Аллергия на lepidoglyphus destructor м у подростков

Содержание страницы:

Сенной зуд

Сенной зуд (глицифагоз, англ. hay itch) — акариаз, вызванный Glycyphagus destructor [1] .

Возбудитель — клещ Glycyphagus destructor (Schrk.) (Glyciphagus destructor Schrank., син. Lepidoglyphus destructor) живёт в запасах зерна, круп, семян масличных культур, сухофруктов, в сене, соломе, в мебели. 0,3 — 0,7 мм в длину. Развития от яйца до имаго происходит в 22 дней при комнатной температуре. Взрослые особи живут в течение примерно 50 дней. Основными источниками питания этих клещей являются мука, крупа, другие продукты из злаков и грибы.

Gl. domesticus — источник целого ряда аллергенов Lep d 2, Lep d 5, Lep d 7, Lep d 10. Этим в первую очередь определяется его медицинское значение [2] .

Может при контакте или вдыхании зараженного субстрата вызывать развитие аллергических реакций: дерматита, крапивницы, атопического дерматита [3] . В тропиках этот клещ может быть причиной возникновения астмы [4] . Аллергия на G. domesticus может привести к патологии дыхания (см. Акариаз легочный).

Gl. domesticus обнаружен в моче (см. Уринарный акариаз) [5] , экскрементах (см. Кишечный акариаз) [6] .

Также Gl. domesticus вредит в пищевой промышленности, повреждая и загрязняя зерно [7] .

АЛЛЕРГИЯ НА КЛЕЩЕЙ ДОМАШНЕЙ ПЫЛИ

Консультация

Пишу Вам с Грузии, город Батуми.

У моего ребёнка( 8 ЛЕТ) аллергия на клещей домашней пыли.

D.pteronyssinus— 3.27 kUA/l

Acarus siro——— 18.6 kUA/L

Lepidoglyphus destructor— 11.5 kUA/I

Tyrophagus putrescentiae— 17.6 kUA/I

Врач предлагает заказать аллергены клещей D.pteronyssinus и D.farinae фирмы

Сталлержен и начинать делать иммунотерапию.

У меня вопрос: можно ли делать инъекции от всех видов клещей, а не только

Панель клещевых аллергенов (клещ-дерматофаг перинный, клещ- дерматофаг мучной, dermatophagoides microceras, lepidoglyphus destructor)

Стоимость Добавить 550 руб.
Время готовности 2 часа с момента поступления биоматериала в лабораторию
Материал для исследования Кровь
Особые условия без ограничений
анализ включен в следующие профили
  • Аллергия бытовая (расширенный)

Панель клещевых аллергенов — лабораторный тест, направленный на выявление в крови пациента специфических иммуноглобулинов класса Е (IgE), ответственных за возникновение аллергических реакций при контакте с домашней пылью.

Существует несколько видов клещей, способных вызвать аллергическую реакцию при контакте с ними: клещ дерматофаг перинный, клещ дерматофаг мучной и пр. Клещи обитают в матрасах, подушках, книгах, питаясь омертвевшими частичками кожи человека, выделяя фекалии и воспроизводя потомство. Именно выделения клещей являются аллергенами и служат причиной дерматитов, ринитов, конъюнктивитов и бронхиальной астмы.

Исследование помогает определить суммарное количество IgE-антител, вырабатываемых иммунной системой на совокупность аллергенов клещей домашней пыли, и подтвердить наличие аллергии.

Панель клещевых аллергенов № 1 (IgE): Dermatophago >

Записаться на анализ «Панель клещевых аллергенов № 1 (IgE): Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae, Glycyphagus domesticus, Euroglyphus maynei, Blomia tropicalis» вы можете заполнив форму ниже или заказав бесплатный звонок администратора!

Подготовка к сдаче анализа происходит следующим образом:

Общий анализ крови, гормоны, биохимический анализ крови, светрываемость (коагулология), изосерология, онкомаркеры, аллергология, иммунология, ПЦР

Исследование проводится утром натощак. Негазированную воду можно пить в обычном режиме. В случае необходимости можно сдать кровь через 2-4 часа после необильного приема пищи. Накануне перед исследованием исключить физические нагрузки, эмоциональное перенапряжение, приём алкоголя, УФО, воздействие рентгеновских лучей. За 30 мин. до исследования не курить, не производить внутривенные и внутримышечные инъекции.

ВАЖНО: исследование на онкомаркер простатоспецифический антиген (ПСА) рекомендовано проводить не ранее, чем через 10 дней после цистоскопии, колоноскопии, тепловых процедур, пальцевого ректального исследования, трансуретральной биопсии, лазерной терапии, физиопроцедур, трансректального узи простаты. Гормональные исследования рекомендовано сдавать утром, до 10.00 – 11.00.

Где сделать анализ «Панель клещевых аллергенов № 1 (IgE): Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae, Glycyphagus domesticus, Euroglyphus maynei, Blomia tropicalis»?

Обратитесь в медицинский центр «Рождение». Сотрудники возьмут у Вас биологический материал. Эта процедура полностью безопасна, проводится с использованием стерильных инструментов.

Через несколько дней после того, как сделали анализ крови, результаты проведенных исследований будут у Вас на руках. Если аллергия на грибы подтвердилась, следует обратиться к врачу.

Сдать анализ «Панель клещевых аллергенов № 1 (IgE): Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae, Glycyphagus domesticus, Euroglyphus maynei, Blomia tropicalis» можно по адресу Варфоломеева 239 -Медицинский центр рождение.

Аллергодиагностика и аллерговакцинация при бронхиальной астме у кошек

Резюме

Введение

Астма – это рецидивирующее обструктивное заболевание, поражающее дистальный отдел респираторной системы и характеризующееся повышенной реактивностью бронхов. Изменения в бронхах сопровождаются появлением кашля, хрипов при дыхании и других симптомов респираторного дистресса. Во многих случаях астма возникает у кошек в результате развития иммунной реакции на попавшие в органы дыхания с воздухом аллергены, которые вызывают специфические химические и структурные изменения в трахеобронхиальном дереве2. Реакция гиперчувствительности 1-го типа считается главным патогенетическим механизмом астмы у кошек, как и астмы у человека3 4 5 7.
Для постановки окончательного диагноза «непищевая аллергия» и подбора аллергенов с целью последующей иммунотерапии обычно применяют интрадермальное тестирование кожи (кожную аллергопробу), то есть определение реакции в ответ на внутрикожное введение аллергенов. Если реакция считается позитивной (возникновение инфильтрата), устанавливается диагноз «непищевая аллергия». У кошек до последнего времени использовали внутрикожное тестирование, которое считается важным в плане определения дальнейшего лечения (аллерговакцинация).
Используемая в условиях ветеринарной практики десенсибилизирующая иммунотерапия (введение аллергена подкожно в постепенно увеличивающихся дозах) помогает ослабить клиническую картину аллергического заболевания. Реальный механизм этого явления до конца не изучен, но предполагают, что в процессе постоянного контакта с антигеном изменяется реактивность Т-лимфоцитов.

В настоящее время иммунотерапия является единственным методом специфического лечения атопических заболеваний у кошек, обеспечивающим хороший результат, по данным зарубежных авторов1.

Материалы и методы

Заключение

Тест-система фирмы «ARTU» (Голландия) позволяет успешно определять аллергены бронхиальной астмы у кошек. Установлено, что наиболее частыми аллергенами являются грибы Aspergillus fumigatus – в 72,0 % случаев и клещ Tyrophagus putrescentiae – в 69,0 % случаев. Применение аллерговакцины у больных животных способствовало уменьшению количества рецидивов и выраженности клинических признаков, а у 64 % кошек не наблюдали признаков астмы в течение 1 года после начала вакцинации.
Таким образом, можно сделать вывод, что включение аллерговакцинации в схему терапии бронхиальной астмы у кошек достаточно эффективно.

Аллергия на lepidoglyphus destructor м у подростков

Аллергены — это, в основном, белковые вещества с молекулярной массой от 5 до 100 кДа. Также к аллергенами относятся гаптены («неполные аллергены»), которые являются низкомолекулярными соединениями и вызывают сенсибилизацию после поступления в организм и связывания с белками организма. Аллергены по своей сути являются антигенами, поскольку вызывают развитие иммунного ответа.

Аллергены обозначаются с использованием трех букв латинского названия рода (растения, животного, насекомого), буквы названия вида и цифрой, отражающей исторический порядок обнаружения либо иную информацию. Так, аллерген клеща домашней пыли Dermatophagoides pteronyssimus обозначается как Der p 1. Аллерген арахиса Arachis hypogaea — Ara h 1, Ara h2, Ara h 3. Молекулярные варианты аллергенов сопровождаются дополнительными цифрами, например Amb a 1.01.

По клинической значимости выделяют главный (мажорный), средний и минорный аллергены. Мажорный аллерген — это молекула, способная связывать примерно 50% антител IgE в сыворотке пациента, сенсибилизированного данным аллергеном. Минорный аллерген связывает до 10% IgE, а средний находится в интервале между мажорным и минорным.

Классифицируют аллергены на ингаляционные, пищевые, инсектные (аллергены насекомых) и лекарственные, кроме того существуют профессиональные и другие аллергены.

Пути внедрения в организм могут быть: ингаляционный (чаще всего), пероральный, парентеральный.

Ингаляционные аллергены

Ингаляционные, или аэроаллергены, подразделяют на находящиеся в помещении пребывания людей («indoor») и внешние («outdoor»). к первым относятся клещ домашней пыли, перхоть животных, насекомые, плесневые грибы, к внешним — пыльца, споры папоротника, грибковые аллергены. Клинически внешние аллергены представляют собой наибольший риск для возникновения сезонного аллергического ринита, а внутренние — для бронхиальной астмы и круглогодичного (персистирующего) аллергического ринита.

Аэроаллергены переносятся потоками воздуха (ветром) благодаря малому размеру (20-60 мкм для пыльцы деревьев и трав, 3-30 мкм для грибковых спор, 1-10 мкм для клещей. Мелкие частицы способны проникать глубоко в отделы дыхательного тракта, вплоть до альвеол.

Пыльцевой мониторинг позволяет выявлять концентрации аллергенов в различных регионах в разное время года и даже суток. В сухую ветреную погоду концентрация аллергенов в воздухе значительно увеличивается. В помещении сухость воздуха способствует уменьшению количества внутренних аллергенов (клеща и плесени).

Бытовые аллергены

Домашняя пыль

Домашняя пыль — наиболее частая причина развития аллергических реакций. В состав домашней пыли входят перхоть и выделения животных, насекомые, грибки, продукты жизнедеятельности клещей домашней пыли, синтетические аллергены из покрытий и мебели.

Название (вид) Вид Область высокой концентрации Источник
Клещи домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus (Der p 1), Dermatophagoides farinae (Der f 1) Под кроватью, матрасы, подушки, ковры, мягкие игрушки и др. Тела и фекалии
Кошка, собака Felis domesticus (Fel d 1), Canis familiaris (Can f 1) То же Сальные и слюнные железы
Тараканы Blatella germanica (Bla g 1), Periplaneta Americana (Per a 1) Кухня Слюна, фекалии, выделения, тела насекомых
Грибы Alternaria alternata (Alt a 1), Cladosporium herbarium (Cla h 1), Aspergillus fumigatus (Asp f 1) Различные Споры

Клещи домашней пыли

Клещи домашней пыли («dust mites») составляют значительную часть массы домашней пыли и принадлежат к семейству Pyroglyphidae, подкласс Acari, класс Arachnid, тип Arthropods. Это членистоногие размером около 0,3 мм и незаметные для невооруженного глаза.

Наиболее важные в качестве аллергенов виды клещей — это Dermaophagoides pteronyssinus (Der p), Dermatophagoides farinae (Der f), Euroglyphus maynei (Eur m), Lepidoglyphus destructor (Lep d) и Blomia tropicalis (Blo t).

Название Аллерген Молекулярная масса, кДа Описание
Acarus siro Aca s 13 14 Кислотосвязывающий белок
Dermatophagoides microceras Der m 1 25 Цистеиновая протеаза
Dermatophagoides pteronyssinus Der p 1 25 Цистеиновая протеаза, гомолог Der f 1, Eur m 1, папаина, катепсинов B и H
Der p 2 14 Холестеринсвязывающий белок
Der p 3 28/30 Трипсин, гомолог Der p 6, Der f 3, Der f 6 и других химотрипсинов и протеаз
Der p 4 60 Амилаза
Der p 5 14
Der p 6 25 Химотрипсин, гомолог Der p 3, Der f 3, Der f 6 и других химотрипсинов и протеаз
Der p 7 22-28 88%-я гомология и перекрестная реактивность с Der f 7
Der p 8 26 Глутатионтрансфераза
Der p 9 28 Сериновая протеаза
Der p 10 36 Тропомиозин
Der p 14 Аполипофорин
Dermatophagoides farinae Der f 1 25 Цистеиновая протеаза, гомолог Der p 1, Eur m 1, папаина, катепсинов B и H
Der f 2 14 Холестеринсвязывающий белок
Der f 3 34 Трипсин, гомолог Der p 3, Der p 6, Der f 6 и других химотрипсинов и протеаз
Der f 6 30 Химотрипсин, гомолог Der p 3, Der p 6, Der f 3 и других химотрипсинов и протеаз
Der f 7 22 88%-я гомология и перекрестная реактивность с Der p 7
Der f 9
Der f 10 39 Тропомиозин
Der f 11 98 Парамиозин
Der f 14 190 Аполипофорин
Der f 15 98 Хитиназа
Der f 16 53 Гелсолин/вилин
Der f 17 53 Кальцийсвязывающий белок
Der f 18w 60 Хитиназа
Euroglyphus maynei Eur m 1 24 Цистеиновая протеаза, гомолог Der p 1, Der f 1, папаина, катепсинов B и H
Eur m 2
Eur m 14 177 Аполипофорин
Blomia tropicalis Blo t 1 11-13 Цистеиновая протеаза
Blo t 3 24
Blo t 4 56
Blo t 5 14 Гомология с другими аллергенам клещей
Blo t 6 25 Химотрипсин
Blo t 10 33 Тропомиозин
Blo t 11 110 Парамиозин
Blo t 12 16 Хитиназа, гомолог Der f 15
Blo t 13 Кислотосвязывающий белок
Blo t 19 7,2 Гомолог антимикробного пепсина
Blomia tropicalis Lep d 1 14-16 Гомология с другими аллергенами клещей
Lep d 2 Тропомиозин

Главными источниками клещевых аллергенов являются как тело клеща, так и фекальные шарики (10-35 мкм), которые могут при уборке комнаты подниматься в воздух.

Dermatophagoides и Euroglyphus питаются перхотью человека, которая скапливается обычно на матрасах, на полу под кроватью, в подушках, коврах, мягких игрушках, мягкой мебели. Количество клещей максимально при температуре выше 20С и высокой влажности (80% относительной влажности). Если влажность снижается до менее 50%, то клещи высыхают и умирают.

Гомологичные клещевые аллергены обладают перекрестной реактивностью.

Разновидности складских клещей: Glyciphagus domesticus, Glyciphagus destructor, Tyrophagus putrecentiae, Dermatophagoides microceras, Euroglyphus maynei, Acarus siro. Они присутствуют в хранилизах зерна и муки.

Инсектные аэроаллергены: тараканы

Источниками аэроаллергенов являются различные насекомые, но наиболее важными являются тараканы. Среди всех разновидностей пять имеют значение как источники внутренних аллергенов, из который наиболее часто встречаются Blatella germanica (немецкие) и Periplaneta americana (американские). Аллергены обнаруживаются в слюне, фекальном материале, выделениях и мертвых телах насекомых.

Пыльцевые аллергены

Пыльцевые аллергены вызывают у предрасположенных пациентов сезонные проявления — поллиноз (аллергический ринит, конъюктивит, астму). Вестной цветут деревья, в июне и июле — луговые (злаковые) травы, с июля по октябрь — сорные травы. В зависимости от места проживания время пыления различается.

Размер пыльцы растений может быть от 5 до 200 мкм в диаметре, в среднем составляя 20-60 мкм. Пыльца может переноситься с ветром на большие расстояния. Пациенты, расположенные ближе к источнику пыления, страдают от более тяжелых симптомов поллиноза.

Пыльца деревьев

Между пыльцой различных деревьев существует перекрестная реактивность, особенно, если растения относятся к одному семейству или классу. Концентрация пыльцы деревьев повышается весной и начало пыления зависит от количества теплых дней, предшествующих поллинации.

Аллергены фруктов и овощей обладают перекрестной реактивностью с аллергенами пыльцы березы Bet v 1 и Bet v 2 (профилин березы).

Пыльца трав

В отличие от пыльцы деревьев среди аллергенов трав имеется выраженная перекрестная реактивность. Описано большое количество перекрестных реакций между пыльцевыми аллергенами и другими видами аллергенов.

Аллергены латекса

Натуральный каучуковый латекс — сложный биологический материал, содержащий более 200 полипептидов. К настоящему времени выделено 17 аллергенов латекса с молекулярной массой от 2 до 100 кДа, некоторые из них (Hev b 1, Hev b 2, Hev b 5, Hev b 12) являются важными перекрестно реагирующими паналлергенами — белками, отвечающими за обширную перекрестную реактивность между различными аллергенами за счет структурной гомологии с аллергенами фруктов, пыльцы и грибов.

В зависимости от пути поступления (ингаляционно или при контакте) аллергены латекса могут вызвать респираторные или кожно-слизистые проявления. 30-50% имеющих аллергию на латекс также гиперчувствительны к некоторым растительным пищевым продуктам, осоенно — свежим фруктам. Эту связь называют синдромом «латекс-фрукт».

Аллергенные белки латекса участвуют в обширных перекрестных реакциях с некоторыми белками авокадо, картофеля, банана, помидора, каштана и киви. У части пациентов отмечаются положительные кожные пробы на томат, обнаруживаются специфические IgE-антитела к латексу, а также к картофелю, томату, перцу, авокадо.

Растительный защитный белок (хитиназа I класса), перекрестно реагирующий с гевейном (Hev b 6.02), является главным IgE-связывающим аллергеном у больных с аллергией на латекс и, вероятно, это самый важный аллерген, ответственный за перекрестные реакции между киви и латексом. Но и другие паналлергены, например, пататин (Hev b 7.01/7.02) и Hev b 5 могут также принимать участие в этих реакциях. Hev b 5 — белок латекса, ответственный за анафилаксию у больных с сенсибилизацией к латексу. Он гомологичен аллергенам киви и картофеля.

Примерно 45% с аллергией к латексу также имеют гиперчувствительность к аллергенам банана.

Аллергены животных

Сенсибилизация аллергенами животных чаще всего связана с домашними (кошки, собаки) и лабораторными (грызуны, кролики) животными. Выявление реакции осуществляется путем изучения анамнеза и аллергологического тестирования (прик-тесты, ИФА). Наиболее сильные аллергены содержаться в перхоти и секретах животных.

Основные источники аллергенов кошки: сальные железы, слюна, перианальные железы, шерсть. При кастрации самцов уровень продукции главных аллергенов может снизиться.
Главные аллергены кошки Felis domesticus (Fel d 1 и Fel d 2, диаметр 1-10 мкм) могут оставаться в помещении длительное время (недели и месяцы) после удаления животного. Также аллергены могут пассивно переноситься на одежде в места, где животных нет.
Главный аллерген собаки (Can f 1) присутствует в больших количествах в домашней пыли, матрасах, кровати, а также в публичных местах, где животные могут отсутствовать. Основные источники аллергенов – шерсть, слюна, моча, перхоть.
Аллергены собак и кошек обладают кросс-реактивностью с аллергенами других животных.
Источниками аллергенов грызунов (хомяков, кроликов, мышей, крыс) являются шерсть, моча, слюна . Профессиональную сенсибилизацию отмечают у лабораторного персонала.
Описана частая сенсибилизация к аллергенам лошади. Источниками аллергенов являются грива, моча, пот. Перекрестные реакции наблюдаются с аллергенами кошки, собаки, парнокопытных.
Сенсибилизация к аллергену коровы (Bos d) снижается из-за автоматизации процессов доения и разведения.

