кожу этих плодов для ослабления диспепсических проявлений во время холеры.

Сейчас сахаромицеты Буларди применяются для восстановления естественной микрофлоры кишечника, лечения грибковых инфекций, болезней пищеварительной системы, а также для борьбы с болезнетворными бактериями. Поэтому грибок пользуется популярностью среди покупателей: его поставляются более чем в 90 стран мира, где он имеет около 20 названий. Так, в Латвии и России он известен как Энтерол (Enterol).

Сахаромицеты Буларди: пробиотик

В основном сахаромицеты Буларди применяются в качестве пробиотиков. При систематическом употреблении они благоприятно воздействуют на организм. А именно нормализуют микрофлору кишечника, которая нарушается чаще всего в результате приема антибиотиков или неправильного питания на протяжении длительного времени.

Как пробиотик, сахаромицеты абсолютно безопасны. При пероральном приеме они попадают непосредственно в кишечник и не распространяются за пределы кишечной трубки. Поэтому лимфоузлы и внутренние органы не испытывают воздействия микроорганизмов, а слизистые оболочки в пищеварительной системе остаются без изменений.

Важно! Главное отличие сахаромицетов Буларди от других пробиотических микрокультур (например, лакто- и бифидобактерий) заключается в том, что они устойчивы к кислотности желудочного сока. Обычно микроорганизмы распадаются в кислотной среде, но это не касается сахаромицетов. Также дрожжевые грибки резистентны по отношении к ферментам, переваривающим белок.

Сахаромицеты Буларди: состав

Основу добавок и препаратов составляют сахаромицеты Буларди. В каждой капсуле содержится до 10 млдр жизнестойких микроорганизмов на 1 единицу объема. Но, помимо этого, в состав могут входить и другие вещества:

  • целлюлозная капсула;
  • лактозы моногидрат;
  • магния стеарат;
  • желатин;
  • фруктоолигосахарид;
  • витамины.

Состав каждого БАДа уникален, поэтому людям с аллергией на лактозу можно найти чистую добавку без вспомогательных компонентов.

Важно! Прежде, чем попасть в препараты и добавки, сахаромицеты Буларди проходят процесс лиофилизации. Они подвергаются мягкой сушке, при которой высушиваемое вещество замораживается и помещается в вакуумную камеру. Такой способ высушивания имеет много преимуществ: структурная целостность и биологическая активность грибков сохраняется.

Сахаромицеты Буларди: свойства

По своим свойствам сахаромицеты Буларди не имеют аналогов. Даже другие виды грибов из этого класса используются преимущественно в пищевой промышленности, биохимических технологиях и производстве кормовых добавок, но не в лечебных целях. Многие из них патогенны для человека. Сахаромицеты Буларди уникальны в своем роде и по метаболическим признакам родственны только с пивными дрожжами.

Что же происходит при приеме пробиотических дрожжей:

  1. сахаромицеты Буларди активизируют в кишечнике секрецию иммуноглобулина А;
  2. повышают активность мальтазы, лактазы, сахаразы и других ферментов, расщепляющих сахар в органах пищеварения;
  3. устраняют патогенные микроорганизмы (например, дизентерийная амеба, стафилококк, синегнойная палочка, кандида и другие);
  4. синтезируют протеолитические ферменты, разрушающие токсические отходы бактерий;
  5. оказывают антидиарейное действие;
  6. уменьшают боль, спазмы и вздутие живота;
  7. устраняют воспаление по всему желудочно-кишечному тракту;
  8. укрепляют стенки кишечника и защищают его от внешних инфекций;
  9. способствуют поглощению питательных веществ из пищи в организм;
  10. улучшают состояние кожи;
  11. поддерживают иммунитет.

Это далеко не весь список полезных свойств. Также сахаромицеты восстанавливают нарушенный обмен жидкостью, препятствуют патологическому разрастанию эпителия, подавляют процессы клеточной гибели и многое другое. Сейчас продукт проходит дополнительные этапы исследований, которые определяют его новые полезные качества.

Главное! Это одни из немногих микрокультур, чья эффективность и безопасность не только доказана, но и документально закреплена здравоохранительными организациями (например, Всемирная гастроэнтерологическая организация и Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США).

Сахаромицеты Буларди: применение

Показаний к применению сахаромицетов Буларди достаточно много. Специалисты считают целесообразным принимать их как для лечения болезней различной природы, так и для их профилактики. Главное, что положительная динамика становится заметна уже через несколько приемов добавки.

С какими же проблемами сахаромицеты помогут справиться:

  1. нарушения в пищеварительной системе (дисбактериоз, болезнь Крона, язвенный колит и другие воспалительные процессы);
  2. диарея;
  3. пищевые отравления;
  4. синдром раздраженного кишечника;
  5. болезнь «дырявого кишечника»;
  6. грибковые инфекции (например, кандидоз);
  7. признаки заражения Хеликобактер пилори;
  8. низкий уровень фермента дисахаридазы;
  9. иммунодефицит.

Сахаромицеты Буларди помогают не только при обычной диарее. Они нормализуют работу желудка при детской инфекционной диарее, антибиотико-ассоциированной, паразитарной и других формах диареи. Особое внимание на эти грибки должны обратить туристы, часто сталкивающиеся с «диареей путешественников» из-за смены климатических зон. Это эффективное средство, которое можно взять с собой в дорогу.

Важно! Исследования показали, что при регулярном приеме сахаромицетов можно вылечить акне и другие проявления кожного воспаления. Так, более 80% испытуемых отметили, что сыпь исчезла полностью, или значительно ослабились ее признаки в течение полугода.

Сахаромицеты Буларди: пищеварение и ЖКТ

Для пищеварения и ЖКТ сахаромицеты Буларди имеют первоочередное значение. Как наттокиназа и шатавари, они устраняют дисбактериоз, но внимания заслуживают и другие свойства:

  1. препятствуют росту эпителиальной ткани кишечника, который может стать причиной появления полипов, а в наихудшем случае – рака толстой кишки;
  2. стимулируют пищеварительные процессы;
  3. способствуют перевариванию дисахаридов;
  4. связывают микробные токсины в кишечнике;
  5. стимулируют активность пищеварительных ферментов;
  6. играют роль кишечного антисептика;
  7. уменьшает кишечную секрецию воды.

Стоит отметить, что зачастую болезни пищеварительной системы характеризуются острым воспалительным процессом. К таким относится болезнь Крона и язвенный колит. Применение сахаромицетов Буларди больными людьми показало, что продукт препятствует проникновению болезнетворных бактерий из желудочно-кишечного тракта через слизистый барьер в крово- или лимфоток. Также состояние пациентов значительно улучшилось, а количество рецидивов снизилось в разы.

Сахаромицеты Буларди: Хелибактор Пилори

Хелибактор Пилори (Helicobacter Pylori) – одна из тех инфекций, которую сахаромицеты Буларди способны уничтожить. Эта грамотрицательная бактерия инфицирует большинство областей желудка и двенадцатиперстной кишки, поэтому является причиной различных заболеваний: язв, гастритов, дуоденитов, рака и лимфом желудка.

Было доказано, что дрожжевые грибки меняют морфологию бактерии, благодаря чему снижается ее способность проникать в слизистую оболочку желудка. Также у пациентов с инфекциями, вызванными Helicobacter pylori, уменьшилась частота диареи.

Стоит отметить, что терапия Хелибактор Пилори предполагает прием 2-х антибиотиков, которые негативно воздействуют на микрофлору пациента и вызывают дисбалансы. Такие побочные эффекты требуют дополнительного лечения про- и пребиотиками. При применении сахаромицетов Буларди изменения в пищеварительной системе не наблюдаются.

Сахаромицеты Буларди: стафилококк

Сахаромицеты Буларди подавляют рост стафилококков, грибов семейства Staphylococcaceae, с одновременным увеличением числа бифидо- и лактобактерий. Это было доказано в 2002 году гастроэнтерологом Савво В.М., который помимо этого провел системное наблюдение за детьми с дисбактериозом кишечника. Каждый из пациентов принимал назначенную дозу препарата с содержанием сахаромицетов Буларди. Изменения в организме были следующие: нормализовался стул, исчез метеоризм и уменьшился болевой синдром.