Грибковые аллергены

Грибы являются как наружными, так и внутренними источниками аллергенов. Они могут размножаться как в лесных почвах, сене и зерне, так и в ванных комнатах, подвалах, библиотеках, в цветочных горшках (особенно при частом поливе). Строение грибковых спор отличается от строения пыльцы, поскольку спора является живой клеткой, способной к росту и секреции аллергенов в живом организме.
Выделяют две группы грибов – плесневые (“mold”), размножающиеся спорами и фрагментацией гиф, и дрожжевые (“yeasts”) – грибы, состоящие из отдельных клеток, размножающиеся почкованием и делением. Для практического использования удобна экологическая классификация грибковых организмов, объединяющая их в группы по одинаковым условиям, в которых они начинают спороносить.
Грибы проникают в организм человека ингаляционно, энтерально, и могут вызывать контактную реакцию. Споры грибов очень малы (3-30 мкм) и могут проникать глубоко в респираторный тракт. Они могут вызывать развитие ринита, синусита, астмы, аллергического бронхолегочного аспергиллеза, гиперсенситивного пневмонита. Кожные грибковые инфекции могут вызываться A. fumigatus, C. albicans, M. Furfur, некоторыми видами Trichophyton.
В атмосфере определяется более ста видов плесневых грибов. Условия обитания грибов – умеренная влажность, умеренная закисленность и освещенность, температура – 18-32 градуса.
Обострение при грибковой аллергии чаще возникает весной и осенью (в средней полосе России это время наиболее активного спорообразования).
Наиболее важные аэроаллергены – Cladosporium, Alternaria, Aspergillus и Penicillum. Несмотря на то, что смеси мягких сыров содержат плесени, принадлежащие к роду Penicillum, пациенты с аллергией на споры плесени обычно не реагируют на плесневый сыр.
Alternaria alternata принадлежит к Ascomycetes и является одним из самых важных аллергенных грибов. Выявлена связь между сенсибилизацией к Alternaria и угрожающей жизни астмой. Споры Alternaria обнаруживаются в воздухе круглогодично, с пиками в августе и осенние месяцы. Главный аллерген – Alt a 1, с неизвестной биологической функцией. Отмечается перекрестная реактивность с Stemphylum и Curvularia.
Aspergillus fumigatus относится к Deuteromycetes, его часто называют “складской гриб», поскольку он часто обнаруживается в хранилищах зерна, фруктов, овощей. У некоторых пациентов с астмой этот гриб является главным фактором, вызывающим аллергический бронхолегочный аспергиллез. Заболевание сопровождается выработкой IgE и IgG, эозинофилией и бронхоэктазами, в некоторых случаях развивается грибковый синусит. Asp f 1 в комплексе с Asp f 3 и Asp f 5 обладает 97%-ной чувствительностью для диагностики сенсибилизации к Aspergillus.
Cladosporium herbarum принадлежит к Deuteromycetes и обнаруживается преимущественно вне помещений, в холодном климате. Выделено три главных аллергена: Cla h 1, Cla h 2 и Cla h 4. Содержит энолазу – главный аллерген большинства грибов.
Penucillum citrinum принадлежит к Deuteromycetes и является важным внутренним аллергеном, как и Aspergillus. Ряд аллергенов обладает перекрестной реактивностью с Aspergillus. У 16-26% пациентов с астмой обнаруживаются антитела IgE к антигенам Penicillum.
Дрожжевые грибы могут находиться как в пище, так и в воздухе, наиболее распространенные – Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces minor и Pityrosporum. IgE-сенсибилизация к дрожжевым грибкам обнаруживается, в частности, у пациентов с атопическим дерматитом. Продукты, содержащие Saccharomyces cerevisiae – хлеб, красное вино, игристые вина, белое вино, пиво, они вызывают реакции у сенсибилизированных пациентов и аллергены этих грибков обладают кросс-реактивностью с Candida.
В воздухе могут содержаться и споры других грибов, Basidiomycetes и Ascomycetes, вызывающие аллергические реакции.
Инсектные аллергены, содержащиеся в яде и слюне насекомых
Яд часто попадает в организм при ужалении перепончатокрылых (Hymenoptera): пчел, ос, шмелей, шершней. Иногда реакции развиваются на укусы комаров, мошек, слепней, оводов.

Пищевые аллергены

Пищевыми аллергенами называют гликопротеины с молекулярной массой 10-70 кДа, реже – полипептиды и гаптены. Выделяют растительные и животные аллергены.
Пищевые аллергены хорошо растворимы в воде, некоторые термостабильны и устойчивы к воздействию протеолитических ферментов. Аллергенность пищевых белков обусловлена множеством эпитопов, а также зависит от пространственной конфигурации молекулы. Особенностью пищевых аллергенов является способность изменять антигенные свойства в ходе кулинарной обработки. Иногда аллергенность при этом теряется, а иногда, наоборот, приобретается.
Пищевая аллергия редка у пациентов с аллергическим ринитом в отсутствие других симптомов. С другой стороны, аллергический ринит может быть симптомом пищевой аллергии при системной реакции на продукт. Многие пищевые продукты содержат перекрестно реагирующие аллергены, например, с аллергенами из пыльцы растений.

Пищевые аллергены животного происхождения

Пищевую аллергию у взрослых обычно вызывают рыба, моллюски и ракообразные, в то время как аллергию к коровьему молоку и яйцу чаще отмечают у детей.

Коровье молоко

Аллергия к коровьему молоку (Bos Tauris) обычно развивается у детей первого года жизни, как правило, после перевода ребенка на искусственное вскармливание молочными смесями.

Аллергены содержатся в молоке, сыре и других молоынх продуктах, а также в хлебе, печенье, блинах, супах, обработанном мясе, таком как ветчина, колбаса и т.п. Молоко и продукты его переработки широко используются в кондитреской промышленности. Так, казеин усиливает задержание влаги в конфетах и леденцах, гидролизованные молочные белки служат взбитой основой зефира, в запеченных продуктах молоко улучшает цвет корки, прочность печенья и пирожных.

У детей грудного возраста пищевая аллергия при употреблении молока обычно проявляется со стороны ЖКТ (диарея, рвота и боль в животе) и кожи (зуд, высыпания). У грудных детей может происходить кровотечение из прямой кишки. Более 50% детей с аллергией на коровье молоко страдают от ринита.

Коровье молоко состоит из двух фракций: казеина и сыворотки. Казеин включает четыре основных белка: αs1-, αs2-, β- и κ-казеин. Он видонеспецифичен, термостабилен, устойчив к кислому pH и при оксилении выпадает в осадок (много в сырах, твороге). Фракция казеина представляет 80% всех молочных белков. Казеин присутстсвует в молоке как коллоидный комплекс с фосфатом кальция. Казеинаты применяются как наполнители и специи в немолочных продуктах.

Даже достаточно длительное кипячение лишь уменьшает, но не устраняет аллергенность казеина.

Главные аллергенные белки, содержащиеся в сыворотке – это β-лактоглобулин, α-лактальбумин и бычий сывороточный альбумин.

α-лактальбумин – один из наиболее важных аллергенов молоко коровы, он видоспецифичен, термолабилен и теряет аллергенные свойства при нагреве до 56 градусов. Обладает кросс-реактивностью с белком яйца (овальбумином). β-лактоглобулин также рассматривается как главный аллерген молока. Он термостабилен и требует нагревания до 130 градусов.

Яйцо куриное

Аллергия на яйцо – одна из самых частых причин пищевой аллергии в грудном возрасте и у детей раннего возраста. Яйцо употребляется при приготовлении множества пищевых продуктов.

Рыба и морепродукты являются профессиональными аллергенами для людей, участвующих в обработке морепродуктов.

Белки рыб относятся к наиболее распространенным и сильным аллергенам. Среди всех больных аллергией распространенность аллергии к рыбе – от 10 до 40%. Морская рыба более аллергенна, чем речная. Широко распространена сенсибилизация к аллергену трески, при этом системные реакции могут возникнуть при ингаляции пара при приготовлении трески, при контакте с кожей. Аллергены рыбы могут сохраняться в многократно используемом для жарки растительном масле. Наибольшей сенсибилизирующей активностью обладают протеины саркоплазмы, особенно белок M.

Аллерген Gad с 1 (аллерген M) трески (Gadus morhua) принадлежит к парвальбуминам, термостабилен, сохраняется в запахах и парах. Главный аллерген лосося – Sal s 1 массой 12 кДа. Некоторые аллергены лосося и трески обладают перекрестной реактивностью. При этом аллергены лосося менее устойчивы при термообработке. Чаще всего больные аллергией на рыбу сенсибилизированы только к определенным видам (например, к треске).

Моллюски

Большая часть пищевых аллергий, связанных с употреблением моллюсков, вызвана кальмаром. Кальмар (Todarodes pacificus) вследствие кулинарной обработки может приобретать новые аллергены.

Сенсибилизация к аллергенам осьминога часто встречается в Южной Европе.

Ракообразные

Тяжелые аллергические реакции, вплоть до анафилактических, вызываются при употреблени в пищу краба (Cancer pagurus). Лангуст (Panulirus) имеет главный аллерген, сходный по структуре с аллергенами креветки, рака и краба. Реакции гиперчувствительности могут возникать при употреблении лобстеров (Homarus gammarus).

Креветка (Pandalus borealis) традиционно рассматривается как высокоаллергенный продукт. Реакция в большинстве случаев связана с тропомиозином (Pen a 1, Pen i 1, Met e 1).

Несмотря на высокое содержание бека, мясо вызывает аллергию значительно реже, чем яйца, молоко и морепродукты.

Чаще мясо является гистаминолибератором, и его употребление приводит к рзвитию псевдоаллергических реакций за счет воздействия на тучные клетки. Антигенный состав различных видов мяса отличается, поэтому при аллергии на говядину могут не развиваться симптомы после употребления баранины, свинины, куриного мяса. Важно, что могут возникать перекрестные аллергические реакции на сывороточные препараты, полученные из животных (например, противодифтерийная сыворотка при аллергии к конине; ферментные препараты из поджелудочной железы крупного рогатого скота и т.п.).

Аллергия на говядину (Bos spp.) не очень распространена и обычно не связана с аллергией на коровье молоко. Говядина содержит бычий сывороточный альбумин (BSA) и γ-глобулин, часть аллергенов, содержащихся в коровьей перхоти и волосах.

Распространенность аллергии на мясо свиньи (Sus spp.) при пищевой аллергии составляет 1,5-20% случаев. Аллерген свинины является гомологом сывороточного альбумина и аллергена эпителия кошки, что приводит к появлению перекрестных реакций (синдром «свинина-кошка»). Возможно возникновение профессионального дерматита при контакте со свининой.

Баранина (Ovis spp.) является слабым аллергеном. Аллергия относительно редко встречается и к мясу кролика (Oryctolagus spp.), но может быть серьезной проблемой для детей, так как свидетельствует об общей непереносимости белков мяса.

При сенсибилизации к белкам яйца могут выявляться антитела и к мясу курицы (Gallus domesticus). У мяса курица может наблюдаться перекрестная реактивность с мясом индейки.

Пищевые аллергены растительного происхождения

Важную роль играют следующие группы растительных аллергенов:

  • — PR-белки (pathogen-related) – патогенетические белки, «белки защиты»;
  • — белки хранения;
  • — 2S-альбумины;
  • — тиоловые протеазы;
  • — ингибиторы протеаз.

PR-белки синтезируются в растениях при стрессовых для них ситуациях (неблагоприятные условия, инфекция, повреждения). В пыльце и плодах содержание этих белков особенно высоко. Выделяют 14 групп этих белков, из которых 8 обладают аллергенной активностью. PR-2-белки – ответственны за развитие синдрома «латекс-фрукт», как и PR-3 – эндохитиназы, служащие для защиты растения от грибков и насекомых. PR-10 – гомологи аллергена березы Bet v 1.

Важные аллергены – LTP-белки, участвующие в развитии орального аллергического синдрома. Это Pru p 3 персика, Pru ar 3 абрикоса, Mal d 3 яблока. Они часто определяют перекрестную аллергию к фруктам.

Белки хранения злаковых и бобовых обладают выраженными аллергенными свойствами. Основные белки бобовых – глобулины: легумин и вицилин гороха, и подобные белки, являющиеся 11S- и 7S-глобулинами. Эти глобулины также содержатся в семенах масличных культур, в орехах.

2S-альбумины содержатся в семянах, обладают выраженными аллергенными свойствами, обнаруживаются в горчице, рапсе, касторовых бобах, грецком орехе, кешью, бразильском орехе, кунжуте, арахисе.

Тиоловые протеазы – папаин из папайи, фицин из винной ягоды, бромелаин из ананаса, актинидин из киви, соевый белок из сои.

Ингибиторы протеаз (амилаз, трипсина, химотрипсина) содержатся в соевых бобах, в злаках, в листьях растений (томат, люцерна, картофель).

Аллергены моркови (Daucus carota) перекрестно реагируют с пыльцевыми паналлергенами, например Dau c 1 является кросс-аллергеном с Bet v 1 березы, гомологи которого также содержатся в яблоке, сельдерее, моркови, орехах и сое.

Много аллергенов содержит картофель (Solanum tuberosum). Sol t 1 – главный аллерген картофеля. Картофельная мука и крахмал обычно не содержат аллергены.

Таблица перекрестной реактивности аллергенов Скрыть таблицу

АЛЛЕРГИЯ К КЛЕЩАМ ДОМАШНЕЙ ПЫЛИ С ПОЗИЦИЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ АЛЛЕРГОЛОГИИ

Полный текст:

Аннотация

Ключевые слова

Об авторах

105064, Москва, Малый Казенный пер., 5а. Тел.: (495) 917-08-91. Факс: (495) 917-49-00.

Список литературы

1. Воробьева О.В., Гущин И.С. Контролируемые исследования эффективности и безопасности аллергенспецифической иммунотерапии: исторический аспект // Российский аллергологический журнал. – 2011. – № 4. – С. 3-14.

2. Желтикова Т.М., Антропова А.Б., Петрова-Никитина А.Д., Мокеева В.Л., Биланенко Е.Н., Чекунова Л.Н. Экология жилых помещений и аллергия // Аллергология. – 2004. – № 3. – C. 20-28.

3. Желтикова Т.М., Мокроносова М.А. Распространение клещей амбарно-зернового комплекса и их роль в сенсибилизации жителей г. Москвы // Бюллетень экспериментальной медицины и биологии. – 1991. – № 4. – С. 396-398.

4. Коровкина Е.С., Курбачева О.М., Ильина Н.И. Стандартные подходы к диагностике и лечению аллергического ринита // Российский аллергологический журнал. – 2005. – № 3. – С. 21-26.

5. Курбачева О.М., Ильина Н.И., Лусс Л.В. Современная диагностика и терапия аллергического ринита: рациональность и обоснованность выбора // Аллергология. – 2003. – № 3. – C. 51-54.

6. Мокроносова М.А. Сенсибилизация к клещам амбарно-зернового комплекса // Терапевтический архив. – 1991. – № 3. – С. 53-55. 7. Сергеев А.В., Мокроносова М.А. Синдром оральной аллергии // Медицинская иммунология. – 2011. – Т. 13, № 1. – C. 17-28.

7. Читаева В.Г., Гущин И.С. Диагностическая значимость кожных проб и определения аллерген-cпецифического IgE при респираторной и пищевой аллергии // Российский аллергологический журнал. – 2008. – № 3. – C. 3-14.

8. Akdemir C., Soyucen E. Sensitization of children to storage mites in Kutahya, Turkey // Korean. J. Parasitol. – 2009. – Vol. 47 (4). – P. 387-391.

9. Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma (ARIA) in collaboration with the World Health Organization (WHO) // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 108. – Suppl. – P. 147-336.

10. Allergen immunotherapy therapeutic vaccines for allergic diseases. WHO Position Paper // Allergy. – 1998. – Vol. 53. – P. 1-42 .

11. Alvarez-Cuesta E., Bousquet J., Canonica G.W., Durham S.R., Malling H.J., Valovirta E.; EAACI, Immunotherapy Task Force. Standarts for practical allergen-specific immunotherapy // Allergy. – 2006. – Vol. 61. – P. 1-23.

12. Arlian L.G., Neal J.S., Morgan M.S., Vyszenski-Moher D.L., Rapp C.M., Alexander A.K. Reducing relative humidity is a practical way to control dust mites and their allergens in homes in temperate climates // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 107, N 1. – P. 99-104.

13. Arlian L.G., Platts-Mills T.A. The biology of dust mites and the remediation of mite allergens in allergic disease // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 107 (3 Suppl). – P. 406-413.

14. Asturias J.A., Arilla M.C., Gomez-Bayon N.N., Mart nez A., Mart nez J., Palacios R. Sequencing and high level expression in Escherichia coli of the tropomyosin allergen (Der p 10) from Dermatophagoides pteronyssinus // Biochim. Biophys.Acta. – 1998. –Vol. 1397. – P. 27-30.

15. Asyuso R., Reese G., Leong-Kee S., Plante M., Lehrer S.B. Molecular basis of arthropod cross-reactivity: IgE-binding cross-reactive epitopes of srimp, hous-dust mite and cockroach tropomyosins // Int. Arch. Allergy Immunol. – 2002. – Vol. 129. – P. 38-48.

16. Bush R.K., Portnoy J.M. The role and abatement of fungal allergens in allergic diseases // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 107 (3 Suppl). – P. 430-440 18. Chapman M.D. Environmental allergen monitoring and control // Allergy. – 1998. – Vol. 53. – P. 48-53.

17. Choi S.Y., Lee I.Y., Sohn J.H., Lee Y.W., Shin Y.S., Yong T.S., Hong C.S., Park J.W. Optimal conditions for the removal of house dust mite, dog dander, and pollen allergens using mechanical laundry // Ann. Allergy Asthma Immunol. – 2008. – Vol. 100, N 6. – Р. 583-588.

18. Cuesta C., Pl cido J.L., Delgado L., Miranda M., Moreira Silva J.P., Castel-Branco M.G., Vaz M. Cockroach allergy: a study of its prevalence using skin tests with commercial extracts // Allergol. Immunopathol. (Madr). – 1995. – Nov-Dec. – Vol. 23 (6). – P. 295-300.

19. Custovic A., Chapman M. Risk levels for mite allergens. Are they meaningful? // Allergy. – 1998. – Vol. 53 (Suppl. 48). – P. 71-76.

20. Fernandez-Caldas E. Mite species of allergologie importance in Europe // Allergy. – 1997. – Vol. 52. – P. 383-387.

21. Gafvelin G., Johansson E., Lundin A., Smith A.M., Chapman M.D., Benjamin D.C., Derewenda U., van Hage-Hamsten M. Cross-reactivity studies of a new group 2 allergen from the dust mite Glycyphagus domesticus, Gly d 2, and group 2 allergens from Dermatophagoides pteronyssinus, Lepidoglyphus destructor, and Tyrophagus putrescentiae with recombinant allergens // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 107 (3). – P. 511-518

22. G mez C., S nchez-Garc a S., Ib ez M.D., L pez R., Aguado E., L pez E., Sastre B., Sastre J., Del Pozo V. Tropomyosin IgE-positive results are a good predictor of shrimp allergy // Allergy. – 2011 – Vol. 66 (10). – P. 1375-1383

23. GINA Report, Global Strategy for Asthma Management and Prevention. Published November 2006 // http://www.ginasthma.org.

24. Gr nlund H., Saarne T., Gafvelin G., van Hage M. The major cat allergen, Fel d 1, in diagnosis and therapy // Int. Arch. Allergy Immunol. – 2010. – Vol. 151 (4). – P. 265-274.

25. Hage-Hamsten M. van, Johansson E. Clinical and immunologic aspects of storage mite allergy // Allergy. – 1998. – Vol. 53 (Suppl. 48). – P. 49-53.

26. Hales B.J., Shen H.D, Thomas W.R. Crossreactivity of T-cell responses to Dermatophagoides pteronyssinus and D. farinae. Studies with group 1 and 7 allergens // Clin. Exp. Allergy. – 2000. – Vol. 30 (7). – P. 927-933.

27. Johansson E., Aponno M., Lundberg M., Van Hage-Hamsten M. Allergenic cross-reactivity between the nematode Anisakis simplex and the dust mites Acarussiro, Lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae, and Dermatophagoides pteronyssinus // Allergy. – Vol. 56. – Issue 7. – P. 660-666.

28. Kerkhof M., Droste J.H.J., de Monchf J.G.R., Schouten J.P., Rijcken B. Distribution of total serum IgE and specific IgE to common aeroallergens by sex and age, and their relationship to each other in a random sample of the Dutch general population aged 20-70 years // Allergy. – 1996. – Vol. 51. – P. 770-776.

29. Kim Y.K., Lee M.H., Jee Y.K., Hong S.C., Bae J.M., Chang Y.S., Jung J.W., Lee B.J., Son J.W., Cho S.H., Min K.U., Kim Y.Y. Spider mite allergy in apple-cultivating farmers: European red mite (Panonychusulmi) and two-spotted spider mite (Tetranychusurticae) may be important allergens in the development of work-related asthma and rhinitis symptoms // J. Allergy Clin. Immunol. – 1999. – Vol. 104 (6). – P. 1285-1292.

30. King C., Brennan S., Thompson P.J., Stewart G.A. Dust mite proteolytic allergens induce cytokine release from cultured airway epithelium // J. Immunol. – 1998. – Vol. 161. – P. 3645-3651.

31. King T.P., Hoffman D., Lowenstein H., Marsh D.G., Platts-Mills T.A., Thomas W. Allergen nomenclature // Allergy. – 1995. – Vol. 50. – P. 765-774.