Избавиться от стафилококка можно с помощью и других БАДов: листа оливы, эхинацеи пурпурной и масла лимона.

Важно! Заражение стафилококками нередко провоцирует появление токсикоинфекции. Сахаромицеты Буларди подавляют активность бактериальных токсинов, и, следовательно, ослабляют диарейный синдром, вызванный этими токсинами. Антитоксическое действие грибков связано с их способностью вырабатывать белковые соединения.

Сахаромицеты Буларди: молочница

Так как сахаромицеты Буларди являются отличным средством для борьбы с грибковыми инфекциями, молочница, или кандидозный вульвовагинит, не является исключением. Само по себе заболевание не смертельно, но доставляет больной женщине массу неудобств: боль во время мочеиспускания и полового акта, покраснения органов малого таза, их покраснение и отечность.

Сахаромицеты подавляют патогенную микрофлору, и симптомы кандидоза исчезают в течение 10-14. Для закрепления эффекта желательно повторить лечение после двухнедельного перерыва. Главное, не сокращать прием сахаромицетов Буларди, даже если улучшение здоровья наблюдается значительно раньше. Эти грибки живут в организме недолго, а на 3-5 день выводятся полностью, поэтому нужно пройти полный курс лечения.

Иногда молочница принимает хроническую форму и беспокоит несколько раз за год. В таком случае эти процессы нужно контролировать постоянно. Достаточно пить по 2 таблетки в день в течение 2-х недель. Такой курс повторять дважды в год. Это позволить держать в норме процессы размножения дрожжеподобных грибков.

Сахаромицеты Буларди: кандида

Как уже было сказано, сахаромицеты Буларди нормализуют баланс в организме дрожжевых грибков Кандида. Чрезмерное размножение этих микроорганизмов может вызвать серьезные последствия. Кроме обычной молочницы, может появиться кандидозная инфекция глаза, пищевода и даже кандидемия – избыток грибков Кандида в крови человека, приводящий к смерти.

Грибки снимают воспаление, вызванное кандидой, и уменьшают их концентрацию в кишечнике. Именно благодаря этим свойствам сахаромицеты Буларди получили название «дрожжи против дрожжей».

Еще одними эффективными средствами против грибков кандида являются каприловая кислота, ацидофилин и шалфей.

Сахаромицеты Буларди: детям

Для детей сахаромицеты Буларди не менее полезны. Это одно из самых безопасных средств для лечения острой диареи в детском возрасте. Препарат восстанавливает жизнедеятельность кишечных бактерий, необходимых для нормальной работы органов пищеварения. Как следствие, ослабляет тяжесть и уменьшается длительность острой инфекционной диареи на 1-2 сутки. Желательно применять перорально.

В целом, для лечения поноса предназначены антибиотики, но в большинстве случаев они запрещены в педиатрии. Сахаромицеты Буларди, наоборот, относятся к разрешенным средствам.

Сахаромицеты Буларди: препарат Jarrow Formulas

Наиболее удобно принимать сахаромицеты Буларди в виде капсул. Они легко глотаются и хорошо всасываются слизистой оболочкой желудка.

  1. Именно в капсульной форме фирма Jarrow Formulas предлагает пробиотическое дополнение «Saccharomyces Boulardii + MOS» (5 млрд, 90 капсул).

Помимо самих грибков сахаромицетов Буларди, в препарате содержится Mannan-oligosaccharide (MOS) – это растительный олигосахарид, получаемый из пекарских дрожжей (Saccharomyces cerevisiae). Данное соединение играет роль пребиотика, препятствует прилипанию сахаромицетов к эпителию желудка и не дает ему патологически разрастаться. Кроме того, MOS стимулирует работу печени.

Вегетарианская добавка защищает кишечник и поддерживает его микрофлору. Органы пищеварительной системы особенно уязвимы во время путешествия или при длительной лекарственной терапии. При употреблении препарата Jarrow Formulas поддержка желудочно-кишечного тракта осуществляется постоянно.

Преимущество данной добавки в том, что ее можно хранить при комнатной температуре. Также в ней не содержится глютен (клейкий белок), способный спровоцировать нарушение пищеварения в тонком кишечнике. При этом, в составе присутствует диоксид кремния и витамин C.

Рекомендации по применению: пить по 1 капсуле 1-2 раза в день. Запить водой. Принимать натощак или вместе с пищей. Другая дозировка может быть назначена лечащим врачом. Обязательна консультация для людей с пониженным иммунитетом и в детском возрасте.

Сахаромицеты Буларди: Now Foods

Компания Now Foods уже 50 лет производит качественные биологически активные добавки и за эти годы стала ведущей на рынке БАДов и фармацевтических товаров.

  1. Одной из новейших разработок является вегетарианская добавка сахаромицеты Буларди «Saccharomyces Boulardii, Gastrointestinal Support». В каждой упаковке по 60 капсул, в которых содержится более 5 млрд активных микроорганизмов.

Пищевая добавка оказывает поддержку желудочно-кишечному тракту, в частности, нормализует микрофлору кишечника. Благодаря этому продукту органы пищеварения нормально справляются со стрессовыми ситуациями в организме и окружающей среде. Капсульная форма делает добавку удобной для приема и позволяет ее брать с собой в путешествие.

Рекомендации по применению: пить по 1-2 капсулы 2-3 раза в день между приемами пищи. Обязательно проконсультироваться с врачом беременным и кормящим женщинам, при приеме лекарств или наличии медицинских диагнозов.

Сахаромицеты Буларди: в аптеке

Многие люди предпочитают покупать сахаромицеты Буларди в аптеках, особенно это касается жителей крупных городов, таких как Москва и СПб. Но далеко не всегда в аптеке можно найти качественную добавку по доступной цене. Обычно сахаромицеты Буларди стоят дорого, и никто не даст гарантию, что это фирменный продукт.

Кроме подделок, часто встречаются добавки отечественного производства. Качество у них достаточно хорошее, но оборудование не позволяет хранить их в надлежащих условиях. Поэтому лучший вариант – заказать необходимый товар в интернет-аптеках. Ссылка на самый крупный магазин БАДов дана ниже.

Сахаромицеты Буларди: инструкция

Инструкция к сахаромицетам Буларди стандартная:

  • добавку нужно запивать только негорячей водой (от алкогольных напитков и соков нужно отказаться);
  • строго соблюдать указанную дозировку;
  • выбрать другой способ лечения при наличии противопоказаний;
  • при ухудшении самочувствия прекратить прием добавки и обратиться к врачу.

Увеличить картинку

Совместимость с другими лекарствами:

  • сахаромицеты Буларди устойчивы к любым антибиотикам, поэтому возможно их одновременное применение;
  • противогрибковые препараты полиенового ряда (Нистатин) полностью подавляют действие грибка;
  • противогрибковые препараты группы триазолов (Флуконазол) никак не влияют на эффективность сахаромицетов.

Стоит отметить, что последние две группы лекарственных средств используются для лечения и профилактики кандидоза.

Сахаромицеты Буларди: как принимать

Взрослым и детям от 3-х лет рекомендовано принимать по 2 капсулы сахаромицетов Буларди 2-3 раза в сутки. Дозировка может быть увеличена в зависимости от индивидуальных потребностей пациента. Длительность терапии составляет 7-10 дней. Желательно принимать добавку за 1 час до еды и обязательно запивать водой (минимум 200 мл).

Детям, не достигшим 3-х летнего возраста, предпочтительна порошковая форма. При отсутствии такой возможности достаточно 1 капсулы в день, разделенной на 2 приема. В таком возрасте дети еще не могут глотать капсулы, поэтому ее нужно раскрыть и высыпать содержимое в чайную ложку. После проглатывания дать ребенку воды. Курс лечения не должен превышать 5 дней.

Сахаромицеты Буларди: противопоказания

Сахаромицеты Буларди противопоказаны:

  • индивидуальная непереносимость;
  • тяжелая лекарственная терапия;
  • беременность и лактация (без консультации врача).