32. Lopata A.L., Lehrer S. New insights into seafood allergy // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. – 2009. – Vol. 9. – P. 270-277.

33. Mellerup M.T., Hahn G.W., Poulsen L.K., Malling H. Safety of allergen-specific immunotherapy. Relation between dosage regiment, allergen extract, disease and systemic side-effect during induction treatment // Clin. Exp. Allergy. – 2000. – Vol. 30. – P. 1423-1429.

34. Mueller G. A., Edwards L.L., Aloor J.J., Fessler M.B., Glesner J., Pomes A., Chapman M.D., London R.E., Pedersen L.C. The structure of the dust mite allergen Der p 7 reveals similarities to innate immune proteins // J. Allergy Clin. Immunol. – 2010. – Vol. 125 (4). – P. 909-917.

35. Partti-Pellinen K., Marttila O., MaèkinenKiljunen S., Haahtela T. Occurrence of dog, cat, and mite allergens in public transport vehicles // Allergy. – 2000. – Vol. 55. – P. 65-68.

36. Pauli G. Evolution of understanding of cross-reactivities of respiratory allergens: the role of recombinant allergens // Int. Arch. Allergy Immunol. – 2000. – Vol. 123. – P. 183-195.

37. Peake H.L., Currie A.J., Stewart G.A, McWilliam A.S. Nitric oxide production by alveolar macrophages in response to house dust mite fecal pellets and the mite allergens, Der p 1 and Der p 2 //

38. J. Allergy Clin. Immunol. – 2003. – Vol. 112 (3). – P. 531-537.

39. Pittner G., Vrtala S., Thomas W.R., Weghofer M., Kundi M., Horak F., Kraft D., Valenta R. Component-resolved diagnosis of house-dust mite allergy with purified natural and recombinant mite allergens // Clin. Exp. Allergy. – 2004. – Vol. 34 (4). – P. 597-603.

40. Platts-Mills T.A., Vervloet D., Thomas W.R., Aalberse R.C., Chapman M.D. Indoor allergens and asthma: report of the Third International Workshop // J. Allergy Clin. Immunol. – 1997. – Vol. 100 (6). – P. 2-24.

41. Pongracic J.A., O’Connor G.T., Muilenberg M.L., Vaughn B., Gold D.R., Kattan M., Morgan W.J., Gruchalla R.S., Smartt E., Mitchell H.E. Differential effects of outdoor versus indoor fungal spores on asthma morbidity in innercity children // J. Allergy Clin. Immunol. – 2010. – Vol. 125 (3). – P. 593-599.

42. Ree R. van. Analytic aspects of the standardization of allergenic extracts // Allergy. – 1997. – Vol. 52. – P. 795-805.

43. Santos A.B., Rocha G.M., Oliver C., Ferriani V.P., Lima R.C., Palma M.S., Sales V.S, Aalberse R.C, Chapman M.D., Arruda L.K. Crossreactive IgE antibody responses to tropomyosins from Ascaris lumbricoides and cockroach // J. Allergy Clin. Immunol. – 2008 – Vol. 121 (4). – P. 1040-1046.

44. Scala E., Alessandri C., Palazzo P., Pomponi D., Liso M., Bernardi M.L, Ferrara R., Zennaro D., Santoro M., Rasi C., Mari A. IgE recognition patterns of profilin, PR-10, and tropomyosin panallergens tested in 3,113 allergic patients by fllergen microarray-based technology // PLoS One. – 2011. – Vol. 6 (9). – e24912.

45. Sever M.L., Arbes S.J., Gore J., Santangelo R.G., Vaughn B., Mitchell H., Schal C., Zeldin D.C. Cockroach allergen reduction by cockroach control alone in low-income urban homes: A randomized control trial // J. Allergy Clin. Immunol. – 2007. – Vol. 120. –P. 849-855.

46. Sidenius K.E., Hallas T.E., Poulsen L.K., Mosbech H. Allergen cross-reactivity between house-dust mites and other invertebrates // Allergy. – 2001. – Vol. 56 (8). – P. 723-33.

47. Smith A.M., Benjamin D.C., Hozic N., Derewenda U., Smith W.A, Thomas W.R, Gafvelin G., van Hage-Hamsten M., Chapman M.D. The molecular basis of antigenic cross-reactivity between the group 2 mite allergens // J. Allergy Clin. Immunol. – 2001. – Vol. 107 (6). – P. 977-84.

48. Son J.W., Kim H.Y., Park H.S., Lee M.H., Cho S.H., Min K.U., Kim Y.Y. Citrus red mite (Panonychuscitri) is the most common sensitizing allergen of asthma and rhinitis in citrus farmers // Clin. Exp. Allergy. – 1999. – Vol. 29 (8). – P. 1102-1109.

49. Strachan D., Sibbald B., Weiland S., A t-Khaled N., Anabwani G., Anderson H.R., Asher M.I., Beasley R., Bj rkst n B., Burr M., Clayton T., Crane J., Ellwood P., Keil U., Lai C., Mallol J., Martinez F., Mitchell E., Montefort S., Pearce N., Robertson C., Shah J., Stewart A., von Mutius E., Williams H. Worldwide variations in prevalence of symptoms of allergic rhinoconjunctivitis in children: the international study of asthma and allergies in childhood (ISAAC) // Pediatr. Allergy Immunol. – 1997. – Vol. 8. – P. 161-176.

50. Thomas W.R., Smith W. House-dust mite allergens // Allergy. – 1998. – Vol. 53. – P. 821-832.

51. Thomas W.R, Smith W.A., Hales B.J. The allergenic specificities of the house dust mite // Chang. Gung. Med. J. – 2004. – Vol. 27 (8). – P. 563-569.

52. Thomas W.R., Smith W.A., Hales B.J., Mills K.L., O’Brien R.M. Characterization and immunobiology of house dust mite allergens // Int. Arch.Allergy Immunol. – 2002. – Vol. 129 (1). – P. 1-18.

53. Valenta R., Linholm J., Niederberger V., Hayek B., Kraft D., Gronlund H. The recombinant allergen-based concept of component-resolved diagnosis and immunotherapy (CD and CRIT) // Clin. Exp. Allergy. – 1999. – Vol. 29. – P. 896-904.

54. Vrtala S. From allergen genes to new forms of allergy diagnosis and treatment // Allergy. – 2008. – Vol. 63. – P. 299-309.

Что делать, если у подростка появилась аллергия на собственный пот

Существует много видов аллергических реакций, какие-то встречаются чаще, например, поллиноз, какие-то реже, например, аллергия на яблоки. Елена Борисовна Черкасова, педиатр сети клиник «Витбиомед+», врач высшей категории, рассказала «Летидору» еще об одной разновидности аллергии, которая может беспокоить подростков — об аллергической реакции на пот.

Как проявляется аллергия на пот

Аллергия на пот — не самый известный вид аллергии, но страдают ей, по некоторым данным, около 10% молодых людей. Аллергия на пот встречается у людей любого возраста, у подростков в том числе.

Пот может вызывать обострения атопического дерматита и провоцировать холинергическую крапивницу — именно ее мы имеем в виду, говоря об аллергии на пот. Если у подростка при повышении температуры воздуха, после физической нагрузки, после стрессовых ситуаций, то есть ситуаций, вызывающих потение, развиваются симптомы холинергической крапивницы, то, скорее всего, это проявления аллергии на пот.

Симптомы аллергии на пот

Холинергическая крапивница развивается остро, то есть симптомы появляются в течение 10–60 минут после триггера (в нашем случае потения). У подростка возникают зудящие красные небольшие волдыри с серозным содержимым, может быть ощущение ожога крапивой (отсюда и название), еще эта сыпь болезненна.

Причины аллергии на пот

В исследовании 2020 года, которое было опубликовано в журнале Current Problеms of Dermatology, ученые выяснили, что главным антигеном, вызывающим выброс гистамина и, следовательно, проявление аллергии при потении, является белок, вырабатываемый грибом Malassezia globosа.

Этот дрожжевой грибок живет на коже многих животных и людей и обычно не вызывает проблем. Но он же может стать причиной оппортунистических инфекций, то есть заболеваний, которые вызваны условно-патогенными вирусами или клеточными организмами (бактерии, грибы, простейшие), но при этом они не приводят к болезни здоровых людей, а развиваются только при сниженном иммунитете. Например, повышенное количество этого же грибка наблюдают при перхоти.

Выброс гистамина вызывает воспаление и стимулирует выброс ацетилхолина (нейромедиатор, который отвечает за высшие функции мозга). Последний выделяется в ответ на физическую нагрузку, стресс, прием горячей ванны, то есть в ситуациях, когда люди тоже, как правило, потеют, и вызывает иммунный ответ, проявляющийся сыпью.

Аллергия на клещ домашней пыли, на ракообразные и морепродукты.

❓Где они обитают?

��Клещи домашней пыли распространены повсеместно и питаются отмершими клетками эпителия человека. Идеальная среда для размножения клещей это постельные принадлежности, мягкие игрушки, ковры.
Температура свыше 22 градуса и уровень влажности свыше 60% также создают благоприятные условия для размножения клещей.

��Аллергию вызывают не сами клещи, а их фрагменты и продукты жизнедеятельности.

��Аллергия на морепродукты и ракообразные также может быть связана с аллергией на клещей домашней пыли, ведь они имеют одинаковый белок аллерген.

✅Современная молекулярная аллергодиагностика — тест ALEX позволяет уточнить, на какой белок клеща домашней пыли есть аллергия и подобрать аллерген-специфическую иммунотерапию.

Чем поможет тест ALEX❓
▶️Это единственный тест в Украине, который определяет аллергию к белку клеща домашней пыли Der p 11, роль которого доказана в развитии обострения атопического дерматита.

▶️Тест ALEX определяет аллергию к пылевым клещам и клещам хранения, а именно:

• Blomia tropicalis
• Dermatophagoides pteronyssinus
• Dermatophagoides farinae
• Glycyphagus domesticus
• Lepidoglyphus destructor
• Tyrophagus putrescentiae
• Acarus siro

Аллергия у подростков: в чем ее отличия?

Сегодня врачи считают, что современные подростки более подвержены аллергии, чем взрослые, и течение патологии у них нередко атипичное. Это связано с теми процессами, которые происходят в период полового созревания и их влиянием на иммунитет ребенка. По данным исследований подростков больше беспокоит чихание и насморк, чем детей более раннего возраста. У 25% подростков в возрасте от 12 до 15 лет наблюдается аллергический ринит, широко известный как сенная лихорадка или поллиноз. И эксперты говорят, что число болеющих им детей неуклонно растет. С чем это связано, чем особенны проявления поллиноза в подростковом периоде, можно ли перерасти проблему?

Аллергия в подростковом возрасте

Ученые выяснили, что у подростков поллиноз протекает в иных формах, чем у взрослых. Эти данные недавно опубликованы в Annals of Allergy, Asthma and Immunology. Это важно знать при проведении диагностики и лечения, чтобы не спутать симптомы аллергии с иными патологиями.

Во-первых, важно помнить, что подростки это не «большие дети» или «маленькие взрослые». Подростки переходят от детства, через этап половой зрелости ко взрослой жизни. За это время они подвергаются изменениям в физическом, социальном, эмоциональном, психологическом и интеллектуальном развитии.

Из-за этих изменений, хронические заболевания, такие как аллергия, могут оказывать на них специфическое и более глубокое воздействие, в силу чего могут повлиять на здоровье на всю оставшуюся жизнь. Развивающаяся аллергия у них имеет специфические черты, и они вполне актуальны и для поллиноза.

Аллергические проявления у подростков: особенности

Симптомы аллергии, проявляющиеся поражением слизистых носа и глаз, у подростков могут существенно отличаться в сравнении с другими возрастными группами. Если говорить в целом, то для поллиноза типично поражение слизистых глаз в виде острого конъюнктивита, и воспалительный процесс в области носа — острый ринит.

Характерны жжение и зуд слизистых, обильное прозрачное отделяемое, заложенность носа и затруднение носового дыхания, чихание, снижение обоняния, ощущение тяжести, заложенности носа и пазух. Также возникают светобоязнь и отечность век, слезотечение, ощущение песка в глазах.

Французское исследование показало, что аллергические проявления у подростков были тяжелее, нежели у детей или взрослых. Это может ухудшить способность к обучению, концентрации и чтению. Они также обнаружили, что подростков больше беспокоили чихание и насморк, которые у детей выражены слабее.

При этом у подростковой группы был меньше выражен зуд в носу, чем у взрослых. При этом явления конъюнктивита острее, отек век и дискомфорт в области глаз резко выражены, что затрудняет привычную деятельность.

Это говорит о том, что лечение аллергии у подростков может быть иным, чем у взрослых и детей.

Влияние поллиноза на качество жизни

Еще одна особенность поллиноза, которую исследовали ученые, это влияние симптомов аллергии на качество жизни подростков. Исследование показывает, что подростки, у которых выставлен поллиноз, имеют более высокий уровень эмоционального стресса, и у них более повышен уровень тревоги и депрессии, чем у детей или взрослых пациентов.

Родители подростков с поллинозом отмечают, что аллергические реакции со стороны носа и глаз заставили подростков больше расстраиваться, вызывали недовольство, злость и смущение. Такие реакции не типичны для детей с аллергией или взрослых пациентов.

Сон важен для всех людей, и особенно он нужен подросткам, чтобы они могли успешно обучаться в школе и заниматься спортом. Исследование показало, что подростки с поллинозом испытывают трудности с засыпанием и больше страдают от ночных пробуждений, плохого сна, чем их здоровые сверстники. А подростки с аллергическим ринитом чаще храпят по ночам, чем здоровые дети. Эти нарушения сна, расстройства дыхания в силу храпа и другие проблемы влияют на успеваемость в школе.

Аллергический ринит и его влияние на обучение

В крупном исследовании, проведенном в Соединенном Королевстве, сообщалось, что подростки в возрасте от 15 до 17 лет, чьи оценки снизились между зимними и летними экзаменами, имели значительно более высокую частоту аллергического ринита, чем у учащихся, чьи оценки не снижались. Подростки, чьи оценки снизились, также активно использовали препараты, устраняющие ринит, имели диагноз астмы и дополнительные симптомы поллиноза, чем те, чьи оценки не снижались. Таким образом, аллергический ринит резко влияет на оценки, и может помешать тому, чтобы подросток был допущен в конкретный колледж или область обучения, ограничивает карьеру и будущие доходы.

Изменения иммунитета в подростковом возрасте и их влияние

Наряду с другими органами и системами, иммунитет в период полового созревания также претерпевает изменения. Считается, что за счет мощных гормональных влияний он окончательно перестраивается на взрослый тип функционирования и укрепляется. Поэтому часть детских болезней можно перерасти. Однако, если иммунитет имеет дефекты, иммунная система сенсибилизирована определенными видами аллергенов, то с наступлением полового созревания аллергия никуда не девается, и переходит с подростком во взрослую жизнь.

Считается, что выраженные симптомы аллергии во взрослом возрасте могут стать не такими яркими. Но наряду с этим известно, что по мере времени поллиноз в силу изменений иммунитета, может переходить и в более тяжелые формы, например, атопическую астму.

Поэтому любой пациент, у кого есть аллергия в форме сезонного или круглогодичного ринита либо сочетания его с конъюнктивитом, должен должным образом лечить свою патологию. Но есть и особые причины, по которым подростки должны получать оперативную и надлежащую помощь. Именно в подростковом возрасте, на фоне резких нейро-гормональных изменений, поллиноз может перетечь в бронхиальную астму. Поэтому, если ослабить контроль за лечением поллиноза, продолжать контакты с потенциально опасными аллергенами, проявления могут резко усилиться, и к симптомам ринита в один прекрасный день присоединится и бронхиальная обструкция.

Аллергия на lepidoglyphus destructor м у подростков

Клініко-діагностична лабораторія «МетроЛаб» ліцензована Міністерством охорони здоров’я України на здійснення медичної практики (Ліцензія МОЗ України N 956 від 08.09.2020).
Лабораторія є однією з найбільш оснащених медичних лабораторій України. Ми працюємо на високоточному обладнанні світових виробників і тест-системами останнього покоління.
Наша команда сформована висококваліфікованими фахівцями з великим досвідом роботи. Ми робимо все, щоб ви швидко і якісно могли отримати найточніші результати лабораторних аналізів.

Пакеты услуг

Навігація

Поиск

Клещи Lepidoglyphus destructor наиболее часто встречается в муке, среди зерна, для нормального существования им необходима высокая влажность. В таких условиях на продуктах появляются плесневые грибы, которые служат пищей клещу. Сами Lepidoglyphus destructor и продукты их жизнедеятельности могут послужить причиной развития аллергических реакций у людей с клещевой сенсибилизацией. У пациентов может проявиться аллергический ринит, бронхиальная астма, воспаление конъюнктивы глаз, анафилактическая реакция.

Возможны перекрестные реакции с другими представителями клещей хранения, например, волосатым домашним клещом и гнилостным удлиненным клещом. При контакте с аллергенами Lepidoglyphus destructor в человеческом организме начинают вырабатываться защитные иммуноглобулины IgE. Они накапливаются после первого контакта с антигенами, в дальнейшем провоцируя немедленные проявления аллергии у пациента. Наиболее информативен тест будет после недавнего контакта с клещами, так как со временем уровень антител начинает уменьшаться.

Что включает в себя анализ?

Материалом для проведения анализа служит сыворотка крови, ее получают путем забора из вены. Полученный отрицательный результат является нормой, и говорит об отсутствии аллергии к Lepidoglyphus destructor. Положительный результат подтверждает чувствительность пациента к аллергенам клещей, чем выше титр антител, тем сильнее проявляется заболевание.

Показания для назначения анализа

  • в рамках диагностики аллергии;
  • для обследования детей, которые не достигли пяти лет;
  • если имеется риск развития анафилактического шока у пациента;
  • при отсутствии стадии ремиссии в аллергических проявлениях;
  • нет возможности отменить гипоаллергенные препараты, которые могут повлиять на кожные пробы;
  • в случае поливалентной сенсибилизации;
  • у больного низкая кожная реактивность;
  • во время острой стадии аллергии;
  • кожные пробы показали ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Правила подготовки к анализу

Сдать кровь нужно натощак, желательно в утренние часы, после приема пищи должно пройти не менее пяти часов. За сутки до посещения клинико-диагностической лаборатории Метролаб в городе Харьков необходимо воздерживаться от употребления алкоголя и жирной пищи, избегать физических нагрузок на организм. В день забора материала можно пить негазированную очищенную воду, за два часа до исследования не рекомендуется курить. Лекарственные препараты могут негативно повлиять на корректность результатов, поэтому следует прервать курс после консультации у лечащего врача.

Аллергологические исслледования

Аллергологические исследования — процедуры, которые назначаются при любом виде аллергии. Они проводятся для того, чтобы определить степень иммунной реакции человека — чувствительность к различным аллергенам. Это позволит назначить правильное лечение, которое поможет значительно снизить аллергическую реакцию или полностью избавит от аллергии.

Анализ крови на аллергены

Аллергологические исследования проводятся в лаборатории. Для этого у пациента берут на анализ кровь и смешивают её с конкретными аллергенами из одной или нескольких групп: ингаляционной, контактной и пищевой. Такой тест позволяет выявить, на какие именно вещества кровь вырабатывает специфический иммуноглобулин E.

Ингаляционная группа аллергенов содержит:

  • птичий пух;
  • шерсть животных;
  • домашнюю пыль;
  • пыльцу растений;
  • споры грибов;
  • сухой корм для аквариумных рыб и пр.

В группу контактных аллергенов, используемых при аллергологических исследованиях, входят компоненты:

  • косметических средств;
  • бытовой химии;
  • моющих средств.

Пищевая группа содержит продукты питания, перечень которых исчисляется сотнями наименований.

Как проводятся аллергологические исследования?

Сдавать анализ крови на аллергены рекомендуется в период ремиссии. Именно тогда уровень специфичных антител в крови максимально приближен к нормальному. При обострении он повышается, и результат будет «смазанным».

Чтобы аллергологические исследования были максимально точными, к ним следует правильно подготовиться:

  • Сдачу крови проводят с утра и только натощак.
  • За пару часов до анализа запрещено курить.
  • За 5 дней до аллергологических исследований из пищи исключают продукты с высокой степенью аллергенности. Это морепродукты, яйца, орехи, мёд, продукты с высоким содержанием какао и с синтетическими подсластителями, красителями и ароматизаторами, цитрусовые, молочные и кисломолочные продукты, несезонные фрукты и овощи.
  • В течение 7 дней до сдачи крови нельзя подвергать себя тяжелым эмоциональным и физическим нагрузкам.
  • На протяжении 5 дней до анализа нужно не контактировать с домашними животными.
  • В течение недели до исследования нужно постараться не принимать антигистаминные и другие лекарства, даже если, как вам кажется, они не влияют на аллергию.
  • Нельзя сдавать кровь для проведения лабораторных тестов, когда повышена температура, имеются желудочно-кишечные болезни, респираторные вирусные инфекции и другие острые состояния.

Цена анализа на аллергены

Цена аллергологических исследований зависит от вида диагностики. При необходимости после получения результата анализа в нашей клинике можно получить консультацию аллерголога-иммунолога.

Узнать цену аллергологических исследований и записаться на прием к специалистам центра «Здоровая семья» можно по телефонам, указанным на сайте.

Способ получения экстракта аллергена

Владельцы патента RU 2572230:

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для лечения аллергии. Для получения экстракта аллергена выполняют контакт исходного материала с жидким экстракционным средством с получением смеси. Подвергают смесь первому этапу разделения. Выполняют контакт остатка исходного материала со средством экстракции аллергенов. Подвергают смесь второму этапу разделения с получением сырого экстракта аллергена, из которого удаляют низкомолекулярную фракцию. Повторяют, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C с получением очищенного нативного экстракта аллергена. Подкисляют до pH 2-4. Затем удаляют низкомолекулярную фракцию и доводят pH до 7-8 с получением депигментированного экстракта аллергена. Приводят в контакт с глутаральдегидом. Удаляют молекулы с молекулярным размером менее 100 кДа. Повторяют, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид. Экстракт аллергена входит в состав композиции и вакцины для лечения аллергии. Использование группы изобретений позволяет получить аллерген, обладающий сниженной способностью связывать IgE и пригодный для иммунотерапии. 4 н. и 22 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 8 пр.

Настоящее изобретение относится к способу получения очищенного экстракта аллергена и фармацевтических композиций и вакцин для применения в диагностике и лечении аллергии.

Аллергия является приобретенным расстройством гиперчувствительности иммунной системы и запускается от воздействия безвредных веществ окружающей среды, известных как аллергены. Реакция гиперчувствительности типа I является характеристикой аллергических реакций и приводит к производству чрезмерных количеств антител IgE, которые в свою очередь активируют базофилы и тучные клетки, вызывая воспалительную реакцию. Эффекты могут быть системными, такими как вазодилатация, секреция слизи, стимуляция нервов и сокращение гладких мышц, вызывая реакцию анафилаксии, или ограниченными определенной областью тела, например, дыхательной системой.

Пищевая аллергия является развивающейся крупной проблемой здравоохранения, которая затрагивает около 6% школьников и приблизительно 4% взрослых и может иметь серьезные последствия, включая фатальные анафилактические реакции (1) . Аллергия, следовательно, может иметь значительное влияние на психосоциальные аспекты качества жизни, выходя за рамки непосредственных клинических эффектов аллергического состояния пациента и форм повседневной деятельности семей (2) . В настоящее время стандарт медицинского наблюдения этого типа аллергии включает строгое избежание специфических аллергенов и лечение эпинефрином.

Аллергия на арахис является иммунным ответом по типу гиперчувствительности типа I (опосредованной IgE) на пищевые вещества из арахиса, вызывая чрезмерную реакцию иммунной системы. Американский фонд астмы и аллергии (The Asthma and Allergy Foundation of America) считает, что аллергия на арахис является наиболее частой причиной смерти, связанной с пищевыми продуктами в США и подсчитал, что она затрагивает 0,4-0,6% населения. Древесные орехи, такие как пекан, фисташки, кедровые орехи и грецкий орех, также являются распространенными ореховыми аллергенами.

К настоящему времени одиннадцать аллергенов (от Ara h 1 до Ara h 11) из арахиса были идентифицированы (Arachis hypogea) и многие из них секвенированы и клонированы. На основании номенклатуры Международного союза иммунологических обществ (МСИО) (International Union of Immunological Societies, IUIS), эти аллергены включают: Ara h 1, купин (вициллин-тип, 7S глобулин) массой 64 кДа; Ara h 2, конглютин (2S альбумин) массой 17 кДа; Ara h 3, купин (легумин-тип, 11S глобулин, глицинии) массой 60 кДа; Ara h 4, купин (легумин-тип, 11S, глицинии) массой 37 кДа; Ara h 5, профилин массой 15 кДа; Ara h 6, конглютин (2S альбумин) массой 15 кДа; Ara h 7, конглютин (2S альбумин) массой 15 кДа; Ara h 8, связанный с патогенезом белок, PR-10 массой 17 кДа; Ara h 9, неспецифический липид-переносящий белок 1 массой 9,8 кДа; Ara h 10, 16 кДа олеозин, и Ara h 11, 14 кДа олеозин.

Аллергия на кошек является чрезвычайно распространенной, встречаясь у до 25% индивидуумов с аллергиями. Аллергия на кошек является более распространенной, чем аллергия на перхоть собак, что может быть связано с активностью кошачьей шерсти и перхоти как аллергена, а так же с фактом, что кошек обычно не купают. Кошачий аллерген производится в больших количествах, в частности некастрированными котами мужского пола, поскольку аллерген частично находится под гормональным контролем. Перхоть является постоянно переносимой по воздуху, липкой и находится в общественных местах, даже там, где нет кошек. Это связано с тем, что перхоть переносится на одежде людей, у которых есть кошки, затем сбрасывается в общественных местах. Следовательно, кошачий аллерген является компонентом домашней пыли, даже в домах, где никогда не жила кошка. Размер частиц кошачьей перхоти крайне мал и вдыхается глубоко в легкие. Кошачья перхоть, следовательно, является распространенной причиной аллергической астмы, и владельцы кошек, которые имеют аллергию на кошек, являются более склонными к развитию симптомов астмы (8, 9) .

Основные кошачьи и собачьи аллергены могут находиться в экстрактах шерсти/перхоти и слюне и поэтому рассматриваются как эпителиальные аллергены. Восемь различных аллергенов были идентифицированы у кошки, и многие из них секвенированы и клонированы. На основании веб-сайта МСИО (IUIS) эти алергены включают: Fel d 1 утероглобин массой 14 и 4 кДа; Fel d 2 альбумин массой 69 кДа; Fel d 3 цистатин массой 11 кДа; Fel d 4, липокалин массой 22 кДа; Fel d 5, иммуноглобулин А массой 400 кДа; Fel d 6, иммуноглобулин М массой 800-1000 кДа; Fel d 7, белок железы фон Эбнера массой 17,5 кДа; Fel d 8 лазерин-подобный белок массой 24 кДа. Основной кошачий аллерген, Fel d 1, был подробно охарактеризован с использованием белковых и иммунохимических техник и недавно был экспрессирован как рекомбинантный аллерген. Fel d 1 представляет димер массой приблизительно 36 кДа, который состоит из двух 17 кд субъединиц (10) .

Аллергия на травы является одним из наиболее распространенных и преобладающих форм аллергии, которая влияет на людей со своими историями в течение определенного сезона. Это присутствует в воздухе поздней весной и ранними летними месяцами, что может вызвать аллергические риниты, аллергические конъюнктивиты и астму. Прямой контакт кожи с травой, от сидения на травах или движения по газону, может вызвать зуд кожи, крапивницу, атопические дерматиты. Одним из самых представительных видов является вид тимофеевка луговая Phleum pratense, выбранный в качестве лидера группы трав. Девять различных аллергенов были идентифицированы из вида Phleum pratense. На основании вебсайта Allergen 1 эти аллергены включают: Phl р 1, бета-экспанзин массой 27 кДа; Phl p 2, группу трав II/III массой 10-12 кДа; Phl p 4, белок массой 55 кДа, Phl p 5 массой 32 кДа, Phl p 6 массой 11 кДа, Phl p 7, кальций-связывающий белок массой 6 кДа, Phl p 11, Ole е 1-связанный белок массой 20 кДа, Phl p 12 профилин массой 14 кДа и Phl p 13, полигалактуроназа массой 55 кДа.

Тростник (Phragmites) является родом, принадлежащим к группе трав. Было описано несколько видов, включая P. australis, или P. communis. Как сообщается, пыльца Phragmites communis является аллергенной в разных местностях. Опыление происходит между летом и осенью, в зависимости от широты и высоты над уровнем моря.

Пять различных белков со способностью связывания IgE были идентифицированы в роде Phragmites. На основании веб-сайта Allergome эти аллергены включают: экспанзин массой 30 кДа; белок, принадлежащий к группе 4 трав массой 60 кДа; рибонуклеазу массой 35 кДа, профилин массой 14 кДа и, наконец, полигалактуроназу.

Сорные травы могут быть разделены на гомологичные группы в соответствии с их классифицированными аллергенными экстрактами. Амброзия была выбрана в качестве одного из лидеров этой группы растений. По этой причине, результаты, полученные с этим экстрактом пыльцы, можно экстраполировать на другие сорные травы 1 .

Аллергию можно лечить рядом известных способов, включая иммунотерапию аллергенами, специфическую иммунотерапию (SIT) или специфическую аллерговакцинацию (SAV), которая является одной из форм иммунотерапии аллергических расстройств, при которой пациента вакцинируют все большими дозами экстракта аллергена с целью индуцирования иммунологической толерантности. Иммунотерапия аллергенами модулирует иммунный ответ на аллерген, а не улучшение симптомов, вызванных аллергической реакцией, и может либо уменьшить потребность в лечении, уменьшить тяжесть симптомов или устранить гиперчувствительность в целом.

Хотя имеется достаточное доказательство того, что иммунотерапия аллергенами является единственным средством, за исключением избежания аллергена, для причинного лечения IgE-опосредованных аллергических расстройств, вызванных ингаляционными аллергенами и жалящими насекомыми из группы Hymenoptera, иммунотерапия экстрактами аллергенов обычно не применяется для лечения пищевой аллергии. Только два недавних исследования показали умеренную клиническую эффективность применения сублингвальной иммунотерапии у индивидуумов, сенсибилизированных на грецкий орех и персик соответственно (3, 4) .

В предыдущих исследованиях предпринимались попытки индуцировать толерантность низкой дозы, путем кормления детей незначительными следами арахиса, которые постепенно становятся все больше и больше с целью построить иммунную систему (4, 6) . Хотя данные ранних клинических испытаний показывают, что аллергия на арахис может быть смягчена применением иммунотерапии (7) , в настоящее время отсутствует подтвержденное лечение для предотвращения или излечения аллергических реакций на арахис, с единственным эффективным вариантом для атопических индивидуумов в том, чтобы избегать пищевых продуктов, которые содержат или загрязнены целыми орехами арахиса, частицами арахиса и арахисовыми маслами и обеспечение оперативного доступа к самостоятельно вводимому эпинефрину.

Одним из рисков иммунотерапии является тот, что введение аллергена сенсибилизированному пациенту может вызвать тяжелую аллергическую реакцию или анафилактический шок. Со времени ее первого применения в начале 20-го века, много усилий было предпринято для дальнейшего улучшения безопасности и эффективности иммунотерапии аллергенами. Одним из подходов является использование аллерговакцин с уменьшенной аллергенностью, но с поддержанием иммуногенности.

Патенты США 5770698 и EP 0662080 раскрывают способ удаления веществ и других материалов низкомолекулярного веса с целью очистки экстракта аллергена и увеличения окончательного содержания аллерген/белок. Способ включает разрыв электростатических, гидрофобных или других физических сил в таких условиях, чтобы отделить не вызывающие аллергию вещества от аллергически активных белков. Способ может включать мягкую кислотную обработку путем снижения pH ниже pI соответствующих белков аллергенов.

Один из разнообразных способов уменьшения аллергенности включает химическое модифицирование нативных экстрактов аллергенов с альдегидом, главным образом, формальдегидом и глутаральдегидом, для производства аллергоидов. Эта обработка альдегидом приводит к продуктам реакции (главным образом полимерам), которые потеряли часть своей аллергенности (т.е. проявляют уменьшение IgE-реактивных В-клеточных эпитопов), уменьшая аллергические побочные эффекты. В то же время, нативная иммуногенность аллергена сохраняется благодаря неизмененным Т-клеточным эпитопам. Этот путь модификации аллергена был выбран некоторыми производителями аллерговакцин для разработки коммерчески доступных продуктов, основанных на этом принципе. В целом, существует тенденция к дальнейшей очистке экстрактов аллергенов, тщательной селекции наиболее важных и клинически значимых аллергенов.

Патенты EP 1834649 и EP 1834648 раскрывают способы получения экстрактов аллергенов, однако такие способы не достаточно удаляют загрязняющие белки низкомолекулярного веса.

Существует необходимость дальнейшего улучшения безопасности и эффективности лекарственных средств для применения в иммунотерапии аллергических расстройств путем оптимизации способа очистки аллергенов, чтобы гарантировать, что загрязняющие белки низкомолекулярного веса, раздражающие вещества и токсичные компоненты устранены.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Авторы изобретения разработали промежуточный этап, предшествующий полимеризации для дальнейшего улучшения способа полимеризации и уменьшения аллергенности некоторых экстрактов, таких как клещи, пыльцевые зерна, в том числе трав, сорных трав и деревьев, эпителиальные аллергены и пищевые аллергены, предшествующий обработке глутаральдегидом.

Целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения экстрактов, содержащих аллергены и фармацевтических композиций и вакцин для лечения аллергии. Дальнейшей целью является обеспечить оптимально эффективный экстракт аллергена со сниженной IgE — связывающей способностью, но который сохраняет свою иммуногенную способность.

В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, обеспечивается способ производства экстракта аллергена, включающий:

a) исходный материал, содержащий аллерген, контактирует с жидким экстракционным агентом для получения смеси, содержащей липиды растворенные в жидкой фазе и твердой фазы, содержащей остаток исходного материала, включающего аллергены и белки.

b) смесь подвергают первому этапу разделения для выделения остатка исходного материала,

c) остаток исходного материала контактирует со средством экстракции аллергенов с получением смеси аллергенов, растворенной в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей неаллергенный остаток.

d) смесь подвергают второму этапу разделения для выделения аллергенов, растворенных в жидкой фазе, для получения сырого экстракта аллергена,

e) сырой экстракт аллергена подвергают этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и

f) проводят этап е), пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C для получения очищенного нативного экстракта аллергена.

Следующий этап обработки может включать

g) подкисление нативного экстракта аллергена, удаление молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и нейтрализация pH для получения депигментированного экстракта аллергена.

Способ может в дальнейшем включать этап полимеризации, включающий:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с альдегидом и

i) удаление молекул с молекулярным размером менее 100 кДа.

Согласно второму аспекту настоящего изобретения, обеспечивается экстракт аллергена, доступный в соответствии со способом первого аспекта настоящего изобретения.

Согласно третьему аспекту настоящего изобретения, обеспечивается очищенный экстракт аллергена для применения в качестве активного терапевтического вещества для лечения аллергии.

«Аллерген» может быть определен как молекула, способная индуцировать IgE-ответ и/или аллергическую реакцию I типа.

Термин «депигментированный», относящийся к данному документу, может быть определен как полуочищенный экстракт аллергена, полученный из нативного экстракта путем удаления посторонних веществ, включая адсорбированные пигменты, которые он может содержать.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Аллергенные экстракты настоящего изобретения могут быть произведены из любого исходного материала, содержащего природные аллергены, как известно, вызывающие IgE-опосредованную иммунную реакцию у человека. Такие аллергены могут включать пищевые аллергены (например, арахис), переносимые по воздуху аллергены (например, пыльца трав, дерева, злака и сорных трав, пылевые клещи, грибы и плесени), аллергены насекомых (например, таракана, блох, пчелиный и осиный яд) и эпителиальные аллергены (шерсть животных, перхоть животных, например перхоть кошек и собак).

Пыльцевые аллергены из деревьев, трав и сорных трав происходят из таксономической группы порядков Fagales (например, Alnus и Betula), Lamiales (например, Olea и Plantago), Poales (например, Phleum pratense), Asterales (например, Ambrosia и Artemisia), Cayophyllales (например, Chenopodium и Salsola), Rosales (например, Parietaria), Proteales (например, Platanus), и т.д. Пылевые клещи относятся к группе отрядов Astigmata (например, Dermatophagoides и Euroglyphus). Переносимые по воздуху аллергены, произведенные от плесеней и грибов, относятся к отряду Pleosporales (например, Alternarid), Capnodiales (например, Cladosporium) и т.д.

Исходный материал согласно настоящему изобретению может быть любым аллергеном, включая пищевые аллергены, арахис, все виды земляных орехов, переносимые по воздуху аллергены (например, пыльца (древесная пыльца, пыльца сорных трав, пыльца трав, пыльца зерновых), пылевые клещи, грибы, плесени)), аллергены клещей, трав, деревьев и сорных трав, эпителиальные аллергены (шерсть животных, перхоть животных, например, кошачья шерсть и перхоть и собачья шерсть и перхоть) и аллергены насекомых (например, тараканов, блох, пчелиный и осиный яд).

Предпочтительно пищевым аллергеном является арахис.Более предпочтительно, арахисовым аллергеном является Arachis hypogeal.

Аллергены, переносимые по воздуху, могут выбирать/могут выбирать из групп: Древесная пыльца (Alnus glutinosa, Betula alba, Corylus avellana, Cupressus arizonica,, Olea europea, Platanus sp), пыльца трав (Cynodon dactylon, Dactylis glomerata, Festuca elatior, Holcus lanatus, Lolium perenne, Phleum pratense, Phragmites communis, Poa pratensis), пыльца сорных трав (Ambrosia elatior, Artemisia vulgaris, Chenopodium album, Parietaria judaica, Plantago lanceolata, Salsola kali) и пыльца зерновых (Avena sativa, Hordeum vulgare, Secale cereal, Triticum aestivum, Zea mays), пылевые клещи (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), грибы и плесени (Alternaria alternate, Cladosporium herbarum, Aspergillusfumigatus)

Эпителиальные Аллергены можно выбирать из любого животного, включая кошачью шерсть и перхоть, собачью шерсть и перхоть, лошадиную шерсть и перхоть, человеческие волосы и перхоть, кроличью шерсть и перхоть и перья.

Аллергены насекомых можно выбирать из муравья, блохи, клещей (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras,

Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), таракана, осиного яда и пчелиного яда.

Предпочтительно, исходный материал выбирают из пищевых аллергенов (Arachis hypogeal), пыльцы (Alnus glutinosa, Betula alba, Corylus avellana, Cupressus arizonica,, Olea europea, Platanus sp, Cynodon dactylon, Dactylis glomerata, Festuca elatior, Holcus lanatus, Lolium perenne, Phleum pratense, Phragmites communis, Poa pratensis, Ambrosia elatior, Artemisia vulgaris, Chenopodium album, Parietaria judaica, Plantago lanceolata, Salsola kali, Avena sativa, Hordeum vulgare, Secale cereal, Triticum aestivum, Zea mays), пылевых клещей (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), грибов и плесеней (Alternaria alternate, Cladosporium herbarum, Aspergillusfumigatus), эпителиальных аллергенов (кошачья шерсть и перхоть, собачья шерсть и перхоть, лошадиная шерсть и перхоть, человеческие волосы и перхоть, кроличья шерсть и перхоть и перья), аллергенов насекомых (муравья, блох, клещей таракана, осиного и пчелиного яда).

Более предпочтительно исходный материал выбирают из арахиса (Arachis hypogea), пыльцы (Olea europaea, Parietaria judaica, Phragmites communis и Phleum pratense), клещей (Dermatophagoides pteronyssinus) и эпителиального (кошачья перхоть).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения исходный материал выбирают из Arachis hypogeal, Olea europaea, Parietaria judaica, Phleum pratense, Dermatophagoides pteronyssinus, Phragmites communis, Parietaria judaica и кошачьей перхоти.

В еще более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения исходный материал выбирают из Arachis hypogea, Phleum pratense, Phragmites communis, Parietaria judaica и кошачьей перхоти.

В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения аллергеном является Arachis hypogeal.

Когда исходным материалом является арахис, предпочтительно шкурки удаляют, или материал может быть давленным или молотым. Арахис может быть жареным, обжаренным, запеченным или сырым.

Исходный материал могут обрабатывать для создания максимальной площади поверхности для контакта с жидким экстракционным средством. Исходный материал можно гомогенизировать, перемешивать, давить или молоть для получения гомогенной суспензии для жидкостной экстракции. Этап жидкостной экстракции является этапом «обезжиривания» для удаления липофильных соединений, таких как липиды и жирные кислоты, из исходного материала.

Жидкий экстракционный агент может быть ацетоном, который может быть холодным. Этап жидкостной экстракции могут осуществлять в соотношении 1:1 (вес исходного материала/вес жидкого экстракционного средства), или любом отношении, где вес жидкого экстракционного средства превышает вес исходного материала, например, 1:2, 1:3, 1:5, 1:10. Этап жидкостной экстракции предпочтительно осуществляют в соотношении 1 кг исходного материала к 2 л жидкого экстракционного средства. Этап жидкостной экстракции предпочтительно осуществляют в течение достаточного времени для того, чтобы липиды в исходном материале растворились в жидком экстракционном средстве, что может быть более 1 минуты, предпочтительно в течение 5 мин, более предпочтительно в течение 30 минут и наиболее предпочтительно в течение 1 часа или больше. Этап жидкостной экстракции можно осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно осуществляют холодным при температуре от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. В течение этапа жидкостной экстракции, исходный материал предпочтительно размешивают и взбалтывают с жидким экстракционным средством.