Как видно, сахаромицеты Буларди – одна из самых безопасных добавок наравне с другими пробиотиками и пребиотиками, например, псиллиум, семена льна и манноза.

Сахаромицеты Буларди: отзывы

Авторы отзывов о сахаромицетах Буларди единогласно признают эту добавку лучшим способом защитить пищеварительную систему от любых негативных явлений. Она действительно нормализует микрофлору желудка, ослабляет симптомы диареи и убивает практически все существующие патогенные бактерии. Это хорошее средство для очищения своего организма и профилактики многих опасных заболеваний.

Сахаромицеты Буларди: цена

Как уже было сказано, цены на сахаромицеты Буларди в аптеках не всегда соответствуют реальному качеству. Лучше заказать в iHerb – всемирно известном американском магазине с безупречной репутацией. Ссылка на сайт для заказа предоставлена ниже и даже хорошо сэкономить, используя промокод iherb на различные скидки. Товар приходит не сразу, его нужно будет подождать от одной до нескольких недель, но зато его качество и эффективность гарантирована производителями. Магазин сотрудничает только с проверенными компаниями, поэтому пользуется популярностью среди тысяч покупателей. Здесь можно найти не только БАДы (такие как ZMA, мукуна жгучая, момордика, чаванпраш, коэнзим Q10), но и витамины, а также косметические средства. Нам доверяют многие!

Сахаромицеты Буларди: купить

Вот такой большой ассортимент форм, дозировок и производителей сахаромицеты Буларди:

1. Купить сахаромицеты Буларди по низкой цене и с гарантированным высоким качеством можно в известном американском интернет-магазине органики iHerb, так полюбившемуся жителям России и СНГ (покупка в рублях, гривнах и т.д., отзывы на русском языке к каждой добавке).
2. Подробная пошаговая инструкция по оформлению заказа (очень простая): Как сделать заказ на iHerb!
3. При первом заказе, дается код iHerb и вам доступна !скидка 10% для новых и акции до 30% для действующих покупателей! Рекомендуем обязательно воспользоваться, т.к. при втором заказе также можно рассчитывать на скидки или вернуть часть средств через русскоязычные кэшбэк-сервисы, которые попробуют вернуть проценты с покупки на и без того невысокие цены!
4. Подробные статьи о тонкостях доставки и оплаты: iHerb оплата и iHerb доставка!

Источник фото: iHerb.com

Как вам помогают сахаромицеты Буларди? Ваш отзыв или совет очень важен новичкам и людям, страдающим аналогичными недугами!

Scisne ?

Главная ≫ Инфотека ≫ Биология ≫ Пекарские дрожжи (Saccharomyces cerevisiae) / Жертвы науки

Пекарские дрожжи (Saccharomyces cerevisiae) / Жертвы науки

Пекарские дрожжи (Saccharomyces cerevisiae)

Несколько веков назад путешественники, вернувшиеся из-за моря, непременно рассказывали истории о людях с пёсьими головами, морских драконах и других фантастических созданиях. Однако ни вдохновенным рассказчикам, ни потрясённым слушателям и в голову не приходило, что они ежедневно имеют дело с существами гораздо более удивительными. Этих удивительных созданий издавна использовали для приготовления хлеба, пива и вина. Речь идёт о дрожжах — крошечном одноклеточном грибке размером 6 на 12 мкм (1 мкм — одна миллионная часть метра).

Дрожжи удивительны своей двойственностью — этакий двуликий Янус микромира. Это эукариоты — в дрожжевой клетке присутствует ядро, но в культуре они ведут себя, как микробы. У дрожжей есть половой процесс, и они образуют споры, но могут неограниченно долго размножаться почкованием. Дрожжи существуют в гаплоидной и диплоидной фазах, то есть имеют одинарный или двойной набор хромосом; смена фаз заменяет им чередование поколений. Как и все эукариоты, дрожжи дышат, то есть расщепляют сахара на воду и углекислый газ с выделением энергии. Но, оказавшись без кислорода, они перестают дышать и переходят на брожение — это единственные анаэробы среди эукариот. К тому же дрожжи — полезнейший микроорганизм, сопутствующий людям с незапамятных времён. Такое счастливое сочетание обстоятельств привело к тому, что дрожжи начали изучать довольно рано и сделали с их помощью несколько фундаментальных открытий.

Для роста дрожжам необходим сахар, лучше всего — глюкоза. За это они в своё время получили название Saccharomyces — «сахарные грибы». Людей прежде всего заинтересовало свойство дрожжей сбраживать полученные из зерна экстракты сахаров. По данным археологов, этот процесс наладили более 6 тысяч лет назад. Сброженные сахара расщепляются на спирт и углекислый газ. При выпекании дрожжевого теста спирт улетучивается, а пузырьки газа остаются, придавая тесту пышность и характерную для него пористую структуру. При изготовлении пива, вина и сакэ главное требование — это получение спирта, а не двуокиси углерода; впрочем, и в пиве совершенно необходима пена, а в шампанском — пузырьки.

Тысячи лет люди использовали в хозяйстве дрожжи, ничего о них не зная. Первыми распознал в них живых существ величайший микроскопист всех времён и народов Антони ван Левенгук. Рисунки дрожжевых клеток с описаниями он направил в 1680 году в Лондонское Королевское общество, где они и пролежали 150 лет. Только в 1837 году французский учёный Каньяр де ля Тур снова заглянул в пиво, движимый не жаждой, а любознательностью, и, увидав там почкующиеся дрожжи, понял, что они живые и необходимы для приготовления пива. Эту идею в штыки встретили ведущие химики того времени, такие, как Берцелиус и Либих, которые считали брожение чисто химической реакцией, а дрожжи — безжизненным разлагающимся веществом. Доказать микробиологическую природу спиртового брожения смог только Луи Пастер спустя 40 лет. Он же обнаружил, что при свободном доступе кислорода воздуха спиртовое брожение прекращается и дрожжи начинают дышать. Это явление получило название «эффекта Пастера».

Сейчас любой студент знает, что для исследований нужны чистые культуры, а в те времена их не было даже у Пастера. Метод получения чистых культур дрожжей — из одной клетки — разработал в 80-е годы XIX века датский ботаник Эмиль Кристиан Хансен. Он показал, что отдельные штаммы сильно различаются по физиологическим свойствам. До сих пор датское пиво готовят на дрожжах, которые при брожении оседают на дно ферментёра, а пивовары Великобритании, некоторых стран Европы и Северной Америки пользуются штаммами, которые всплывают на поверхность.

Дрожжи растут очень быстро и так же быстро синтезируют белок, поэтому и возникла мысль использовать их в качестве кормов для животных и источника пищи для человека. Такая возможность появилась во второй половине XIX века, когда построили специализированные заводы по производству пекарских дрожжей. В Германии во время Первой мировой войны дрожжи заменили 60% продовольствия, ввозимого в страну в мирное время; в основном их добавляли в супы и колбасы. Так возникла биотехнология, а впоследствии и селекция дрожжей.

Современная биохимия тоже взошла на дрожжах. В 1891 году немецкий учёный Э. Фишер обнаружил, что водная вытяжка из сухих дрожжей расщепляет мальтозу до глюкозы — биохимический процесс идёт вне клетки! Как выяснилось позднее, он открыл ферменты. Второе их название, «энзим», по-гречески означает «в дрожжах».

Двадцатый век начался с рождения новой науки — генетики, которая утверждала, что все гены эукариот находятся в ядре, а цитоплазма не содержит никакой генетической информации. Но вскоре выяснилось, что в цитоплазме есть хлоропласты и митохондрии — клеточные органеллы со своим геномом и аппаратом белкового синтеза. Дрожжи и здесь пригодились — без них было бы очень сложно исследовать цитоплазматическую (неядерную) наследственность и генетическую самостоятельность митохондрий. Большинство мутаций в митохондриальных генах нарушает клеточное дыхание и губит организм, а дрожжи — единственные эукариоты, которые могут не дышать и жить с испорченной митохондрией. Благодаря дрожжам генетика митохондрий процветает (первые работы в этой области провёл в конце 40-х годов ХХ века Б. Эфрусси).