Первым этапом разделения может быть фильтрация.

После первого этапа разделения, остаток исходного материала можно промывать с жидким экстракционным средством. Факультативно, остаток исходного материала можно в дальнейшем экстрагировать жидким экстракционным средством, затем разделять. Предпочтительно, осуществляются один, два или более дополнительных этапов жидкостной экстракции. Жидкостная экстракция остатка исходного материала предпочтительно продолжается до тех пор, пока жидкое экстракционное средство не будет оставаться прозрачным после контакта с остатком исходного материала.

После жидкостной экстракции, остаток исходного материала можно высушивать. Остаток исходного материала можно высушивать при температуре от 2 до 25°C, и предпочтительно сушат при комнатной температуре. Этап сушки предпочтительно продолжают в течение достаточного времени для удаления жидкого экстракционного средства из остатка исходного материала, которое может составлять от 1 до 24 часов, от 6 до 18 часов, от 10 до 14 часов, предпочтительно около 12 часов.

Аллергены можно получать из «обезжиренного» остатка исходного материала путем экстракции со средством экстракции аллергена для получения сырого экстракта аллергена, содержащего аллергены, растворенные в жидкой фазе и твердой фазы, включающей «нежелательный», неаллергенный остаток. Средство экстракции аллергена может быть водным раствором и предпочтительно включать буферное средство. Средство экстракции аллергена может включать PBS и/или NaCl, например, раствор 0,01 М PBS/0,15 М NaCl. Остаток исходного материала могут экстрагировать в средстве экстракции аллергена в любом соотношении, где вес средства экстракции аллергена превышает вес остатка исходного материала, например, 1:2, 1:3, 1:5, 1:10, 1:20, 1:50. Предпочтительно, остаток исходного материал экстрагируют в средстве экстракции аллергена в соотношении 1:10 остаток исходного материала: средство экстракции аллергена (вес/вес). Соотношение остатка исходного материала к средству экстракции аллергена на этапе экстракции может варьировать, но должно быть таким, чтобы аллергены в остатке исходного материала могли растворяться в средстве экстракции аллергена. Экстракцию остатка исходного материала со средством экстракции аллергена предпочтительно осуществляют в течение достаточного времени для того, чтобы аллергены в остатке исходного материала растворились в средстве экстракции аллергена, которое может быть от 30 минут до 12 часов, предпочтительно от 1 до 6 часов, более предпочтительно от 2 до 5 часов и наиболее предпочтительно около 4 часов. Этап экстракции аллергена могут осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно осуществляют холодным при температуре от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. На этапе экстракции аллергена, остаток исходного материала предпочтительно перемешивают или взбалтывают со средством экстракции аллергена. После этапа экстракции аллергена, аллергены, растворенные в жидкой фазе, можно отделять от неаллергенного остатка, для получения сырого экстракта аллергена. Этап разделения представляет собой предпочтительно центрифугирование, хотя многие техники для отделения твердого вещества от жидкости применимы, что хорошо известны специалистам в данной области. Предпочтительно, аллергены, растворенные в жидкой фазе, центрифугируют при температуре от 2 до 6°C, предпочтительно от 3 до 5°C, в течение достаточного времени, чтобы осадить неаллергенный остаток в виде гранул, например, от 1 минуты до 1 часа или более 1 часа. Сырой экстракт аллергена (например, супернатант, содержащий растворенные аллергены), можно хранить при температуре при температуре от 2 до 6°C. Гранулу неаллергенного остатка можно дополнительно экстрагировать со средством экстракции аллергена, применяя те же условия, что на первом этапе экстракции аллергена, и желательно на более длительный период экстракции, такой как 4-8 часов, 8-12 часов или более 12 часов. После второго этапа экстракции аллергена, аллергены, растворенные в жидкой фазе, можно отделять от неаллергенного остатка для получения сырого экстракта аллергена. Сырые экстракты аллергена из первого и второго этапов экстракции аллергена предпочтительно объединяют для дальнейшей обработки. Сырой экстракт аллергена могут фильтровать, например, с использованием 0,45 мкм размер пор. Сырой экстракт аллергена могут подвергать этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул, имеющих низкий молекулярный размер, такие как соли и другие неаллергенные соединения. Заявителем экспериментально установлено, что композиция белков и аллергенов экстрактов арахиса является от 8 до 150 кДа, и эти аллергены должны быть сохранены на этапе удаления молекулярной фракции. Например, белок, переносящий липиды (LTP) арахиса — важный аллерген — 8кДа и который необходимо сохранить на протяжении этапа удаления низкомолекулярной фракции. На этапе е) молекулы, имеющие молекулярный размер менее 8 кДа, или 7 кДа, или 6 кДа, или 5 кДа, 4 кДа или 3,5 кДа можно удалять. Этап удаления низкомолекулярной фракции предпочтительно продолжают до тех пор, пока проводимость экстракта аллергена при 3-5°C не будет менее 900 мкСм/см, или менее 800 мкСм/см, или менее 700 мкСм/см, или менее 600 мкСм/см или более предпочтительно менее 500 мкСм/см. Этап удаления низкомолекулярной фракции предпочтительно продолжают до тех пор, пока проводимость экстракта аллергена при 3-5°C не будет от 200 до 1000 мкСм/см, или от 300 до 900 мкСм/см и наиболее предпочтительно от 400 до 800 мкСм/см.

Полученный в результате очищенный нативный экстракт аллергена можно фильтровать, например, с применением 0,45 и/или 0,22 мкм размеров пор.

Нативный экстракт аллергена можно применять в получении фармацевтической композиции или вакцины для целей стандартизации, диагностики, синтеза и вакцинации.

Способ может в дальнейшем включать дальнейший этап обработки, где неаллергенные соединения, адгезирующие к белку аллергена, удаляют с применением средств, которые разрушают электростатические, гидрофобные или других физические силы, которые ответственны за адгезию неаллергенных соединений к белкам. Средства для разрушения электростатических, гидрофобных или других физических сил можно выбирать из группы химических средств, включающей кислотные и щелочные материалы, в том числе анионо- и катионообменные материалы, соли и электрического тока. Кислотные и щелочные химические средства можно применять в количестве, вызывающем превышение изоэлектрической точки белков. Экстракт аллергена, полученный в результате дальнейшего этапа обработки далее по тексту именуется депигментированным экстрактом аллергена.

Дальнейший этап обработки может включать

g) подкисление нативного экстракта аллергена, удаление молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и нейтрализацию pH для получения депигментированного экстракта аллергена.

Дальнейший этап обработки предпочтительно включает мягкую кислотную обработку. При мягкой кислотной обработке pH аллергенных белков может быть понижен до менее чем pH 3, например, значение pH от 2,0 до 2,5. РН аллергенных белков может быть от 2,0 до 6,0. Заявителем экспериментально установлено, что оптимум pH для отсоединения неаллергенных соединений, адгезирующих к аллергенным белкам, является pH от 2,0 до 2,1. Значение pH ниже 2,0 приводит к неполноте белкового профиля депигментированного экстракта аллергена, а недостаточно низкий pH, например, выше 3,0, приводит к неполному удалению неаллергенных соединений в полученном в результате депигментированном экстракте аллергена.

РН нативного экстракта аллергена можно снижать с применением подходящей кислоты, например HCl. Подкисленный экстракт можно хранить при низких pH 1-60 минут, предпочтительно 5-30 минут, более предпочтительно 10-20 минут и наиболее предпочтительно около 15 минут. Молекулы, имеющие молекулярный размер менее 3,5 кДа можно удалять на этапах удаления низкомолекулярной фракции.

После дальнейшего этапа обработки, полученный в результате депигментированный экстракт можно собирать и pH экстракта аллергена можно нейтрализовать с применением подходящих щелочей, например NaOH. РН могут доводить до значения, где избегается осаждение белков, например, выше pH 7,0, предпочтительно pH от 7,0 до 8,0, более предпочтительно pH от 7,0 до 7,5 и наиболее предпочтительно pH от 7,3 до 7,4. Дальнейший этап обработки может включать:

g) подкисление нативного экстракта аллергена до pH 2-2,1 и сохранение подкисленного экстракта в течение 5-30 минут, затем подвержение экстракта этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и доведение pH до 7,3-7,4 для получения депигментированного экстракта аллергена.

Дальнейший этап обработки может включать подкисление нативного экстракта аллергена до pH от 2,0 до 4,0.

Средства для разрушения электростатических сил могут включать электрический ток в форме электрофореза. Неаллергенные соединения могут иметь молекулярную массу менее 8000 Да, 5000 Да и предпочтительно менее чем 3500 и могут включать флавоноиды и/или их гликозиды.

Этап удаления низкомолекулярной фракции может быть этапом диализа, где экстракт диализируют против диализата, такого как очищенная вода или буфер. Этап удаления низкомолекулярной фракции можно осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно проводят холодным от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. Этап удаления низкомолекулярной фракции можно осуществлять в течение 12-24 часов, где растворитель, или в случае диализа, диализат, регулярно меняют для поддержания реакции.

Полученный в результате депигментированный экстракт аллергена можно фильтровать, например, с применением 0,45 мкм и/или 0,22 мкм размера пор, и могут замораживать или лиофилизировать для хранения.

Каждый экстракт, полученный с применением способа настоящего изобретения можно в дальнейшем обрабатывать. Способ может дополнительно включать этап полимеризации, включающий:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с альдегидом и

i) удаление молекул с молекулярным размером менее 100 кДа.

Альдегидом может быть любой подходящий альдегид, к примеру, глутаральдегид или формальдегид.

Этап полимеризации может включать:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с глутаральдегидом или формальдегидом,

i) подвержение экстракта этапу удаления молекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 100 кДа и

j) проведение этапа i) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид для получения полимеризованного экстракта аллергена или депигментированного полимеризованного экстракта аллергена.

Если экстракт полимеризации лиофилизируют, его могут восстанавливать в буфере, например, 0,01М PBS/0,15M NaCl, до конечной концентрации 0,1-500 мг/мл, предпочтительно 1-100 мг/мл и наиболее предпочтительно 10-50 мг/мл.

Реакцию полимеризации предпочтительно осуществляют до завершения, так что полосы белка 100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,013). >100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,02) >100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,018) >100 Отсутствует >100

Пример 3 — Экстракт аллергена пыльцы (Olea euopaea)

Пыльцу Olea euopaea, собранную с дерева после опыления, обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапами В-С способа.

Конечный продукт включает лиофилизированный депигментированный экстракт, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Таблица 4
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 3 (Olea europaea)
Olea europaea Выход(%) ELISA инт.µ (IgE) µ 50% инг. Содержание белка мкг белк/мг. UV-видимый 1 мг/мл Активность НЕР-л/мг
Нативный 3,64 0,009 321,6 1,577 (270 нм) 257,2
Депигментированный рН2 74,0 0,009 307,4 1,302 274(нм) 196,8
Депигментированный pH3 62,0 0,007 324,2 1,365 (274 нм) 204,8
Депигментированный рН4 70,7 0,008 368,7 1,291 (274 нм) 221,3
Депигментированный рН5 78,2 0,009 348,8 1,374 (274 нм) 257,7
Депигментированный рН6 80,2 0,010 402,1 1,348 (274 нм) 247,0

Пример 4 — Экстракт аллергена пыльцы (Parietaria judaica)

Пыльцу Parietaria judaica, собранную с дерева после опыления, обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапом В способа.

Конечный продукт включает лиофилизированный депигментированный экстракт, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Таблица 5
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 5 (Parietaria judaica)
Parietaria judaica Выход (%) ELISA инг. (IgE) мкг 50% инг. Лаури-Биурет мкг белк./мг UV-видимый 1 мг/мл Активность НЕР-л/мг
Нативный 4,07 0,031 219,7 3,073 (266 нм) 1,492(342 нм) 281
Депигментированный рН2 82,7 0,018 197,9 2,680 (270 нм) 1,393(342 нм) 397
Депигментированный рН3 79,5 0,015 228,6 2,943 (270 нм) 1,519 (346 нм) 430
Депигментированный рН4 83,5 0,017 213,5 2,769 (270 нм) 1,463 (348 нм) 534
Депигментированный рН5 79,9 0,012 245,4 2,658 (272 нм) 1,504 (344 нм) 1007
Депигментированный рН6 87,3 0,001 216,2 2,763 (272 нм) 1,539 (344 нм) 954

Пример 5 — Экстракт аллергена клеща (Dermatophasoides pteronyssinus)

Экстракт аллергена клеща получали после этапа В способа от взрослой культуры Dermatophagoides pteronyssinus.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Содержание основных аллергенов

Содержание основных аллергенов ((Der p 1 и Der p 2)) измеряли с помощью устанавливаемых в помещении комплектов Biotech Indoor Biotech kits для D. pteronyssinus. Моноклональные антитела IgG к Der p 1 или Der p 2 наносили (1:1000 из флакона, подготовленного в дозе 1 мг/мл для Der p 1 и 2 мг/мл для Der p 2) в лунки полистирольного микропланшета (Nunc Maxisorp). Стандартную кривую получали с применением выраженного количественно и стандартизированного универсального стандарта (суб-стандартизированного против WHO/IUIS D. pteronyssinus контроля, содержащего 2500 нг/мл Der p 1 до 1000 нг/мл Der p 2): разведения контрольной кривой 250-0,49 нг/мл для Der р. 1 и 100-0,2 нг/мл для Der р. 2. Образцы клещей обычно разбавляли в два раза. После промывания пластины, добавляли 100 мкл разбавленного стандарта аллергенов и образцы и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. После промывания пластины, 100 мкл вторичного антитела (моноклональное биотинилированное антитело к IgG) разбавленного 1/1000 добавляли и выдерживали в течение 1 часа при комнатной температуре. После промывания пластины, 100 мкл стрептавидин-пероксидазы, разбавленной 1/1000 добавляли и инкубировали 30 минут при комнатной температуре. Наконец, пластину промывали, проявляли добавлением 100 мкл 1 мМ ABTS в 70 цитрат-фосфатном буфере, pH 4,2 содержащем 1/1000 разбавление 30% H2O2 (т.е. 10 мкл/10 мл ABTS) и считывали, когда оптическая плотность при 405 нм достигает 2,0-2,4.

Пример 6- Экстракт аллергена тростника (Phragmites communis)

Пыльцу Phragmites communis, собранную с дерева после опыления, обезжиривают холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере, три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапами B-D способа.

На этапе D способ полимеризации состоит из добавления глутаральдегида с использованием параметра 0,015 мл глутаральдегида/мл экстракта.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта Phragmites, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

а. Растворимый в воде продукт

b. Отсутствие неполимеризованных аллергенов/белков с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется в виде полос с помощью SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях)

c. Отсутствие полос IgE-распознавания с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью иммуноблоттинга в невосстанавливающих условиях)

d. Отсутствие полимеризованных молекул с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью гель-хроматографии с HPLC)

e. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

f. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов ELISA IgE ингибирования с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Гранулу, включающую депигментированный/полимеризованный остаток, использовали качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 7а и 7b).

Таблица 7а
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 6 (Phragmites communis)
(Phragmites communis) Выход (остаток) ELISA инг. (IgE) 50% ингибирование (мкг) (% утрата активности) Содержание белка мкг белк./мг Fluram мкг АСА/мг (% уменьшения аминогрупп) UV-видимый 1 мг/мл Поглощение (нм)
Нативный 0,486 240,7 145 1,074 (272 нм)
Депигментированный 0,847 321,5 103 0,844 (274 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 80,7 (2,74) 2,051 329,8 3,6 (95,7) 1,891 (266 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,0045), 80,7 (3,1) 1,217 381,4 6,3 (95,7) 1,897 (268 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,015) 64,8 (4,75) 5,080 306,2 1,6 (98,9) 2,206 (268 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 25,2 (2,5 5,035 306,1 24,3 (83,2) 1,749 (266 нм)
Таблица 7b
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 6 (Phragmites communis)
Phragmites communis SDS-PAGE (кДа) Иммуноблот (кДа) Молекулярный размер (кДа)
Нативный 10-100 10-100 10-100
Депигментированный 10-100 10-100 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,0045), >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,015) >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,02) >100 Отсутствует >100

Пример 7 Экстракт аллергена эпителия кошки

Кошачью шерсть обезжиривали холодным ацетоном в отношении 1:40 (вес/объем) после пяти минут перемешивания каждый час в течение 7 часов при 3-5°C. Обезжиривание продолжали в течение по меньшей мере 16 часов без перемешивания. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и сохраняли чешуйки. Кошачью шерсть снова обезжиривали таким же количеством ацетона в течение 1 часа при комнатной температуре и процедуру повторяли два раза. Полученные хлопья собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 15 часов, пока материал полностью не высыхал и весь ацетон не был удален.

На этапе В высушенный обезжиренный материал чешуек кожи, полученный из кошачьей шерсти взвешивали и экстрагировали в PBS 0,01 M/NaCl 0,15М в соотношении 1:40 в течение 4 часов при 3-5°C и с магнитным перемешиванием.

Депигментированный полимеризованный экстракт аллергена кошки получали в соответствии с этапами B-D способа.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта кошачьего эпителия, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

а. Растворимый в воде продукт

b. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

c. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов IgE REINA конкуренции с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

d. Определение моноклональных антител к основному аллергену Fel d 1.

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Содержание основного аллергена

Содержание основного аллергена Fel d 1 измеряют с помощью устанавливаемого в помещении комплекта Biotech (Indoor Biotech kit) Наносят IgGl моноклональное антитело к Amb а 1 (1:1000 из флакона подготовленного в дозе 1 мг/мл). Стандартную кривую получали с применением Универсального Стандарта Аллергена, который содержит 1000 нм Fel d 1/мл. Вторичное антитело представляет собой биотинилированное моноклональное антитело к IgGl, возникающее в ответ на действие аллергена кошачьего эпителия. Нативные и депигментированные образцы разбавляли до 250 нг/мл. Содержание основных аллергенов рассчитывали для полимеризованных экстрактов с применением этих значений.

Гранулу, включающую депигментированный/ полимеризованный остаток, использовали в качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных и депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 8).

Таблица 8
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 7 (Эпителий кошки)
Эпителий кошки Выход (%) ELISA инг.(IgE) 50% ингибирования (мкг) (% утраты активности) Содержание белка мкг белк./мг Fluram мкг АСА/мг (% уменьшения аминогрупп) UV-видимый 1 мг/мл Поглощение (нм) Активность (HEP л/мг) Fel d 1 мкг/мл
Нативный 10,3 0,029 154 14 0,396 (280 нм) 1488 42
Депигментированный 85,9 0,044 195 10,4 0,428 (280 нм) 1478 42
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 96,2 0,192 171 1,5 (89%) 0,701 (268 нм) 28 8
Депигментированный-полимеризованный (0,013). 92,9 0,373 183 1,3 (90,6%) 0,698 (268 нм) 23 7
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 90,6 0,494 169 1,2 (91,5%) 0,769 (268 нм) 17 2

Пример 8 Экстракт аллергена Phleum pratense

Пыльцу Phleum pratense, собранную с растения после опыления обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт арахиса собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт аллергена Phleum pratense получали в соответствии с этапами B-D способа.

На этапе D способ полимеризации состоит из добавления глутаральдегида с применением коэффициента 0,09 мл глутаральдегида/мл экстракта.

Конечный продукт содержит лиофилизированный депигментированный экстракт Phleum pratense, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Отсутствие неполимеризованных аллергенов/белков с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется в виде полос с помощью SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях)

c. Отсутствие полос IgE-распознавания с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью иммуноблоттинга в невосстанавливающих условиях)

d. Отсутствие полимеризованных молекул с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью гель-хроматографии с HPLC)

e. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

f. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов ELISA IgE ингибирования с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Содержание основного аллергена

Содержание основного аллергена РЫ p 5 измеряли с помощью устанавливаемого в помещении комплекта Biotech (Indoor Biotech kit) Наносили моноклональное антитело IgGl к Phl p 5 (1:1000 из флакона подготовленного в дозе 2 мг/мл). Стандартную кривую получали с применением рекомбинантного Phi p 5а. Вторичное антитело представляет собой биотинилированное моноклональное антитело к IgGl, возникающее в ответ на действие аллергена Phleum pratense. Нативные и депигментированные образцы разбавляют до 250 нг/мл. Содержание основных аллергенов рассчитывают для полимеризованных экстрактов с использованием этих значений.

Гранулу, включающую депигментированный/полимеризованный остаток, использовали в качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных и депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 9).