В науке тем временем продолжались потрясения. В 70-е годы ХХ века началась эпоха клонирования генов. Их научились выделять, переносить из одного организма в другой, принялись исследовать их действие. Для исследования эукариотических генов дрожжи — высший организм, обладающий всеми преимуществами микроба, — просто подарок судьбы. Они быстро растут, удваиваясь всего за несколько часов, их рост и развитие легко контролировать. Пересаживая клетки на разные среды, сахаромицеты можно заставить образовывать споры, активно почковаться или заблокировать у них процесс дыхания.

На дрожжах изучают весьма сложные явления, характерные только для эукариот, например структуру хромосом, митотическое и мейотическое деления клеток, сплайсинг РНК, регуляцию работы генов. Учёные много узнали об экспрессии генов, идентифицировали специфические участки инициации репликации хромосомной ДНК, последовательности центромер и функционально активных теломер. Работая с дрожжами, биологи получили важные данные о генетических свойствах повторяющихся последовательностей, таких, как гены рибосомной РНК и мобильные элементы. Дрожжи используют для синтеза важных белков, например белка вируса гепатита B — основы для вакцины.

Вклад дрожжей в развитие биологических наук огромен. Не обойдены они даже при исследованиях генома человека — учёные сконструировали искусственные дрожжевые хромосомы, которые позволяют клонировать в дрожжевой клетке громадные участки ДНК. Не то что описать, но и перечислить последние достижения дрожжевой генетики, молекулярной биологии, селекции промышленных штаммов здесь невозможно — каждый год на эту тему издаются горы специальной литературы. Трудно представить, что наука вдруг научится обходиться без дрожжей. Неизвестно, где погибло больше этих маленьких прекрасных клеток — в квашне, бродильном чане пивовара или в научных лабораториях, но с точки зрения человечества, их смерть не напрасна. Благодаря дрожжам люди постоянно получают что-нибудь вкусное или полезное и узнают много нового. А учёные, посвятившие себя биологии дрожжей, вознаграждены за свои труды дивным ароматом свежего хлеба и пива, которым напоены их термостаты.

Мицерол-ратиофарм

Фармакологические свойства

Дрожжевые грибы Saccharomyces угнетают рост патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, таких как Proteus mirabilis и vulgaris, Salmonella typhi и typhimurium, Clostridium difficile, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Shigellae, грибов Candida albicans.

Saccharomyces cerevisiae защищают также от отрицательного воздействия Clostridium difficile, а также холерного вибриона.

Ферментативная активность обусловлена повышением активности ферментов тонкого кишечника (лактазы, сахаразы, мальтазы).

Одним из механизмов, с помощью которого Saccharomyces cerevisiae оказывают иммунозащитное действие в ЖКТ, является стимуляция более эффективной иммунной реакции слизистой оболочки хозяина на антигены.

После перорального применения быстро достигается высокая концентрация Saccharomyces cerevisiae в толстом кишечнике, которая поддерживается на протяжении суток. Saccharomyces cerevisiae не попадают в системный кровоток и в мезентериальные лимфатические узлы. После прекращения лечения Saccharomyces cerevisiae полностью выводятся с калом на протяжении 3–5 дней.

Показания

Взрослым и детям в возрасте старше 2 лет:

• симптоматическое лечение острой диареи, обусловленной нарушением физиологической микрофлоры тонкого и толстого кишечника во время лечения антибиотиками и сульфаниламидами;

• профилактика и симптоматическое лечение диареи во время путешествий;

• профилактика диареи, связанной с кормлением через зонд;

• как вспомогательное средство при лечении продолжительных (хронических) форм угревой сыпи (акне).

Применение

Капсулы принимают перорально, глотая целыми и запивая достаточным количеством жидкости (1 стакан питьевой воды). Для детей младше 6 лет следует открыть капсулу и высыпать ее содержимое в 50 мл воды (¼ стакана) комнатной температуры (20–25 °С).

Взрослым и детям старше 2 лет при лечении острой диареи назначают по 1–2 капсуле в сутки на протяжении 4–7 дней (250–500 мг) .

Для профилактики диареи во время путешествий: за 5 дней перед отъездом — по 1–2 капсулы в сутки (250–500 мг) .

Для профилактики диареи во время лечения антибиотиками и сульфаниламидами: препарат применяют одновременно с антибиотиками и сульфаниламидами по 2 капсулы 2 раза в сутки с первого дня антибиотикотерапии и еще несколько дней после ее завершения.

При диарее, обусловленной кормлением через зонд: ежедневно добавляют содержимое 3 капсул (750 мг ) в 1,5 л питательного р-ра. Продолжительность лечения определяет врач.

При акне: по 1 капсуле 3 раза в сутки (750 мг ). Лечение может длиться до 5 мес.

Противопоказания

Повышенная чувствительность к Saccharomyces cerevisiae HANSEN CBS 5926 и ли другому компоненту препарата; ослабленный иммунитет (ВИЧ-инфекция, трансплантация органов, лейкемия, злокачественные опухоли, облучение, химиотерапия, продолжительное лечение высокими дозами кортизона), а также пациентам с катетером центральной вены.

Побочные эффекты

Могут отмечать метеоризм, тошноту, рвоту, крайне редко — реакции гиперчувствительности: зуд, крапивницу, локальную или генерализованную экзантему, отек кожи и слизистых оболочек, чаще всего в области лица (отек Квинке), приступ удушья, анафилактический шок.

При неблагоприятных реакциях прием препарата прекращают и принимают решение о дальнейшем лечении.

Особые указания

Капсулы Мицерол-ратиофарм не следует применять в положении лежа с горячими напитками или горячей пищей. Если диарея длится более 2 дней с примесью крови или повышением температуры — нужно срочно обратиться к врачу.

При заболеваниях, сопровождающихся диареей, особенно у детей, обращать особое внимание на восполнение жидкости и солей (электролитов) как на важное и первоочередное действие при диареи.

При ухудшении или отсутствии улучшения состояния при лечении акне нужно проконсультироваться с врачом.

Saccharomyces cerevisiae HANSEN CBS 5926 — это живые клетки дрожжевых грибов, которые у пациентов с ослабленной иммунной защитой могут вызывать генерализованные грибковые инфекции путем перенесения с ЖКТ в кровоток или способствовать загрязнению катетеров центральной вены.

Если во время или после терапии препаратом проводится микробиологическое исследование кала, необходимо сообщить о лечении Мицеролом-ратиофарм, поскольку результаты анализа могут будут неверными.

Если прием препарата был пропущен, при следующем приеме дозу не следует удваивать, необходимо придерживаться рекомендуемой.

Не следует применять препарат у детей до 2 лет, в период беременности и кормления грудью, так как опыт клинического применения отсутствует.

При острой печеночной и почечной недостаточности, у пациентов пожилого возраста коррекции дозы не требуется.

Не влияет на способность управлять транспортными средствами и работать со сложными механизмами.

Если симптомы заболевания не исчезают или возникли побочные эффекты, необходимо принять решение относительно дальнейшего лечения.

Взаимодействия

Сочетанное применение препарата с другими противогрибковыми лекарственными средствами может снизить действие Мицерола-ратиофарм.

При одновременном применении ингибиторов МАО (антидепрессантов) возможно повышение АД.

Передозировка

Случайное применение более 1 или 2 капсул, чем рекомендовано, не вызывает отрицательной реакции. При значительной передозировке могут возникнуть метеоризм, тошнота, рвота.

Лечение

Промывание желудка, применение активированного угля и/или симптоматическая терапия.

Saccharomyces cerevisiae (пекарские дрожжи), IgA антитела, качественный, кровь

Антитела к Saccharomyces cerevisiae (пекарским дрожжам) — серологический маркер, который позволяет дифференцировать болезнь Крона и неспецифический язвенный колит (НЯК), определив фенотип заболевания. Нарушение иммунитета при болезни Крона приводит к выработке антител к антигенам пищи — дрожжевых грибов.