Таблица 9
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 8 (Phleum pratense)
Phleum pratense Выход (%) ELISA инг. (IgE) 50% ингибирование (мкг) (% утраты активности) Содержание белка мкг белк./мг Активность (HEP л/мг) SDS-PAGEкДа Иммуноблот Молекуляр размер. кДа
Нативный 8,42 0,089 409,9 904,5 10-100 1478 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 45,0 00,341 446,0 35,3 10-100 28 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 98,0 0,305 464,3 13,2 >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,013), 19,85 0,429 420,5 19,3 >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 57,5 1,274 1234,8 14,4 >100 Отсутствует >100

Ссылки на литературу

1. Vickery, В., Burks, W. Immunotherapy in the treatment of food allergy: focus oral tolerance. Curr. Opin. Allergy Clin. Irnmunol. 2009; 9: 364-370.

2. King, R.M., Knibb, R.C., and Hourihane, J.O.B. Impact of peanut allergy on quality of life, stress and anxiety in the family. Allergy 2009; 64: 461-468.

3. Enrique, E., Pineda, F., Malek, Т., Bartra, J., Basagana, M, Telia, R., Castello, J.V., Alonso, R., de Mateo, J.A., Cerda-Trias, Т., San Miguel-Moncin Mdel, M., Monzon, S., Garcia, M., Palacios, R., Cistero-Bahima, A. Sublingual immunotherapy for hazelnut food allergy: a randomized, double-blind, placebo-controlled study with a standardized hazelnut extract. J. Allergy Clin. Immunol. 2005; 116 (5): 1073-9.

4. Fernandez-Rivas, M., Garrido Fernandez, S., Nadal, J.A., Diaz de Durana, M.D., Garcia, B.E., Gonzalez-Mancebo, E., Martin, S., Barber, D., Rico, P., Tabar, A.I. Randomized double-blind, placebo-controlled trial of sublingual immunotherapy with a Pru p 3 quantified peach extract. Allergy. 2009; 64 (6): 876-83.

5. Hofmann, A.M., Scurlock, A.M., Jones, S.M., Palmer, K.P., Lokhnygina, Y., Steele, P.H., Kamilaris, J., Burks, A.W. Safety of a peanut oral immunotherapy protocol in children with peanut allergy. J. Allergy Clin. Immunol. 2009 May 26.

6. Jones, S.M., Pons, L., Roberts, J.L., Scurlock, A.M., Perry, T.T., Kulis, M., Shreffler, W.G., Steele, P., Henry, K.A., Adair, M., Francis, J.M., Durham, S., Vickery, B.P., Zhong, X., Burks, A.W. Clinical efficacy and immune regulation with peanut oral immunotherapy. J. Allergy. Clin. Immunol. 2009 Aug; 124 (2): 292-300, 300.

7. Clark, A.T., Islam, S., King, Y. Successful oral tolerance induction in severe peanut allergy. Allergy 2009 Aug; 64 (8): 1218-20.

8. Wallace DV. Pet dander and perennial allergic rhinitis: therapeutic options. Allergy Asthma Proc. 2009 Nov-Dec; 30 (6):573-83.

9. Ling M, Long AA Pet dander and diffwult-to-control asthma: Therapeutic options. Allergy Asthma Proc. 2010 Sep; 31(5):385-91.

10. Gronlund H, Saarne T, Gafvelin G, van Hage M. The major cat allergen, Fel d 1, in diagnosis and therapy. Int Arch Allergy Immunol. 2010;151(4):265-74. Epub 2009 Oct 22. Review.

Ссылки на веб-сайты

1 Allergen nomenclature. International Union of Immunological Societies Allergen Nomenclature Sub-Committee. List last update 21 of July 2009.

1. Способ получения экстракта аллергена, включающий:
a) контакт исходного материала, включающего аллерген, с жидким экстракционным средством для получения смеси, содержащей липиды, растворенные в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей остаток исходного материала, включающего аллергены и белки,
b) подвержение смеси первому этапу разделения для выделения остатка исходного материала,
c) контакт остатка исходного материала со средством экстракции аллергенов с получением смеси аллергенов, растворенной в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей неаллергенный остаток,
d) подвержение смеси второму этапу разделения для выделения аллергенов, растворенных в жидкой фазе, с получением сырого экстракта аллергена,
e) подвержение сырого экстракта аллергена этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа, и
f) проведение этапа е) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C для получения очищенного нативного экстракта аллергена,
g) подкисление нативного экстракта аллергена до pH от 2 до 4,0 и сохранение подкисленного экстракта в течение 5-30 минут, затем подвержение экстракта этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и доведение pH до 7,0 -8,0 с получением депигментированного экстракта аллергена,
h) контакт депигментированного экстракта аллергена с глутаральдегидом или формальдегидом,
i) подвержение депигментированного экстракта аллергена этапу удаления молекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 100 кДа и
j) проведение этапа i) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид, что определяется УФ (UV) или видимым сканированием, для получения депигментированного полимеризованного экстракта аллергена.

2. Способ по п. 1, где этап удаления низкомолекулярной фракции продолжают до тех пор, пока проводимость не будет менее 500 мкСм/см при 3-5°C.

3. Способ по п. 1, где нативный экстракт аллергена подкисляют до pH от 2 до 2,1.

4. Способ по п. 1, где нативный экстракт аллергена подкисляют до pH от 2,0 до 3,0.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где альдегид добавляют к экстракту со скоростью добавления от 0,001 до 0,5 мл в минуту.

6. Способ по любому из пп. 1-4, где этап удаления молекулярной фракции продолжают до тех пор, пока проводимость не будет от 50 до 200 мкСм/см при 3-5°C.

7. Способ по любому из пп. 1-4, где этапы удаления низкомолекулярной фракции е) или g) включают этап ультрафильтрации, этап диафильтрации, этап диализа или фильтрования.

8. Депигментированный полимеризованный экстракт аллергена, получаемый согласно способу по любому из пп. 1-7.

9. Экстракт аллергена по п. 8, где исходный материал выбран из пищевых аллергенов, переносимых по воздуху аллергенов, грибов, аллергенов клещей, эпителиальных аллергенов и аллергенов насекомых.

10. Экстракт аллергена по п. 9, где пищевой аллерген представляет собой арахис.

11. Экстракт аллергена по п. 9, где переносимый по воздуху аллерген представляет собой пыльцу.

12. Экстракт аллергена по п. 9, где клещи представляют собой пылевые клещи.

13. Экстракт аллергена по п. 9, где эпителиальные аллергены представляют собой шерсть животных или перхоть животных.

14. Экстракт аллергена по п. 9, где грибы представляют собой плесень.

15. Экстракт аллергена по п. 9, где аллергены насекомых выбраны из аллергена таракана, аллергена блох, яда пчелы и яда осы.

16. Экстракт аллергена по п. 11, где пыльца выбрана из древесной пыльцы, пыльцы травы и пыльцы зерновых.

17. Экстракт аллергена по п. 16, где пыльца травы представляет собой пыльцу сорных трав.

18. Экстракт аллергена по п. 13, где шерсть животных представляет собой кошачью шерсть или собачью шерсть, перхоть животных представляет собой кошачью перхоть или собачью перхоть.

19. Экстракт аллергена по п. 11, где пыльца представляет собой пыльцу Olea europaea, пыльцу Parietaria judaica, пыльцу Phragmites communis и пыльцу Phleum pratense.

20. Экстракт аллергена по п. 9, где клещи представляют собой Dermatophagoides pteronyssinus.

21. Экстракт аллергена по любому из пп. 8-20 для применения в лечении аллергии.

22. Экстракт аллергена по любому из пп. 8-10 для применения в лечении аллергии на арахис.

23. Фармацевтическая композиция для лечения аллергии, включающая экстракт аллергена по любому из пп. 8-20.

24. Фармацевтическая композиция по п. 23, дополнительно включающая одно или более чем одно вспомогательное вещество, разбавитель, консервант или их смесь.

25. Вакцина для лечения аллергии, включающая экстракт аллергена по любому из пп. 8-20.

26. Вакцина по п. 25, дополнительно включающая одно или более чем одно вспомогательное вещество, разбавитель, консервант или их смесь.

Invitro-тест Polycheck Allergie NF

Этот новый invitro-тест для определения аллерген-специальных IgE в сыворотки крови основан на принципе иммоно-анализа с аллергенами нанесённых на мембрану и при применение биотинилированных моноклональных антител к IgE собаки. Во время инкубирования с сывороткой, присоединяются аллерген-специальные IgE-молекулы на соответствующие аллергены. В конце при промывки определяют биотинулированные анитела присоединённые IgE и реагируют во время следующей инкубации с стрептавидин-конъюгат-щелочной фосфатазой. После промывки и добавления субстрата (5-бром-4-хлор-3-индолил фосфата и нитроголубого тетразолия) образуется за счёт активности фосфатазы цветной осадок. Количество осадка прямо пропорционально концентрации специального IgE в исследуемой сывороткe.

Преимуществo метода — это определение 20 аллергенов за один раз с минимальным количеством 0,25 мл сыворотки, индивидуальная стадартная кривая и высокая чувствительность к высокой концентрации аллергенов, которые в виде тонких линий нанесeнны на мембрану.

Инструкция

Находящиеся в наборе реагенты

Все не открытые реагенты при правильном хранение (2-8°C) стабильны до истечения срока годности.

  • Polycheck Allergie кассеты (24 кассеты): На каждую мембрану нанесенно 20 аллергенов и 5 стандартов.
  • Стартовый раствор (1 баночка, 7 мл, готов к применению), буферный раствор белков
  • Антитела (1 баночка, 7 мл, готов к применению): биотинилированныe моноклональные антитела к IgE собаки в растворе белка.
  • Стрептавидин-конъюгат (1 баночка, 7 мл, готов к применению): cтрептавидин-конъюгат с щелочной фосфатазой.
  • Раствор субстрата (1 баночка, 7 мл, готов к применению): 5-бром-4-хлор-3-индолил фосфата и нитроголубого тетразолия как субстрат для щелочной фосфатазы.
  • Промывающий буфер (1 пакетик): сухой порошок из буфера + добавки для промывки мембраны.

Необходимые материалы, не входящие в набор

  • Пипетка (200 — 1000 мкл)
  • Шейкер
  • Персональный компьютор, сканер и специальная программа (имеется у производителя)

Меры предосторожности

  • Реагенты из разных партий, не следует смешивать.
  • Растворы не пипетироать ртом.
  • Все рекомендованные меры предосторожности, при работе с потенциально инфекционным материалом, должны быть учтены.

Порядок проведения теста

  • Реактивы при выполнение теста должны иметь комнатную температуру.
  • Тест проводить без перерыва.
  • Не допускать высыхание мембраны во время теста!
  • Пипетировать реактивы в зазор между мембраной и углублением кассеты.
  1. Мембрану смочить промывочным буфером и отстучать на бумажную салфетку.
  2. Внести на мембрану 250 мкл стартового раствора и 5 мин. инкубировать. Отстучать осторожно на бумажной салфетке.
  3. Внести на мембрану 200 мкл сыворотки и 60 мин. инкубировать при комнатной температуре и при постоянном покачивание 1000 rpm или 30 rpm на шейке. Остатки удалить, мембрану промыть 3 раза 1 мл промывочным буфером, отстучать осторожно на бумажной салфетке.
  4. Внести на мембрану 250 мкл промывочного буфера и 5 мин. инкубировать при комнатной температуре и при постоянном покачивание 1000 rpm или 30 rpm на шейке. Мембрану как в пункте 3 промыть.
  5. Внести 250 мкл антитела в углубление кассеты. 90 мин. инкубировать при комнатной температуре и при постоянном покачивание 1000 rpm или 30 rpm на шейке. Мембрану как в пункте 3 промыть.
  6. Внести 250 мкл стрептавидин-конъюгат в углубление кассеты. 20 мин. инкубировать при комнатной температуре и при постоянном покачивание 1000 rpm или 30 rpm на шейке. Мембрану как в пункте 3 промыть.
  7. Внести 250 мкл раствора субстрата в углубление кассеты. В темноте (например, накрыть светонепропускаемой бумагой или крышкой) 20 мин. инкубировать при комнатной температуре и при постоянном покачивание 1000 rpm или 30 rpm на шейке. Мембрану как в пункте 3 промыть.

(Общее время 200 минут)

  1. Мембрана должна хорошо просохнуть. Оценка результатов описанна ниже.

Оценка результатов

Компьютор, сканер и специальная программа необходима для оценки результатов:

Кассету положить на сканер, сосканировать и задокументировать. Программа анализирует и производит расчёт данных. Программа вычисляет при сравнение с калибровочной кривой количество аллерген-специальных IgE для каждого аллергена (см. таб.1)

T аб.1 Пять классов аллергических реакций

IgE-концентрация (kU/l) класс

Панель аллергенов

Polycheck- ветеринарная панель содержит 15 аллергенов и 5 аллерген-смесей:

Аллергия на домашнюю пыль, клещей и тараканов

На домашнюю пыль как на источник аллергенов впервые указал Cooke в 1922 г. Последующие исследования в разных климатических зонах подтвердили эти наблюдения. Безусловно, домашняя пыль содержит потенциальные аллергены, которые могут вызвать атоническую сенсибилизацию. В составе домашней пыли — 40-50% органических веществ и 50-60% неорганического материала (кварц, глина, известь). Она содержит вещества растительного и животного происхождения, а также синтетические материалы.

Сравнительный анализ, проведенный Voorhorst, показал, что соотношение активности аллергена клещей дерматофагоидес и перхоти человека составляет 80 : 14.

Определение активности аллергенов домашней пыли показало, что клещи занимают первое место, далее следуют грибы и эпидермис животных. Примечательно, что последний указанный аллерген выявляют даже в том случае, когда в квартире не содержат домашних животных. С развитием метода моноклональных антител к широко распространенным аллергенам появилась перспектива детального качественного анализа.

Клинические проявления: аэропланктон действует как ингаляционные аллергены, вызывая ринит, приступ бронхиальной астмы. Помимо поражения дыхательных путей, возможна и контактная сенсибилизация.

Диагностика: при проведении кожных проб необходимо использовать коммерческие экстракты.

Терапия: исключение контакта с аллергеном — важное лечебное (или профилактическое) мероприятие. Согласно данным Storm van Leeuwen, несомненную терапевтическую ценность имеет изоляция больного в помещении со специально созданными климатическими условиями.

Клещи. Еще в 20-х годах Dekker и Storm van Leeuwen высказали предположение, что присутствующие в домашней пыли клещи могут вызывать аллергические заболевания. Лишь спустя много лет Voorhorst удалось определить вид клеща, которому принадлежит главная роль в сенсибилизации организма. Им оказался дерматофагоидес (0,3 мм в длину). Самка откладывает 20-40 яиц, срок развития приблизительно 6 дней, чему благоприятствует влажный и теплый воздух (20-30 °С).

Клиника и эпидемиология. В домашней пыли обнаружено до 35 видов клещей; 1 г может содержать несколько тысяч особей. Выявлена зависимость между степенью влажности воздуха в помещениях и количеством клещей. Интересно, что их содержание в 1 г домашней пыли значительно меньше в жилищах, расположенных в высокогорных районах (выше 1500 м над уровнем моря). Исследования, проведенные в разных странах, показали, что клещи распространены повсеместно, исключение составляют местности с арктическим и альпийским климатом. На Европейском континенте встречаются Acarus siro, Euroglyphus magni и Glycophagus domesticus.

Иммунология. Исследования на клещах D. pteronissinus показали, что они содержат аллерген, который, очевидно, по своему антигенному потенциалу сравним с аллергенами, вызывающими поллинозы. Анализ 100 образцов домашней пыли позволил выявить положительную корреляцию между активностью аллергена (оценка по результатам внутрикожной пробы) и содержанием клещей.

В сельском хозяйстве особую опасность представляют так называемые амбарные клещи. Их обнаруживают в значительном количестве в хлевах, амбарах, сараях и идентифицируют в основном как семейства Tyrophagus, Glycophagus, Acarus, Euroglyphus и Lepidoglyphus. Встречаются они и в домашней пыли. Довольно часто у населения регистрируют сенсибилизацию этими видами, а также Dermatophagoides.

Выявлен широкий спектр антигенов и аллергенов, minor-аллергены демонстрируют перекрестную реакцию (одна линия) с дерматофагоидес. В целом ряде исследований было установлено, что около 60% лиц, страдающих аллергией к домашней пыли, проявляют положительную реакцию как на экстракт клещей, так и на экстракт домашней пыли.

Наряду с реагинами у больных в ряде случаев были выявлены преципитины, ответственные за проявления бронхоспазма.

Меры по уменьшению влажности воздуха (ниже 60%) часто приводят к положительным результатам. Было показано, что клещи гибнут при температуре свыше 60 °С (в течение 10 мин) или ниже 18 °С (24 ч), поэтому, проводя санитарную обработку и дезинфекцию, можно устранить контакт больного с данным аллергеном.

Аллергия на тараканов. В последние годы установлено, что контакт с тараканами вызывает аллергию, в частности бронхиальную астму у 30-60% больных, проживающих в неблагоприятных условиях. Результаты PACT были положительными в 25-35% случаев. В 6% случаев они действуют как основные аллергены. Активностью аллергена обладают 5 фракций (major-аллергены), которые определяются во внутренностях или хитиновом панцире и идентифицируются как видоспецифические.

Панель клещевых аллергенов № 1 IgE (клещ-дерматофаг перинный, клещ-дерматофаг мучной, dermatophagoides microceras, lepidoglyphus destructor, tyrophagu

Специфические антитела иммуноглобулины Е (IgE) к панели аллергенов, результат СУММАРНЫЙ, без определения конкретного аллергена. Иммуноглобулины Е отвечают за быстрый ответ на контакт с аллергеном. Если организм не имел ранее контакта с данным аллергеном, тест будет отрицательным. Назначается для диагностики IgE-зависимой аллергии.

— Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак.
— Чистую воду можно пить в обычном режиме.

— Цена указана без учета стоимости взятия биоматериала. При единовременном заказе нескольких услуг, услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.

— Запись заранее не требуется, если у Вас остались какие-либо вопросы воспользуйтесь функцией «Обратный звонок», и мы Вам перезвоним

Симптомы аллергии на пылевых клещей

Домашние пылевые клещи представляют собой крошечные существа, около четверти миллиметра длиной. Они живут, питаясь, в основном, отмершими чешуйками кожи человека и процветают во влажной среде. Клещей можно найти в постельных принадлежностях, коврах, мягкой мебели и одежде. У людей с аллергией на пылевого клеща часто не сами паразиты, а белки в их помете вызывают аллергию. Каждый клещ производит около 20 разных таких белков, обильно обсеменяя ими окружающую среду домашних условий. Даже после смерти клеща, его труп еще долго время будет досаждать человеку своими продуктами распада.

В этой статье мы расскажем подробнее об этих паразитах, а также остановимся на симптомах, которые они вызывают у человека. Также опишем основные методы борьбы с этой мелкой нечистью.

Подробнее о пылевых клещах

Клещ домашней пыли является космополитическим видом, который живет в человеческом жилище. Паразиты питаются органическим детритом, таким как мертвые клетки человеческой кожи, и обильно размножаются в тепле домашнего жилища.

Клещи являются частой причиной астмы и аллергических симптомов у людей и домашних животных во всем мире. Кишка клеща содержит сильнодействующие пищеварительные ферменты, в частности, протеазу, которая сохраняется в их фекалиях и является основным стимулятором аллергических реакций. Также экзоскелет клеща может способствовать проявлению аллергии.

Европейский — Dermatophagoides pteronyssinus и американский — Dermatophagoides farinae виды, представляют собой два разных живых существа, однако их распространение не обязательно ограничивается Европой или Северной Америкой — их полно на любых континентах, а назвали их так, потому что нашли впервые, соответственно, в Европе и Америке. Третий вид Euroglyphus maynei также широко распространен. В отличие от чесоточных клещей или демодекоза, пылевые клещи не зарываются под кожу и не паразитируют.

Несмотря на их мелкие размеры, люди с хорошим зрением могут разглядеть этих паразитов. Однако из-за их очень небольшого размера и полупрозрачных тел, клещи едва видны невооруженным глазом.

Типичный пылевой клещ измеряется 0,2-0,3 мм в длину. Для точной идентификации необходимо по крайней мере, 10-кратное увеличение. Тело пылевого клеща имеет исчерченную кутикулу.

Средняя продолжительность жизненного цикла для самцов клеща составляет от 10 до 19 дней. Взрослая самка откладывает от 60 до 100 яиц, но только в течение последних 5 недель ее жизни. Общая продолжительность жизни пылевого клеща равна 10 неделям, за которую клещ произведет приблизительно 2000 фекальных частиц и еще большее число частично переваренных ферментных продуктов, покрытых пылью.

В качестве места обитания, пылевые клещи предпочитают спальни и кухни. Паразиты хорошо выживают в матрасах, коврах, мебели и постельных принадлежностях. Их количество при достаточном обсеменении представляет 100-500 клещей в 1 г пыли. Хотя паразиты предпочитают более влажные условия, даже в сухом микроклимате, клещи прекрасно выживают и легко размножаются в коврах и постельном белье (особенно в подушках), беря влагу от контакта с телом.

Симптомы аллергии на пылевых клещей

Аллергия на пылевого клеща мало отличается от таковой на другие аллергены. Симптомы указанного расстройства могут быть классифицированы как легкая, умеренная или тяжелая форма.

Легкие симптомы аллергии

Легкие симптомы аллергии могут включать в себя:

  • Высыпание на коже.
  • Локализованный зуд.
  • Перегруженность сознания.

Легкие аллергические реакции не распространяются на другие части тела, они, как правило, возникают на мете контакта с аллергеном. В случае с пылевыми клещами, это чаще поверхности, соприкасающиеся с постельным бельем — щеки, шея и неприкрытые области.

Умеренные симптомы аллергии

Умеренные аллергические реакции могут включать в себя симптомы, которые распространяются на другие части тела, в том числе:

  • Широко распространенный зуд.
  • Затрудненное дыхание.
  • Тяжелые симптомы аллергии (анафилаксия).

Анафилаксия является редким, опасным для жизни состоянием, при котором аварийная реакция организма на аллерген является внезапной и влияет на весь организм. Симптомы аллергии могут прогрессировать в течение нескольких минут, вследствие чего может развиться тяжелая форма.

Тяжелая форма аллергии

  • Зуд в области глаз или по всему лицу.
  • Разная степень отеков, которые могут сделать дыхание и глотание затруднительным.
  • Боль в животе.
  • Колики.
  • Рвота.
  • Диарея.
  • Спутанность сознания или головокружение, вплоть до потери сознания.

Избавление от клеща и борьба с аллергией

Как правило, все аллергики знают о своей проблеме, и за плечами у них множество длительных посещений самых разных врачей. Хочется сразу отметить, что самостоятельное применение препаратов против аллергии может показать весьма неустойчивый и даже обратный результат, поэтому все лекарства этого ряда должны применяться исключительно по назначению врача. Не так давно вошедшее в моду средство Сталораль тому не исключение.

В его основу входит аллергию стимулирующая пыльца березы, которая призвана организовать появление специфических антител против аллергических белков пылевого клеща.

Однако реакция у некоторых людей может быть только хуже. Еще раз стоит подчеркнуть, что все средства против аллергии, включая Сталораль, нужно применять только по рекомендации врача.

А вот пытаться избавиться от пылевых клещей можно вполне самостоятельными путями. Ниже представляем наиболее полный перечень действий, которые необходимо выполнять до тех пор, пока аллергические реакции на пылевого клеща не иссякнут. Разделим борьбу на домашнюю и ту, которую можно проводить на рабочем месте, ведь пылевые клещи могут обитать и там.

Как избавиться от клеща в домашних условиях

Большинство усилий на борьбу с пылевыми клещами должны быть направлены на места в доме, где жильцы проводят большую часть своего времени, и нагрузка по количеству клеща может быть максимальна, то есть спальни и гостиные.

Хорошим средством от пылевых клещей являются антиаллергические барьеры, которые должны охватывать все матрасы, одеяла и подушки. Барьеры должны быть воздухопроницаемыми и полностью охватывать предмет. К таким барьерам относят специальные чехлы, пропитанные средствами, уничтожающими пылевых клещей, что не позволяет им размножаться. Однако перед покупкой подобных средств желательно изучить их инструкцию и почитать отзывы в интернете.

Необходима тщательная стирка всех постельных принадлежностей, которые не заключены в барьерные покрытия, например, простыни и одеяла, каждую неделю. Стирка при 60 градусах по Цельсию или выше должна убить клещей. Клещевой аллерген не растворяется в воде, так что стирка при более низких температурах будет смывать аллерген медленно и с временным эффектом, а клещи будут выживать и производить еще больше проблем через некоторое время.

  • Аллергические дети не должны спать в нижнем ярусе двухъярусной кровати, где аллерген может упасть на них.
  • Если возможно, следует удалить все ковровые покрытия в спальне, а также напольные ткани. Требуется регулярная обработка с пылесосом высокой фильтрации.
  • Нужно подчеркнуть, что необходимо обязательно удалить все ковровые покрытия с бетонных полов. Такие полы ловят влагу, позволяя пылевым клещам и спорам плесени процветать. Уплотнение пола пароизоляцией, а затем покрытие моющейся поверхностью, например, винилом или линолеумом, заметно снизит концентрацию популяций пылевого клеща.
  • Есть определенные виды напольных покрытий, предназначенных для предотвращения появления аллергена. Информацию об этом можно узнать из дополнительных источников.
  • Там, где ковры не могут быть удалены, регулярная обработка с пылесосом высокой фильтрации просто необходима. Также можно использовать паровую высокотемпературную обработку, что очень эффективно уничтожает клещей.
  • В продаже существуют средства, которые могут быть распылены на коврах, чтобы убить клещей. Они являются эффективными, но следует использовать с осторожностью, если жильцы страдают от респираторных симптомов. Также их не рекомендуется применять в тех областях, где играют дети — на коврах, на мягких игрушках или подушках.
  • Для работы лучше использовать фильтры в пылесосе высокой очистки, которые способны удерживать высокую долю мельчайших частиц (НЕРА-фильтры S-класса или аналогичные).
  • Горизонтальные поверхности необходимо протирать ежедневно, особенно внимание нужно уделять вершинам ламбрекенов, подоконникам, верхних частям шкафов и т.д.).
  • Лучше использовать легкие стирающиеся хлопковые занавески и сократить количество ненужной мягкой мебели.
  • Пылесосить также необходимо все поверхности мягкой мебели, по крайней мере два раза в неделю.

Моющиеся мягкие игрушки должны быть простираны или протерты с частотой не менее двух раз в неделю и при той же температуре, что и постельное белье. В качестве альтернативы, если игрушку нельзя стирать при 60 градусах, нужно помещать ее в полиэтиленовый пакет и в морозильную камеру, в течение, по крайней мере, 12 часов, раз в месяц, а затем стирать при рекомендуемой температуре.

Нужно стремиться к снижению влажности за счет увеличения вентиляции. Чаще проветривать помещение, использовать вытяжные окна в ванных комнатах и кухнях. При необходимости можно использовать осушитель воздуха, чтобы поддерживать влажность в помещении ниже 50%, но более чем 30%.

На рабочем месте:

  • Вентиляция чрезвычайно важна. Будут ли это окна, вентиляционные отверстия или система кондиционирования воздуха— неважно. Нужно убедиться, что в наличии есть чистый воздух внутри рабочего пространства.
  • Если функционирует принудительная система отопления вентиляции и кондиционирования воздуха (HVAC), нужно следить за тем, чтобы она своевременно обслуживалась, поскольку без необходимой чистки там скапливается много пыли с клещами.
  • Если вентиляция ограничена, можно использовать эффективный очиститель воздуха, чтобы помочь устранить и уменьшить аллергены, которые продуцируют пылевые клещи.
  • Ежедневная уборка напольных покрытий и протирка мебели.
  • Нужно взять под свой контроль свою личную настольной рабочую среду, держа ее в лаконичном, чистом состоянии, проводя влажную уборку не менее одного раза в день.
  • Верхняя одежда в зимний период должна храниться в отведенных для этого местах.

Помимо всего прочего, при наличии аллергии на пылевого клеща, нужно пить побольше воды в течение дня и быть уверенным в том, что ведется правильный прием предписанных профилактических лекарств, которые назначил врач.