Роль иммуноглобулинов к Saccharomyces cerevisiae в патогенезе этих воспалительных заболеваний кишечника не выяснена.

Иммуноглобулины класса G к Saccharomyces cerevisiae определяются в 20% случаев НЯК и 80% — болезни Крона. Антитела IgA обнаруживают у 1% больных НЯК и 35% страдающих болезнью Крона.

Болезнь Крона и НЯК относятся к воспалительным заболеваниям кишечника (ВЗК) и имеют схожую симптоматику и этиологию. При ВЗК поражается слизистая кишечника с формированием участков поврежденных тканей — язв, гранулем. Во время обострений появляется водянистая и/или кровянистая диарея, боль в животе, наблюдается потеря веса. Периоды активного заболевания чередуются с периодами ремиссии, когда симптоматика может практически отсутствовать.

Причина возникновения ВЗК доподлинно неизвестна. Предполагается, что заболевание представляет собой аутоимунный процесс, обусловленный генетической предрасположенностью, вирусной инфекцией и/или воздействием факторов окружающей среды.

ВЗК могут развиться в любом возрасте, но чаще всего возраст больных колеблется от до 35 лет, в небольшом проценте случаев заболевание диагностируется в 50-70 лет. У детей, страдающих ВЗК, наблюдается задержка развития и роста. Возникновение ВЗК у молодых людей значительно увеличивает риск рака кишечника.

Симптоматика болезни Крона и НЯК очень схожа. Точная диагностика заболевания крайне важна для успешного лечения — подходы к терапии разных видов НВЗК отличаются. Колоноскопия позволяет установить диагноз примерно в 70% случаев ВЗК. Тем не менее, в 10% случав четкую дифференциацию между болезнью Крона и НЯК провести не представляется возможным.

Данный анализ позволяет определить наличие антител IgA к Saccharomyces cerevisiae. Анализ помогает дифференцировать болезнь Крона и неспецифический язвенный колит.

Метод

Иммуно-ферментный анализ — ИФА.

Референсные значения — норма
(Saccharomyces cerevisiae (пекарские дрожжи), IgA антитела, качественный, кровь)

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

Влияние янтарной кислоты на рост и биотехнологические показатели дрожжей Saccharomyces cerevisiae Текст научной статьи по специальности « Пищевая промышленность»

Аннотация научной статьи по пищевой промышленности, автор научной работы — Старовойтова О. В., Борисова С. В.

Исследовано влияние янтарной кислоты на рост и биотехнологические показатели промышленно-значимых штаммов хлебопекарных дрожжей S. сerevisiae. Внесение опытных дрожжей в тестовые полуфабрикаты способствует улучшению органолептических , физикохимических и технологических показателей готовых хлебобулочных изделий.The influence of succinic acid on growth and biotechnological properties of important industrial strain of bakers yeast S. сerevisiae is investigated. The application of the testable yeast in the dough forwards to improve organoleptical, physical, chemical and technological parameters of a finished bakery product.

Похожие темы научных работ по пищевой промышленности , автор научной работы — Старовойтова О. В., Борисова С. В.,

Текст научной работы на тему «Влияние янтарной кислоты на рост и биотехнологические показатели дрожжей Saccharomyces cerevisiae»

О. В. Старовойтова, С. В. Борисова ВЛИЯНИЕ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ НА РОСТ И БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ДРОЖЖЕЙ SACCHAROMYCES CEREVISIAE

Ключевые слова: хлебопекарные дрожжи, биотехнологические показатели, органолептические, физикохимические и технологические показатели.

Исследовано влияние янтарной кислоты на рост и биотехнологические показатели промышленно-значимых штаммов хлебопекарных дрожжей S. свгвуг^чав. Внесение опытных дрожжей в тестовые полуфабрикаты способствует улучшению органолептических, физикохимических и технологических показателей готовых хлебобулочных изделий.

Keywords: baker’s yeast, biotechnologicalproperties, organoleptical, physical, chemical and technological parameters.

The influence of succinic acid on growth and biotechnological properties of important industrial strain of baker’s yeast S. сerevisiae is investigated. The application of the testable yeast in the dough forwards to improve organoleptical, physical, chemical and technological parameters of a finished bakery product.

Одним из эффективных способов интенсификации процесса выращивания микроорганизмов и повышения их физиологической активности является использование стимуляторов различной химической природы. В научно-технической литературе имеются данные о применении янтарной кислоты (ЯК) в пищевых процессах и сельском хозяйстве в качестве добавки, рассматриваемой с точки зрения стабилизации и улучшения качества конечного продукта [1-4]. Из литературных источников известны данные о положительном действии янтарной кислоты и ее солей на активность внеклеточных ферментов дрожжей при сбраживании виноградного сока [1], положительное влияние на активацию алкогольного брожения в производстве ликёроводочной продукции [4]. Кроме того, описана абсолютная безвредность янтарной кислоты, ее способность оказывать даже в малых дозах положительный эффект в качестве противоишемического препарата, а также положительное влияние на артериальное давление и показатели работы сердца [5,6]. Однако, в литературе недостаточно сведений о влиянии янтарной кислоты на физиолого-биохимические свойства хлебопекарных дрожжей Saccharomyces сerevisiae.

В связи с этим представляло интерес исследовать влияние янтарной кислоты на рост и биотехнологические свойства промышленно-значимых штаммов хлебопекарных дрожжей.

В качестве объекта исследования были выбраны следующие промышленно используемые штаммы дрожжей: Saccharomyces cerevisiae ВКМ-У-823, ЛК-14, ЛВ-7.

Процесс культивирования осуществлялся в лабораторных и промышленных условиях на регламентной питательной среде при внесении янтарной кислоты в концентрационном интервале 0,00001-0,1 г/л, характерном для ряда известных стимуляторов [7-10], оказывающих положительный эффект на процесс выращивания хлебопекарных дрожжей.

Качество дрожжей оценивали по следующими показателям: зимазная и мальтазная активности, подъемная сила, осмочувствительность. Активность гликолитических ферментов зимазного и мальтазного комплексов дрожжей оценивали по скорости выделения СО2 , используя прибор Елецкого; подъемную силу дрожжей определяли по методу всплывания шарика теста; осмочувствительность дрожжей — по методу, приведенному в руководстве [11,12] и выражали разницей во времени между значениями подъемной силой дрожжей в тесте без соли и в тесте с повышенной концентрацией соли до 3,35%. Анализ качества готового хлеба проводили по методикам принятым в хлебопечении.

На рис. 1 представлены данные о влиянии различных концентраций янтарной кислоты на количество дрожжевых клеток.

Применение энтерола в клинической практике

Е.И. Ткаченко, Е.В. Сказываева, Е.Б. Авалуева, С.И. Ситкин

Спбгма им. И.И. Мечникова, Санкт-петербург

Актуальным направлением современной медицины является использование средств коррекции кишечной микробиоты (пробиотиков, пребиотиков, синбиотиков) в лечении многих заболеваний и патологических состояний человеческого организма. Группы используемых препаратов про- и пребиотического ряда разнообразны. Трудности в выборе оптимального про- и/или пребиотического средства имеют место и связаны с тем, что назначение данных средств терапии отчасти стихийно, в большинстве случаев выбор препарата для улучшения кишечной микробиоты носит случайный характер, часто не учитывается индивидуальный видовой состав представителей кишечного биотопа и показания к применению того или иного препарата. Это приводит к неэффективности проводимой терапии, возникновению «плацебо-эффекта» и последующему клиническому ухудшению через некоторое время после окончания курса лечения. У многих используемых препаратов группы средств коррекции микробиоценоза отсутствуют данные об эффективности при той или иной патологии. Поэтому целесообразнее использовать наиболее изученные средства с доказанной в клинических исследованиях эффективностью. Одним из таких препаратов пробиотического ряда является «Энтерол».

«Энтерол» представляет собой препарат биологического происхождения, в состав которого входят лиофилизированные Saccharomyces boulardii. «Энтерол» это пробиотик, определяемый, как «живой микроорганизм, который, когда прописывается в достаточном количестве, приносит пользу принимающему его организму» (Продовольственная и сельскохозяйственная организация — Всемирная организация здравоохранения, 2002). Лиофилизированные Saccharomyces boulardii — это тропические дрожжи, которые были открыты в Индокитае в 1923 году французским ученым Анри Буларом (Henri Boulard). Он занялся выделением дрожжей с кожуры различных тропических фруктов (личи, мангустины), после того как заметил, что местные народности использовали кожуру этих фруктов, как средство против диареи.

С 1984 года около 250 млрд. людей (представляющих более 10 млрд. прописанных доз) прошли лечение лиофилизированными Saccharomyces boulardii («Энтеролом»). Этот опыт, а также многочисленные исследования, проведенные по данному медицинскому препарату, дают основание предполагать, что лиофилизированные Saccharomyces boulardii хорошо переносимы. Лиофилизированные Saccharomyces boulardii — это живые дрожжи, специфический штамм сахаромицетов, представляющие собой клетки округлой или овальной формы, размером до 10 мм. Лиофилизированные Saccharomyces boulardii -это штамм дрожжей с естественной устойчивостью к антибиотикам, сульфаниламидам и другим противомикробным агентам, чувствительных к противогрибковым препаратам и высоким температурам (> 50°С), и не подавляющих рост облигатной микрофлоры. Двести пятьдесят миллиграммов высушенных сублимацией лиофилизированных клеток Saccharomyces boulardii, которые восстанавливаются в желудочно-кишечном тракте, содержат не менее 2,5 млрд. клеток в момент производства. Введенные мышам лиофилизированные Saccharomyces boulardii устойчивы к пищеварительным секретам (кислотность желудочного содержимого, пищеварительные ферменты) и переносятся по желудочно-кишечному тракту с высоким уровнем концентрации. У человека после орального приема лиофилизированные Saccharomyces boulardii быстро достигают стабильного состояния, их постоянная концентрация устанавливается на 3 день применения. Они не задерживаются в кишечнике и выводятся вместе со стулом в течение 2-5 дней.

Антимикробное действие лиофилизированных Saccharomyces boulardii было продемонстрировано в отношении множества патогенных и условнопатогенных микроорганизмов: Clostridium difficile, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida kruesei, Candida albicans, Candida pseudotropicalis (in vitro также в отношении Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Shigella dysenteria, Yersinia enterocolitica), а также Enthamoeba hystolitica, Lambliae.

Антимикробное действие сахаромицетов осуществляется за счет нескольких механизмов:
— высвобождения протеазы, которая оказывает двойное действие: снижает количество токсинов А и В Clostridium difficile и блокирует рецепторы на реснитчатом эпителии кишечника, к которым присоединяются эти токсины [7];
— наличия высокой концентрации маннозы на клеточной мембране сахаромицетов, что способствует крепкому прилипанию патогенных бактерий к дрожжевой клетке и удалению их через кишечник. Этот механизм предотвращает адгезию патогенных бактерий (сальмонеллы и др.) к слизистой оболочке кишечника [8];
— секреции специфического протеина, снижающего выделение энтероцитами циклического аденозинмонофосфата и хлоридов [5];
— снижения проницаемости слизистой оболочки кишечника [6];
— выделения полиаминов, которые стимулируют процессы созревания и смены энтероцитов тонкого кишечника [3];
— оказания тропного воздействия на слизистую оболочку кишечника, ведущего к стимуляции активности дисахаридаз: лактазы, сахаразы и мальтазы [2];
— оказания положительного влияния на состояние местного иммунитета кишечника путем стимуляции фагоцитоза, усиления действия комплементной системы, увеличения выработки секреторного IgA;
— подавления секреции противовоспалительного цитокина IL — 8 [15].

У пациентов, получающих только парентеральное питание, лечение лиофилизированными Saccharomyces boulardii приводит к увеличению фекальной концентрации короткоцепочечных жирных кислот до уровней, которые наблюдаются у здоровых людей.

С учетом на вышеперечисленных механизмов действия лиофилизированные Saccharomyces boulardii используются для профилактики и лечения различных видов диареи, с разной этиологией и симптомами. Эффективность сахаромицетов была установлена в двойных слепых, плацебо-контролируемых исследованиях при различных клинических показаниях: профилактика антибиотик-ассоциированной диареи; диарея, вызванная Clostridium difficile; диарея путешественников; острая инфекционная диарея; обострение хронической инфекционной диареи; диарея, связанная с ВИЧ; диарея, связанная с энтеральным питанием [11, 12, 13, 16].

Применение «Энтерола» при других заболеваниях (воспалительные заболевания кишечника, синдром раздраженного кишечника, инфекция Helicobacter pylori) сейчас проходит стадию клинических исследований.

Так Guslandi et al. провели пилотное исследование оценки эффективности лиофилизированных Saccharomyces boulardii в лечении пациентов с неспецифическим язвенным колитом. Группа из 25 пациентов в фазе обострения язвенного колита от легкой до среднетяжелой степени получала дополнительное лечение в виде 250 мг Saccharomyces boulardii три раза в день в течение 4 недель в процессе поддерживающей терапии месалазином (3 г в сутки). Перед началом лечения и после его окончания был рассчитан индекс клинической активности, предложенный в 1989 г. Rachmilewitz. Из 24 пациентов, полностью прошедших исследование, у 17 была достигнута клиническая ремиссия, что было подтверждено данными эндоскопического исследования. Отмечалось значительное уменьшение клинического индекса в конце терапии [10].

Guslandi et al. в рандомизированном исследовании показали, что применение лиофилизированных

Saccharomyces boulardii у пациентов с болезнью Крона в стадии клинической ремиссии, является эффективным для предотвращения рецидива [9].

Plein et al. в своем пилотном, рандомизированном, двойном слепом, плацебо-контролируемом исследовании оценивали эффект лиофилизированных Saccharomyces boulardii у 20 пациентов, страдающих болезнью Крона. В группе, получавшей энтерол, было отмечено значимое уменьшение частоты стула. Не наблюдалось нежелательных явлений, связанных с приемом препарата [14].

На базе кафедры пропедевтики внутренних болезней с курсами гастроэнтерологии и эндоскопии СПбГМА им. И.И. Мечникова было проведено исследование, целью которого явилась оценка эффективности и безопасности препарата пробиотического действия «Энтерол», на основе Saccharomyces boulardii, назначаемого по 1 капсуле 250 мг 2 раза в сутки в течение 10 дней в схемах терапии пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника, получающих стандартную терапию препаратами 5-аминосалициловой кислоты и глюкокортикоидами. В исследовании приняло участие 50 пациентов, мужчин и женщин в возрасте от 18 лет, с подтвержденным диагнозом язвенного колита или болезни Крона. Индекс клинической активности заболевания при оценке по шкале Мэйо (DAI) у пациентов с язвенным колитом составил ≤10, Клинический Индекс Активности Болезни Крона (CDAI) ≤ 220.

Было выявлено, что использование препарата «Энтерол», в состав которого входят лиофилизированные Saccharomyces boulardii, возможно у пациентов воспалительными заболеваниями кишечника на фоне стандартной терапии. Использование препарата в схемах терапии эффективно и безопасно.

При использовании этого препарата в схемах терапии воспалительных заболеваний кишечника у пациентов быстрее уменьшаются явления кишечной диспепсии, нормализуется стул, уменьшается болевой синдром, снижается клиническая активность заболевания, улучшается качество жизни. Эффективное снижение активности воспалительного процесса после приема препарата «Энтерол» было достигнуто у большинства получавших его пациентов.

Лиофилизированные Saccharomyces boulardii обладают высокой степенью адгезии к эпителию толстого кишечника у пациентов с язвенным колитом и болезнью Крона. Отмечено выраженное положительное влияние «Энтерола» на состав кишечного микробиоценоза уже через 10 дней после начала использования. Кроме положительного влияния на облигатную составляющую микробиоты, отмечен выраженный эффект препарата на условно-патогенные бактерии и грибы рода Candida.

Полученные данные и выявленный позитивный эффект лечения с включением препарата «Энтерол» позволяют предположить, что включение пробиотического средства на основе Saccharomyces boulardii в схемы лечения воспалительных заболеваний кишечника поможет быстрее достичь ремиссии заболевания. Изучение эффективности данного препарата в индукции и поддержании ремиссии при язвенном колите и болезни Крона требует дальнейшего исследования на более обширной популяции пациентов и более глубокого сравнительного анализа.

Таким образом, препарат пробиотического действия «Энтерол» имеет широкий спектр клинической активности, а дальнейшее проведение исследований этого пробиотика, вероятно, откроет еще более широкие перспективы его применения.

Saccharomyces cerevisiae

Saccharomyces cerevisiae is the principal yeast utilized in biotechnology worldwide, due largely to its unique physiology and associated key roles in many food fermentations and other industrial processes (Phaff et al.

Related terms:

Download as PDF

About this page

Learn more about Saccharomyces cerevisiae

Microbial Resources for Global Sustainability

Jim Philp, Ronald Atlas, in Microbial Resources , 2020

Saccharomyces cerevisiae has many advantages as an industrial microorganism. In-depth knowledge of its genetics, genetic engineering, physiology, and biochemistry has been accumulated, and industrial-scale fermentation technologies are readily available (for a review, see Nevoigt, 2008 ). “Traditional” brewing techniques utilize Saccharomyces cerevisiae strains because they have high ethanol yield, high productivity, and their tolerance to high ethanol concentrations keeps distillation costs low ( Kasavi et al., 2012 ). As a eukaryote, it has the sub-cellular machinery for performing posttranslational protein modification. And of course, it plays a central role in modern industrial biotechnology in bioethanol production as a biofuel, both first and second generation.

Nanodiagnostics in microbiology and dentistry

19.6.1 Yeast

Saccharomyces cerevisiae , also known as budding yeast, is not only of use in industrial processes from bread making to beer brewing, but it is also a type organism used in the study of eukaryotic cells. The yeast S. cerevisiae is surrounded by a cell wall composed of proteins, polysacchar > ranging up to 300 nm thick. When imaged with AFM, the surface of the cell appears very smooth and is easily deformed, necessitating careful scanning at minimal force ( Fig. 19.9 ). The only apparent surface feature is the bud scar at the opposite end of the mother cell to the newly forming daughter cell. The surface appears smooth as the sugars obscure the membrane.

Figure 19.9 . Imaging of S. cerevisiae. Yeast cells were located using DIG microscopy (A) and then imaged in contact mode in fluid with the AFM (B). In (C), a 3D image generated from the height channel is displayed, highlighting the bud scar on the mother cell (white arrow) [20] .

Guide to Yeast Genetics: Functional Genomics, Proteomics, and Other Systems Analysis

Bernd Bodenmiller, Ruedi Aebersold, in Methods in Enzymology , 2010

2.1.1 Medium and growth conditions

Saccharomyces cerevisiae strains are streaked out on appropriate plates and three replicates (from three single colonies), both of the wild-type and the gene deletion strain, are grown in a 1-ml preculture over night at 30 °C in SD medium (per liter: 1.7 g yeast nitrogen base without amino acids (Chemie Brunschwig, Basel, Switzerland), 5 g ammonium sulfate, 2% glucose (w/v), 0.03 g isoleucine, 0.15 g valine, 0.04 g adenine, 0.02 g arginine, 0.02 g histidine, 0.1 g leucine, 0.03 g lysine, 0.02 g methionine, 0.05 g phenylalanine, 0.2 g threonine, 0.04 g tryptophan, and 0.03 g tyrosine). The preculture is then used to inoculate 50 ml of SD medium in a 500-ml shaking flask to an OD600 of 0.05.

Mycoviruses

Reed B. Wickner, . Rosa Esteban, in Advances in Virus Research , 2013

Abstract

Saccharomyces cerevisiae has been a key experimental organism for the study of infectious diseases, including dsRNA viruses, ssRNA viruses, and prions. Studies of the mechanisms of virus and prion replication, virus structure, and structure of the amyloid filaments that are the basis of yeast prions have been at the forefront of such studies in these classes of infectious entities. Yeast has been particularly useful in defining the interactions of the infectious elements with cellular components: chromosomally encoded proteins necessary for blocking the propagation of the viruses and prions, and proteins involved in the expression of viral components. Here, we emphasize the L-A dsRNA virus and its killer-toxin-encoding satellites, the 20S and 23S ssRNA naked viruses, and the several infectious proteins (prions) of yeast.

Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part B

Yvonne Y. Koh, Marvin Wickens, in Methods in Enzymology , 2014

3 Materials

Saccharomyces cerevisiae strain YBZ-1: MATa, ura3-52, leu2-3, -112, his3-200, trp1-1, ade2, LYS2::(LexAop)-HIS3, URA3::(lexAop)-lacZ, and LexA-MS2 MS2 coat (N55K)

Hybrid RNA plasmid (e.g., pIIIA/MS2-2 or p3HR2)

Activation domain fusion plasmid (e.g., pACTII or pGADT7)

Synthetic dextrose (SD) dropout media

Sodium phosphate dibasic (Na2HPO4)

Sodium phosphate monobasic (NaH2PO4)

Potassium chloride (KCl)

Magnesium sulfate (MgSO4)

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β- d -galactopyranoside (X-Gal)

Beta-Glo® reagent (Promega)

Cofactors

Hans-Peter Hohmann, Klaus-Peter Stahmann, in Comprehensive Natural Products II , 2010

7.04.4.2.2 Fungi

Saccharomyces cerevisiae played an important role in the genetic analysis of riboflavin biosynthesis. Mating analysis between riboflavin auxotrophic mutants obtained by random mutagenesis and screening of haploid strains revealed the existence of six complementation groups. 24 The six RIB genes from S. cerevisiae, RIB1 to RIB5 and RIB7, were then cloned by functional complementation of the respective auxotrophic mutants. 25 The RIB genes of A. gossypii, which were crucial for genetic engineering of A. gossypii riboflavin production strains, could not be identified based on the S. cerevisiae RIB sequence information. But functional expression of A. gossypii cDNA and genomic DNA libraries in the S. cerevisiae riboflavin auxotrophs finally allowed isolation and cloning of the A. gossypii RIB genes. 26 The C. famata RIB genes were identified by functional complementation of C. famata RIB mutants. The genes were found to be functional in Pichia guilliermondii auxotrophs as well. 27

Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part B

Yvonne Y. Koh, Marvin Wickens, in Methods in Enzymology , 2014

3 Materials

Saccharomyces cerevisiae strain YBZ-1: MATa, ura3-52, leu2-3, -112, his3-200, trp1-1, ade2, LYS2::(LexAop)-HIS3, URA3::(lexAop)-lacZ, and LexA-MS2 MS2 coat (N55K)

Hybrid RNA library (e.g., p3HR2 or pIIIA/MS2-2)

Activation domain–protein fusion plasmid (e.g., pACTII or pGADT7)

Synthetic dextrose (SD) dropout media (liquid and plates)

Sodium phosphate dibasic (Na2HPO4)

Sodium phosphate monobasic (NaH2PO4)

Potassium chloride (KCl)

Magnesium sulfate (MgSO4)

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β- d -galactopyranoside (X-Gal)

Wizard Plus SV Miniprep kit (Promega)

Human Papillomavirus Vaccine

21.4 Yeast-Based Vaccines

Saccharomyces cerevisiae ( S. cerevisiae) is a versatile microorganism that can be exploited as a cell factory for biotechnological and pharmaceutical uses. For example, Kwag and coauthors obtained HPV-58 L1 VLPs cultivated in S. cerevisiae and found that elicited antibodies and antigen-specific cellular responses ( Kwag, Kim, Chang, & Kim, 2012 ). Other used microorganisms include methylotrophic yeasts such as Komagataella (Pichia) pastoris ( Bazan et al., 2009; Bolhassani et al., 2014; Coimbra et al., 2011; Hanumantha Rao et al., 2011; Jiang, Tong, Cai, Xu, & Lou, 2011 ) and Hansenula polymorpha ( Liu, Giddam, et al., 2015; Liu, Hussein, et al., 2015; Liu, Yao, et al., 2015 ). Yeasts enable the production of edible HPV vaccines; for example, Sasagawa and coauthors obtained a Schizosaccharomyces pombe-based L1 vaccine that could be orally delivered ( Sasagawa et al., 2005 ).

Anti-Saccharomyces cerevisiae Antibodies Autoimmune Diseases

Saccharomyces cerevisiae is the most common species of the genus Saccharomyces, commonly known as baker’s or brewer’s yeast. As such, we are commonly exposed to it in our society. In recent years, anti-S. cerevisiae antibodies (ASCAs), directed against the phosphopeptidomannan part of the cell wall of the yeast, 1 have been identified as an important and specific serological marker for Crohn’s disease (CD). 2 At present, ASCAs, combined with perinuclear antineutrophil cytoplasmic autoantibodies (pANCAs), serve as a valuable tool for the differentiation between CD and ulcerative colitis (UC) in patients with inflammatory bowel diseases (IBDs). The pathogenic significance of ASCAs is unknown, and their exact origin, as well as the epitope against which they are directed, are unclear. They are not thought to be autoantibodies, although molecular mimicry to self-antigens remains a possibility. While ASCAs are considered rather specific for CD, several recent studies suggest that a wider panel of autoimmune and rheumatic disorders may be associated with high prevalence of ASCAs.

G Protein Pathways, Part B: G Proteins and their Regulators

Pamela E. Mentesana, . James B. Konopka, in Methods in Enzymology , 2002

Introduction

Saccharomyces cerevisiae yeast cells are proving to be a useful expression system for the study of G-protein-coupled receptors (GPCRs) because they offer unique experimental advantages. Yeast grow rapidly and are highly amenable to manipulation by genetic and molecular biological procedures. A particular advantage for the study of GPCRs is that it has been possible to achieve functional expression of mammalian receptors in yeast. 1,2 A wide range of mammalian and other GPCRs have been shown to function in place of the G-protein-coupled mating pheromone receptors that promote conjugation in yeast. The ability of heterologous receptors to function in yeast can be readily assessed by analyzing their ability to activate the mating pheromone signal pathway. This strategy permits the direct analysis of a particular receptor in the absence of other receptor subtypes. In addition, yeast expression systems offer opportunities for high throughput screening assays and genetic selections to identify agonists, antagonists, receptor mutants, etc. Yeast has also been proven to be a useful system to produce high levels of receptor protein for purification. Therefore, in this chapter, we will describe the basic techniques needed to express a GPCR in yeast and monitor its function.

пекарские дрожжи (Saccharomyces cerevisiae)

И эти существа хотят кушать, хотят жить в комфорте, да.
А мы, мы в свою очередь хотим печь и кушать хлеб. И дрожжи нам тут лучшие помощники. И стало быть, нам с ними надо найти общий язык и предоставить наилучшие условия для жизни.

Чего же они хотят?
Им нужна комфортная температура, и очень важна её стабильность, по крайней мере чтоб небыло резких перепадов, высокая влажность, нужна пища, ну и дышать им хочется, они ж аэробные микроорганизмы.

А почему собственно будут у нас размножаться нужные культуры, а не все, например, или какая-то другая, ведь в природе и дрожжи и другие микроорганизмы на воле гуляют как хотят? Потому, что создадим условия, для именно дрожжей благоприятные.

Дрожжи размножаются обычно бесполым путем: почкованием (Saccharomyces ellipsoides) или, реже, делением, но могут размножаться и спорами.
Появлению спор способствует резкий переход с богатого питательного субстрата на бедный при хорошей аэрации. Дрожжи сбраживают углеводы с образованием этилового спирта и углекислого газа по уравнению: С6Н12О6 === 2СН3СН2ОН + 2СО2 Спиртовое брожение лежит в основе пивоваренной, хлебной и др. промышленностей.
Лучше всего дрожжи развиваются в среде кислой и слабокислой реакции (рН 4-6). Устойчивы к высокой концентрации сахара (до 70%) и спирта (до 14%) в среде.

Аэрирование и насыщение кислородом в процессе размножения дрожжей имеют целью снабжение клеток достаточным для производства биомассы количеством кислорода. Использование воздуха имеет несколько недостатков по сравнению с кислородом. Растворимость кислорода в сусле (11,5%) при аэрировании — 8,0 мг 02/л, а при насыщении кислородом — 38,5 мг 02/л.
Низкая растворимость кислорода при аэрировании вкупе с улетучиванием (stripping effect) 78% азота значительно затрудняют подачу кислорода к жидкой фазе. Другой проблемой при использовании воздуха является пенообразование, вызванное азотом, из-за чего требуется аппарат со свободным пространством над продуктом. Однако определенное количество С02 образуется даже при насыщении сусла кислородом и при аэробных условиях, что приводит к образованию пены . Это вызвано эффектом Грабтри (то есть хорошо сбраживаемые углеводы предотвращают дыхание).
С другой стороны, насыщение сусла кислородом может приводить к высоким концентрациям кислорода, которые вызывают у дрожжевой клетки стресс и могут привести даже к гибели клетки.
Дозирование кислорода необходимо контролировать.

Опара — суть питательная среда, нужна нам чтоб дрожжи могли быстро размножиться, оказавшись в благоприятных условиях.
Влажность густой опары составляет 42-48%. Основное назначение опары активация и размножение дрожжей , а также накопление продуктов созревания (кислот, ароматических и водорастворимых веществ). Приготавливая опару, соблюдают определенные условия , стимулирующие размножение дрожжей и процессы созревания. Соль и жиры в опару не добавляют, так как эти вещества отрицательно влияют на дрожжи.
Температура 29-31 гр.С. оптимальная для размножения дрожжей .
Влажность опары на 1-3% выше влажности теста, что улучшает обмен веществ в дрожжевой клетке, активизирует ферменты и ускоряет набухание клейковины. Длительное брожение опары (3-5 ч) обеспечивает достаточное размножение дрожжей и накопление продуктов созревания. Опару готовят из 45-60% муки, большей части воды и всего количества дрожжей, полагающихся по рецептуре. Если имеется одновременно сильная и слабая мука, то сильную берут на замес опары, а слабую на тесто, так как оно бродит недолго и клейковина будет ослаблена в меньшей степени. . Замешенную опару посыпают сверху мукой, чтобы предотвратить заветривание, и оставляют бродить на 3-5 ч. Готовность опары определяют оргомолептически и по кислотности. Выброженная опара имеет резкий спиртовой запах и равномерно сетчатую структуру, что указывает на образование в ней нормального клейковитого каркаса. Объем опары в конце брожения увеличивается в 2-2,5 раза, при слабом касании поверхности опары опадает.

Честно говоря, кажется сомнительной разница во влажности опары и теста, по ощущениям так несколько больше, даже для густой опары (влажность 41-48%). (жидкой считается опара влажности 68-75%)

Хочу ещё добавить, что в качестве питательной среды для дрожжей я обычно использую переспелые бананы. Агар-агар отдыхает по сравнению с ними. И опара на такой закваске поднимается очень быстро, потому что дрожжи там активны и бодры.
Идея такого субстрата мне пришла, когда задумала я сделать уксус из банана, а вместо этого получила дрожжи, сильные дрожжи, не заквашивала ничем, просто банан и вода. Но среди разных имеющихся культур, хоть и хорошо эти тесто поднимали, но не на первом месте оказались по вкусовым качествам готового хлеба (правда, не хуже покупных всё равно), так что можно и просто на банане вырастить дрожжи, только тогда кипятком обдавать не надо.

Часть опары отделяю, перед вмешиванием остальных компонентов в тесто, тщательно, но не взбивая, перемешиваю с банановым пюре (очищенные бананы перед пюрированием обдать кипятком), и ставлю на хранение при t 5-7гр.С.
Так закваска может храниться в норме дней 10, но и две недели бывало стояла у меня, тогда требуется больше времени на первый подъем опары. Оптимально конечно использовать закваску сразу же, у меня же реально получается раз в 2-3 дня.

Добавить комментарий