Диагностика аллергии

№ лаб. Наименование исследований Срок, дни Цена, руб
Скрининг
40.63. Фадиатоп (ImmunoCAP) 1 2035,00
40.64. Фадиатоп детский (ImmunoCAP) 1 2175,00
40.65. Триптаза (Phadia) 5 2585,00
Смести аллергенов (общий результат по смеси аллергенов)
40.59. Смесь микроскопических грибов скрининг: Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus terreus, Aspergillus flavus IgE 1 1300,00
40.60. Смесь микроскопических грибов скрининг: Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus terreus, Aspergillus flavus IgG 2 1430,00
40.1. Смесь микроскопических грибов ( Penicillium notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Candida albicans, Alternaria alternata, Helminthosp 1 1300,00
40.9. Смесь микроскопических грибов ( Penicillium notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, C 1 1430,00
40.5. Смесь грибковых аллергенов (Penicillium notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternata) IgE 1 1300,00
40.6. Смесь грибковых аллергенов (Penicillium notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternata) IgG 2 1430,00
40.3. Смесь бытовых аллергенов (домашняя пыль (Hollister-Stier), Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Blatella germanica (таракан-прусс 1 1300,00
40.11. Смесь бытовых аллергенов (домашняя пыль (Hollister-Stier), Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Blatella germanica (таракан-прус 1 1430,00
40.7. Смесь перьев птиц: гуся, курицы, утки, индейки IgE 1 1300,00
40.8. Смесь перьев птиц: гуся, курицы, утки, индейки IgG 2 1430,00
40.2. Смесь аллергенов пищи (яичный белок, молоко, треска, пшеница, арахис, соя) (IgE) 1 1300,00
40.10. Смесь аллергенов пищи (яичный белок, молоко, треска, пшеница, арахис, соя) IgG 2 1430,00
40.19. Смесь пищевых продуктов №1: помидор, дрожжи, чеснок, лук, сельдерей IgE 1 1300,00
40.20. Смесь пищевых продуктов №1: помидор, дрожжи, чеснок, лук, сельдерей IgG 2 1430,00
40.23. Смесь пищевых продуктов №2: фундук, американский орех, апельсин, яблоко, какао IgE 1 1300,00
40.24. Смесь пищевых продуктов №2: фундук, американский орех, апельсин, яблоко, какао IgG 2 1430,00
40.25. Смесь пищевых продуктов №3: миндаль, киви, дыня, банан, виноград IgE 1 1300,00
40.26. Смесь пищевых продуктов №3: миндаль, киви, дыня, банан, виноград IgG 2 1430,00
40.27. Смесь пищевых продуктов №4: свинина, говядина, яичный желток, курица, индейка IgE 1 1300,00
40.28. Смесь пищевых продуктов №4: свинина, говядина, яичный желток, курица, индейка IgG 2 1430,00
40.29. Смесь пищевых продуктов №5: горох, фасоль, морковь, картофель IgE 1 1300,00
40.30. Смесь пищевых продуктов №5: горох, фасоль, морковь, картофель IgG 2 1430,00
40.31. Смесь пищевых продуктов №6: помидор, шпинат, капуста, красный перец IgE 1 1300,00
40.32. Смесь пищевых продуктов №6: помидор, шпинат, капуста, красный перец IgG 2 1430,00
40.37. Смесь пищевых продуктов №7: морковь, картофель, шпинат, огурец IgE 1 1300,00
40.38. Смесь пищевых продуктов №7: морковь, картофель, шпинат, огурец IgG 2 1430,00
40.45. Смесь мясных продуктов №1: свинина, говядина, курятина, индюшатина IgE 1 1300,00
40.46. Смесь мясных продуктов №1: свинина, говядина, курятина, индюшатина IgG 2 1430,00
40.57. Смесь мясных продуктов №2: свинина, говядина, курица IgE 1 1300,00
40.58. Смесь мясных продуктов №2 свинина, говядина, курица IgG 2 1430,00
40.61. Смесь рыбная: треска, сельдь, макрель, камбала IgE 1 1300,00
40.62. Смесь рыбная: треска, сельдь, макрель, камбала IgG 2 1430,00
40.15. Смесь морепродуктов: треска, креветка, синяя мидия, тунец, лосось IgE 1 1300,00
40.16. Смесь морепродуктов: треска, креветка, синяя мидия, тунец, лосось IgG 2 1430,00
40.13. Смесь ореховая №1: арахис, фундук, американский орех, миндаль, кокосовый орех IgE 1 1300,00
40.14. Смесь ореховая №1: арахис, фундук, американский орех, миндаль, кокосовый орех IgG 2 1430,00
40.43. Смесь ореховая №2: орех пекан, кешью, фисташки, грецкий орех IgE 1 1300,00
40.44. Смесь ореховая №2: орех пекан, кешью, фисташки, грецкий орех IgG 2 1430,00
40.33. Смесь фруктовая №1: апельсин, яблоко, банан, персик IgE 1 1300,00
40.34. Смесь фруктовая №1: апельсин, яблоко, банан, персик IgG 2 1430,00
40.35. Смесь фруктовая №2: яблоко, банан, груша, персик IgE 1 1300,00
40.36. Смесь фруктовая №2: яблоко, банан, груша, персикIgG 2 1430,00
40.41. Смесь фруктовая №3: киви, дыня, банан, персик, ананас IgE 1 1300,00
40.42. Смесь фруктовая №3: киви, дыня, банан, персик, ананас IgG 2 1430,00
40.49. Смесь фруктовая №4: киви, манго, банан, авокадо, папайя IgE 1 1300,00
40.50. Смесь фруктовая №4: киви, манго, банан, авокадо, папайя IgG 2 1430,00
40.47. Смесь цитрусовых: апельсин, лимон, грейпфрут, мандарин IgE 1 1300,00
40.48. Смесь цитрусовых: апельсин, лимон, грейпфрут, мандарин IgG 2 1430,00
40.51. Смесь фруктово-ягодная: яблоко, груша, персик, вишня, слива IgE 1 1300,00
40.52. Смесь фруктово-ягодная: яблоко, груша, персик, вишня, слива IgG 2 1430,00
40.17. Смесь злаковых №1: пшеница, овес, кукуруза, кунжутное семя, гречиха IgE 1 1300,00
40.18 Смесь злаковых №1: пшеница, овес, кукуруза, кунжутное семя, гречиха IgG 2 1430,00
40.39. Смесь злаковых №2: пшеница, рожь, ячмень, рис IgE 1 1300,00
40.40. Смесь злаковых №2: пшеница, рожь, ячмень, рис IgG 2 1430,00
40.53. Смесь приправ №1: тмин, мускатный орех, кардамон, гвоздика IgE 1 1300,00
40.54. Смесь приправ №1: тмин, мускатный орех, кардамон, гвоздика IgG 2 1430,00
40.55. Смесь приправ №2: базилик, семя фенхеля, имбирь, анис IgE 1 1300,00
40.56. Смесь приправ №2: базилик, семя фенхеля, имбирь, анис IgG 2 1430,00
Панели аллергенов ( комплексы с индивидуальным результатом по каждому аллергену)
Бытовые аллергены
40.201. Бытовые аллергены в квартире IgE 1 5360,00
40.202. Бытовые аллергены в доме IgE 1 8040,00
42.1. Бытовая аллергия 1 1340,00
40.203. Грибковые аллергены IgE 1 8040,00
40.204. Грибковые аллергены IgG 2 9640,00
40.205. Плесень в помещении IgE 1 2680,00
40.206. Плесень в помещении IgG 2 3220,00
Респираторные аллергены
40.187. Респираторные аллергены IgE 1 14740,00
Пищевые аллергены
Молочные продукты, яйца
40.99. Молочные продукты и яйца IgE 1 3350,00
40.100. Молоко IgE 1 2010,00
Мясо
40.101. Мясные продукты расширенная панель IgE 1 4020,00
40.102. Мясные продукты №1IgE 1 2680,00
40.103. Мясные продукты №2 IgE 1 2010,00
40.105. Мясные продукты №3 IgE 1 2010,00
40.106. Мясные продукты №3 IgG 2 2410,00
Злаковые,бобовые
40.107. Злаковые IgE 1 6660,00
40.108. Злаковые IgG 2 8000,00
40.109. Бобовые IgE 1 4690,00
40.110. Бобовые IgG 2 5620,00
Морепродукты
40.111. Морская рыба IgE 1 7370,00
40.112. Морская рыба IgG 2 8840,00
40.113. Морепродукты IgE 1 4690,00
40.114. Морепродукты IgG 2 5620,00
40.115. Морепродукты расширенная панель IgE 1 16080,00
40.116. Морепродукты расширенная панель IgG 2 19270,00
42.5. Рыбный день 1 2680,00
Фрукты, ягоды
40.117. Фруктово-ягодная панель №1 IgE 1 6700,00
40.118. Фруктово-ягодная панель №1 IgG 2 8030,00
40.119. Фруктово-ягодная панель №2 IgE 1 4020,00
40.120. Фруктово-ягодная панель №2 IgG 2 4820,00
40.121. Ягоды IgE 1 2680,00
40.122. Ягоды IgG 2 3220,00
40.123. Цитрусовые IgE 1 3350,00
40.124. Цитрусовые IgG 2 4020,00
40.125. Фруктово-ягодная панель расширенная IgE 1 19430,00
40.126. Фруктово-ягодная панель расширенная Ig G 1 23280,00
40.163. Фруктовый салат IgE 1 4020,00
40.164. Фруктовый салат IgG 2 4820,00
42.2. Фруктовый конфитюр 1 1340,00
Овощи
40.127. Овощная панель №1 IgE 1 4690,00
40.128. Овощная панель №1 IgG 2 5620,00
40.129. Овощная панель №2 IgE 1 4690,00
40.130. Овощная панель №2 IgG 2 5620,00
40.131. Овощная панель расширенная IgE 1 12060,00
40.132. Овощная панель расширенная IgG 2 14450,00
40.161. Свежий салат IgE 1 7420,00
40.162. Свежий салат IgG 2 8840,00
Зелень, приправы
40.133. Зелень IgE 1 3400,00
40.134. Зелень IgG 2 4020,00
40.135. Приправы № 1 IgE 1 6030,00
40.136. Приправы № 1 IgG 2 7230,00
40.137. Приправы № 2 IgE 1 5360,00
40.138. Приправы № 2 IgG 2 6430,00
40.139. Приправы № 3 IgE 1 6700,00
40.140. Приправы № 3 IgG 2 8030,00
42.3. Восточный аромат 1 2680,00
42.4. Специи к мясу 1 2010,00
Орехи
40.141. Орехи IgE 1 7270,00
40.142. Орехи IgG 2 8630,00
Пищевые аллергены Микст
40.149. Пищевой Микст №4 IgE 1 13300,00
40.150. Пищевой Микст №5 IgG 2 15050,00
40.143. Пищевой микст №1 IgE 1 4020,00
40.145. Пищевой микст №2 IgE 1 2680,00
40.146. Пищевой микст №2 IgG 2 3220,00
40.147. Пищевой микст №3 IgE 1 3350,00
40.148. Пищевой микст №3 IgG 2 4020,00
40.157. Фруктовый кекс IgE 1 8040,00
40.158. Фруктовый кекс IgG 2 9640,00
40.159. Фруктовый коктейль IgE 1 6750,00
40.160. Фруктовый коктейль IgG 2 8030,00
Кухни мира
40.151. Мексика IgE 1 6030,00
40.152. Мексика IgG 2 7230,00
40.153. Италия IgE 1 8760,00
40.154. Сардиния IgG 2 10440,00
40.155. Испания IgE 1 6700,00
40.156. Испания IgG 2 8030,00
Травы
40.171. Травы №1 расширенная панель IgE 1 10050,00
40.172. Травы №1 расширенная панель IgG 2 12050,00
40.173. Травы №2 (период цветения май-июнь) IgE 1 4020,00
40.174. Травы №2 (период цветения май-июнь) IgG 2 4820,00
40.175. Травы №3 (период цветения июнь-июль) IgE 1 7370,00
40.176. Травы №3 (период цветения июнь-июль) IgG 2 8840,00
40.177. Травы №4 (период цветения июль-август) IgE 1 6700,00
40.178. Травы №4 (период цветения июль-август) IgG 2 8030,00
40.179. Злаковые травы (период цветения июнь-июль) IgE 1 3350,00
40.180. Злаковые травы (период цветения июнь-июль) IgG 2 4020,00
Деревья
40.181. Деревья №1 расширенная панель (период цветения апрель-август) I IgE 1 8710,00
40.182. Деревья №1 расширенная панель (период цветения апрель-август) IgG 2 10440,00
40.183. Деревья №2 (период цветения конец марта-конец апреля) IgE 1 3350,00
40.184. Деревья №2 (период цветения конец марта-конец апреля) IgG 2 4020,00
40.185. Деревья №3 (период цветения конец апреля-конец мая) IgE 1 4690,00
40.186. Деревья №3 (период цветения конец апреля-конец мая) IgG 2 5620,00
Животные
40.193. Пушные животные расширенная панель IgE 1 4020,00
40.194. Пушные домашние животные IgE 1 2010,00
40.195. Эпидермальные аллергены расширенная панель IgE 1 10050,00
Яды насекомых
40.191. Яды насекомых IgE 1 2680,00
40.192. Яды насекомых IgG 2 3220,00
Астма/ ринит,экзема,целиакия
40.196. Астма и ринит у взрослых IgE 1 5360,00
40.197. Астма и ринит у детей IgE 1 5360,00
40.198. Экзематозный дерматит IgE 1 5360,00
40.199. Целиакия IgE 1 3350,00
40.200. Целиакия IgG 2 4020,00
Лекарственные средства
40.165. Местные анестетики IgE (Phadia, ИФА) (ультракаин (артикаин), оксибупрокаин (инокаин), лидокаин, бупивакаин (маркаин), прокаин (новокаин), мепивакаин ( 8 4025,00
40.166. Хирургическая панель №1 IgE 5 4470,00
40.167. Хирургическая панель №2 IgE (Phadia, ИФА) 5 8275,00
40.168. Антисептические и антибактериальные средства IgE 5 5810,00
40.169. Антибиотики IgE 5 4470,00
40.170. Инсулин IgE 1 2010,00
Индивидуальные аллергены
Клещевые аллергены
41.23. Клещ домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus IgE 1 705,00
41.25. Клещ домашней пыли Dermatophagoides farinae IgE 1 705,00
41.26. Клещ домашней пыли Dermatophagoides farinae IgG 2 845,00
41.27. Клещ домашней пыли Dermatophagoides microceras IgE 1 705,00
41.28. Клещ домашней пыли Dermatophagoides microceras IgG 2 845,00
41.29. Амбарный клещ Acarus siro IgE 1 705,00
41.30. Амбарный клещ Acarus siro IgG 2 845,00
41.31. Амбарный клещ Lepidoglyphus destructor IgE 1 705,00
41.32. Амбарный клещ Lepidoglyphus destructor IgG 2 845,00
41.33. Амбарный клещ Tyrophagus putrescentiae IgE 1 705,00
41.34. Амбарный клещ Tyrophagus putrescentiae IgG 2 845,00
41.35. Амбарный клещ Glycyphagus domesticus IgE 1 705,00
41.36. Амбарный клещ Glycyphagus domesticus IgG 2 845,00
41.37. Клещ домашней пыли Euroglyphus maynei IgE 1 705,00
41.38. Клещ домашней пыли Euroglyphus maynei IgG 2 845,00
41.39. Клещ домашней пыли Blomia Tropicalis IgE 1 705,00
41.40. Клещ домашней пыли Blomia Tropicalis IgG 2 845,00
Аллергены животных
41.41. Перхоть кошки IgE 1 705,00
41.42. Перхоть кошки IgG 2 845,00
41.43. Перхоть лошади IgE 1 705,00
41.44. Перхоть лошади IgG 2 845,00
41.45. Перхоть собаки IgE 1 705,00
41.46. Перхоть собаки IgG 2 845,00
41.47. Эпителий морской свинки IgE 1 705,00
41.49. Помет голубя IgE 1 705,00
41.50. Помет голубя IgG 2 845,00
41.51. Перо гусиное IgE 1 705,00
41.52. Перо гусиное IgG 2 845,00
41.53. Эпителий мыши IgE 1 705,00
41.54. Эпителий мыши IgG 2 845,00
41.55. Помет волнистого попугайчика IgE 1 705,00
41.56. Помет волнистого попугайчика IgG 2 845,00
41.57. Перо волнистого попугайчика IgE 1 705,00
41.58. Перо волнистого попугайчика IgG 2 845,00
41.59. Эпителий козы IgE 1 705,00
41.60. Эпителий козы IgG 2 845,00
41.61. Эпителий овцы IgE 1 705,00
41.62. Эпителий кролика IgE 1 705,00
41.64. Эпителий кролика IgG 2 845,00
41.65. Эпителий хомяка IgE 1 705,00
41.66. Эпителий хомяка IgG 2 845,00
41.67. Перо попугая IgE 1 705,00
41.68. Перо попугая IgG 2 845,00
41.69. Перо курицы IgE 1 705,00
41.70. Перо курицы IgG 2 845,00
41.78. Перо утки IgE 1 705,00
41.80. Перо утки IgG 2 845,00
41.24. Перо индейки IgE 1 705,00
41.72. Перо индейки IgG 2 845,00
Молоко, молочные продукты
41.71. Молоко IgE 1 705,00
41.73. Молоко кипяченое IgE 1 705,00
41.74. Молоко кипяченое IgG 2 845,00
40.323. Казеин IgE 1 705,00
41.75. Сыворотка коровьего молока IgE 1 705,00
41.77. Козье молоко IgE 1 705,00
41.79. Сыр с плесенью IgE 1 705,00
41.81. Сыр Чеддер IgE 1 705,00
41.82. Сыр Чеддер IgG 2 845,00
Яйцо
41.83. Яйцо IgE 1 705,00
41.84. Яйцо IgG 2 845,00
41.85. Яичный жеток IgE 1 705,00
41.86. Яичный жеток IgG 2 845,00
41.87. Яичный белок IgE 1 705,00
41.88. Яичный белок IgG 2 845,00
Злаковые, бобовые
41.89. Гречиха IgE 1 705,00
41.90. Гречиха IgG 2 845,00
41.91. Рис IgE 1 705,00
41.92. Рис IgG 2 845,00
41.93. Просо посевное IgE 1 705,00
41.94. Просо посевное IgG 2 845,00
41.95. Пшеница IgE 1 705,00
41.96. Пшеница IgG 2 845,00
41.97. Овес IgE 1 705,00
41.98. Овес IgG 2 845,00
41.99. Ячмень IgE 1 705,00
41.100. Ячмень IgG 2 845,00
41.101. Рожь IgE 1 705,00
41.102. Рожь IgG 2 845,00
41.103. Соя IgE 1 705,00
41.104. СояIgG 2 845,00
41.105. Глютен IgE 1 705,00
41.106. Глютен IgG 2 845,00
41.107. Ежовник IgE 1 665,00
41.108. Ежовник IgG 2 810,00
41.109. Кукуруза IgE 1 705,00
41.110. Кукуруза IgG 2 845,00
41.111. Чечевица IgE 1 705,00
41.112. Чечевица IgG 2 845,00
41.113. Горох IgE 1 705,00
41.114. Горох IgG 2 845,00
41.115. Какао IgE 1 705,00
41.116. Какао IgG 2 845,00
41.117. Нут IgE 1 705,00
41.118. Нут IgG 2 845,00
41.119. Солод IgE 1 705,00
41.120. Солод IgG 2 845,00
41.121. Фасоль IgE 1 705,00
41.122. Фасоль IgG 2 845,00
Морепродукты
41.145. Скумбрия IgE 1 705,00
41.146. Скумбрия IgG 2 845,00
41.123. Скумбрия японская IgE 1 705,00
41.124. Скумбрия японская IgG 2 845,00
41.125. Омар IgE 1 705,00
41.126. Омар IgG 2 845,00
41.127. Сардина дальневосточная IgE 1 705,00
41.128. Сардина дальневосточная IgG 2 845,00
41.161. Сардина европейская IgE 1 705,00
41.162. Сардина европейская IgG 2 845,00
41.129. Тилапия IgE 1 705,00
41.130. Тилапия IgG 2 845,00
41.131. Синяя мидия IgE 1 705,00
41.132. Синяя мидия IgG 2 845,00
41.133. Осьминог IgE 1 705,00
41.134 Осьминог IgG 2 845,00
41.135. Ставрида IgE 1 705,00
41.136. Ставрида IgG 2 845,00
41.137. Краб IgE 1 705,00
41.138. Краб IgG 2 845,00
41.139. Креветка IgE 1 705,00
41.140. Креветка IgG 2 845,00
41.141. Форель IgE 1 705,00
41.142. Форель IgG 2 845,00
41.143. Сельдь IgE 1 705,00
41.144. Сельдь IgG 2 845,00
41.147. Моллюск IgE 1 705,00
41.148. Моллюск IgG 2 845,00
41.149. Речной угорь IgE 1 705,00
41.150. Речной угорь IgG 2 845,00
41.151. Кальмар IgE 1 705,00
41.152. Кальмар IgG 2 845,00
41.153. Камбала IgE 1 705,00
41.154. Камбала IgG 2 845,00
41.155. Треска IgE 1 705,00
41.156. Треска IgG 2 845,00
41.157. Устрица IgE 1 705,00
41.158. Устрица IgG 2 845,00
41.159. Рыба хек IgE 1 705,00
41.160. Рыба хек IgG 2 845,00
41.163. Морской язык IgE 1 705,00
41.164. Морской язык IgG 2 845,00
41.165. Тунец IgE 1 705,00
41.166. Тунец IgG 2 845,00
41.167. Лосось IgE 1 705,00
41.168. Лосось IgG 2 845,00
41.169. Пикша IgE 1 705,00
41.170. Пикша IgG 2 845,00
Фрукты и ягоды
41.173. Абрикос IgE 1 705,00
41.174. Абрикос IgG 2 845,00
41.175. Авокадо IgE 1 705,00
41.176. Авокадо IgG 2 845,00
41.179. Ананас IgE 1 705,00
41.180. Ананас IgG 2 845,00
41.181. Арбуз IgE 1 705,00
41.182. Арбуз IgG 2 845,00
41.183. Апельсин IgE 1 705,00
41.184. Апельсин IgG 2 845,00
41.185. Банан IgE 1 705,00
41.186. Банан IgG 2 845,00
41.187. Вишня IgE 1 705,00
41.188. Вишня IgG 2 845,00
41.189. Виноград IgE 1 705,00
41.190. Виноград IgG 2 845,00
41.191. Груша IgE 1 705,00
41.192. Груша IgG 2 845,00
41.193. Дыня IgE 1 705,00
41.194. Дыня IgG 2 845,00
41.195. Ежевика IgE 1 705,00
41.196. Ежевика IgG 2 845,00
41.197. Клубника IgE 1 705,00
41.198. Клубника IgG 2 845,00
41.199. Грейпфрут IgE 1 705,00
41.200. Грейпфрут IgG 2 845,00
41.201. Киви IgE 1 705,00
41.202. Киви IgG 2 845,00
41.203. Слива IgE 1 705,00
41.204. Слива IgG 2 845,00
41.205. Инжир IgE 1 705,00
41.206. Инжир IgG 2 845,00
41.207. Красная смородина IgE 1 705,00
41.208. Красная смородина IgG 2 845,00
41.209. Лайм IgE 1 705,00
41.210. Лайм IgG 2 845,00
41.211. Кокос IgE 1 705,00
41.212. Кокос IgG 2 845,00
41.213. Лимон IgE 1 705,00
41.214. Лимон IgG 2 845,00
41.215. Мандарин IgE 1 705,00
41.216. Мандарин IgG 2 845,00
41.217. Манго IgE 1 705,00
41.218. Манго IgG 2 845,00
41.219. Малина IgE 1 705,00
41.220. Малина IgG 2 845,00
41.221. Маслина IgE 1 705,00
41.222. Маслина IgG 2 845,00
41.223. Персик IgE 1 705,00
41.224. Персик IgG 2 845,00
41.225. Папайя IgE 1 705,00
41.226. Папайя IgG 2 845,00
41.227. Финик IgE 1 705,00
41.228. Финик IgG 2 845,00
41.229. Хурма IgE 1 705,00
41.230. Хурма IgG 2 845,00
41.231. Яблоко IgE 1 705,00
41.232. Яблоко IgG 2 845,00
Овощи
41.233. Капуста IgE 1 705,00
41.234. Капуста IgG 2 845,00
41.235. Брюссельская капуста IgE 1 705,00
41.236. Брюссельская капуста IgG 2 845,00
41.237. Перец IgE 1 705,00
41.238. Перец IgG 2 845,00
41.239. Сахарная свекла IgE 1 705,00
41.240. Сахарная свекла IgG 2 845,00
41.241. Огурец IgE 1 705,00
41.242. Огурец IgG 2 845,00
41.243. Брокколи IgE 1 705,00
41.244. Брокколи IgG 2 845,00
41.245. Спаржа IgE 1 705,00
41.246. Спаржа IgG 2 845,00
41.247. Зеленый перец IgE 1 705,00
41.248. Зеленый перец IgG 2 845,00
41.249. Баклажан IgE 1 705,00
41.250. Баклажан IgG 2 845,00
41.251. Цветная капуста IgE 1 705,00
41.252. Цветная капуста IgG 2 845,00
41.253. Свекла IgE 1 705,00
41.254. Свекла IgG 2 845,00
41.255. Чеснок IgE 1 705,00
41.256. Чеснок IgG 2 845,00
41.257. Тыква IgE 1 705,00
41.258. Тыква IgG 2 845,00
41.259. Морковь IgE 1 705,00
41.260. Морковь IgG 2 845,00
41.261. Картофель IgE 1 705,00
41.262. Картофель IgG 2 845,00
41.263. Лук IgE 1 705,00
41.264. Лук IgG 2 845,00
41.265. Томат IgE 1 705,00
41.266. Томат IgG 2 845,00
Грибы
41.267. Шампиньон IgE 1 705,00
41.268. Шампиньон IgG 2 845,00
Орехи и мед
41.269. Миндаль IgE 1 705,00
41.270. Миндаль IgG 2 845,00
41.271. Орех Пекан IgE 1 705,00
41.272. Орех Пекан IgG 2 845,00
41.273. Кедровый орех IgE 1 705,00
41.274. Кедровый орех IgG 2 845,00
41.275. Мускатный орех (кожура) IgE 1 705,00
41.276. Мускатный орех (кожура) IgG 2 845,00
41.277. Орех Кешью IgE 1 705,00
41.278. Орех Кешью IgG 2 845,00
41.279. Грецкий орех IgE 1 1300,00
41.280. Грецкий орех IgG 2 1470,00
41.281. Фисташки IgE 1 705,00
41.282. Фисташки IgG 2 845,00
41.283. Арахис IgE 1 705,00
41.284. Арахис IgG 2 845,00
41.285. Фундук IgE 1 705,00
41.286. Фундук IgG 2 845,00
41.287. Американский (Бразильский) орех IgE 1 705,00
41.288. Американский (Бразильский) орех IgG 2 845,00
41.289. Зерно кофе IgE 1 705,00
41.290. Зерно кофе IgG 2 845,00
41.291. Мёд IgE 1 705,00
41.292. Мёд IgG 2 845,00
Приправы и зелень
41.293. Анис IgE 1 705,00
41.294. Анис IgG 2 845,00
41.295. Дрожжи IgE 1 705,00
41.296. Дрожжи IgG 2 845,00
41.297. Тмин IgE 1 705,00
41.298. Тмин IgG 2 845,00
41.299. Гвоздика IgE 1 705,00
41.300. Гвоздика IgG 2 845,00
41.301. Базилик IgE 1 705,00
41.302. Базилик IgG 2 845,00
41.303. Имбирь IgE 1 705,00
41.304. Имбирь IgG 2 845,00
41.305. Карри IgE 1 705,00
41.306. Карри IgG 2 845,00
41.307. Эстрагон IgE 1 705,00
41.308. Эстрагон IgG 2 845,00
41.309. Корица IgE 1 705,00
41.310. Корица IgG 2 845,00
41.311. Укроп IgE 1 755,00
41.312. Укроп IgG 2 845,00
41.313 Майоран IgE 1 705,00
41.314. Майоран IgG 2 845,00
41.315. Тимьян IgE 1 705,00
41.316. Тимьян IgG 2 845,00
41.317. Лавровый лист IgE 1 705,00
41.318. Лавровый лист IgG 2 845,00
41.319. Чилийский перец IgE 1 705,00
41.320. Чилийский перец IgG 2 845,00
41.321. Орегано IgE 1 755,00
41.322. Орегано IgG 2 845,00
41.323. Черный перец IgE 1 705,00
41.324. Черный перец IgG 2 845,00
41.325. Лист чая IgE 1 705,00
41.326. Лист чая IgG 2 845,00
41.327. Любисток IgE 1 705,00
41.328. Любисток IgG 2 845,00
41.329. Семя тыквы IgE 1 705,00
41.330. Семя тыквы IgG 2 845,00
41.331. Семя мака IgE 1 705,00
41.332. Семя мака IgG 2 845,00
41.333. Свежий фенхель IgE 1 705,00
41.334. Свежий фенхель IgG 2 845,00
41.335. Гуаровая камедь (Е412) IgE 1 705,00
41.336. Гуаровая камедь (Е412) IgG 2 845,00
41.337. Горчица IgE 1 705,00
41.338. Горчица IgG 2 845,00
41.339. Шафран IgE 1 705,00
41.340. Шафран IgG 2 845,00
41.341. Шалфей IgE 1 705,00
41.342. Шалфей IgG 2 845,00
41.343. Салат-латук IgE 1 705,00
41.344. Салат-латук IgG 2 845,00
41.345. Хмель IgE 1 705,00
41.346. Хмель IgG 2 845,00
41.347. Кардамон IgE 1 705,00
41.348. Кардамон IgG 2 845,00
41.349. Ваниль IgE 1 705,00
41.350. Ваниль IgG 2 845,00
41.351. Шпинат IgE 1 705,00
41.352. Шпинат IgG 2 845,00
41.353. Кориандр IgE 1 705,00
41.354. Кориандр IgG 2 845,00
41.355. Семя льна IgE 1 705,00
41.356. Семя льна IgG 2 845,00
41.357. Семя фенхеля IgE 1 705,00
41.358. Семя фенхеля IgG 2 845,00
41.359. Семя шиповника IgE 1 705,00
41.360. Семя шиповника IgG 2 845,00
41.423. Семя подсолнечника IgE 1 705,00
41.361. Сельдерей IgE 1 705,00
41.362. Сельдерей IgG 2 845,00
41.363. Мята перечная IgЕ 1 755,00
41.364. Мята перечная IgG 2 845,00
41.365. Кунжут IgE 1 705,00
41.366. Кунжут IgG 2 845,00
41.369. Петрушка IgE 1 705,00
41.370. Петрушка IgG 2 845,00
Мясо
41.371. Мясо индейки IgE 1 705,00
41.372. Мясо индейки IgG 2 845,00
41.373. Баранина IgE 1 705,00
41.374. Баранина IgG 2 845,00
41.375.. Мясо кролика IgE 1 705,00
41.376 Мясо кролика IgG 2 845,00
41.377. Свинина IgE 1 705,00
41.379. Говядина IgE 1 705,00
41.381. Мясо курицы IgE 1 705,00
41.382. Мясо курицы IgG 2 845,00
Аллергены трав
41.383. Ежа сборная IgE 1 705,00
41.384. Ежа сборная IgG 2 845,00
41.385. Овсяница луговая IgE 1 705,00
41.386. Овсяница луговая IgG 2 845,00
41.387. Тимофеевка луговая IgE 1 705,00
41.388. Тимофеевка луговая IgG 2 845,00
41.389. Мятлик луговой IgE 1 705,00
41.390. Мятлик луговой IgG 2 845,00
41.465. Костер IgE 1 705,00
41.466. Костер IgG 2 845,00
41.467. Рожь посевная IgE 1 705,00
41.468. Рожь посевная IgG 2 845,00
41.469. Лисохвост луговой IgE 1 705,00
41.470. Лисохвост луговой IgG 2 845,00
41.471. Подорожник ланцетовидный IgE 1 705,00
41.472. Подорожник ланцетовидный(IgG) 2 845,00
41.473. Амброзия высокая IgE 1 705,00
41.474. Амброзия высокая IgG 2 845,00
41.475. Подсолнечник IgE 1 705,00
41.476. Подсолнечник(IgG) 2 845,00
41.477. Ромашка IgE 1 705,00
41.478. Ромашка(IgG) 2 845,00
41.479. Полынь IgE 1 705,00
41.480. Полынь IgG 2 845,00
41.481. Лебеда чечевицевидная IgE 1 705,00
41.482. Лебеда чечевицевидная IgG 2 845,00
41.483. Крапива двудомная IgE 1 705,00
41.484. Крапива двудомная IgG 2 845,00
41.485. Одуванчик IgE 1 705,00
41.486. Одуванчик IgG 2 845,00
Аллергены деревьев
41.439. Клен ясенелистый IgE 1 705,00
41.440. Клен ясенелистый IgG 2 845,00
41.441. Ольха серая IgE 1 705,00
41.442. Ольха серая IgG 2 845,00
41.443. Береза бородавчатая IgE 1 705,00
41.444. Береза бородавчатая IgG 2 845,00
41.445. Лещина IgE 1 705,00
41.446. Лещина IgG 2 845,00
41.447. Бук крупнолистный IgE 1 705,00
41.448. Бук крупнолистный IgG 2 845,00
41.449. Дуб IgE 1 705,00
41.450. Дуб IgG 2 845,00
41.451. Ива IgE 1 705,00
41.452. Ива IgG 2 845,00
41.453. Тополь IgE 1 705,00
41.454. Тополь IgG 2 845,00
41.455. Ясень американский IgE 1 705,00
41.456. Ясень американский IgG 2 845,00
41.457. Ясень высокий IgE 1 705,00
41.458. Ясень высокий IgG 2 845,00
41.459. Сосна Веймутова IgE 1 705,00
41.460. Сосна Веймутова IgG 2 845,00
41.461. Сосна IgE 1 705,00
41.462. Сосна IgG 2 845,00
41.463. Вяз толстолистный IgE 1 705,00
41.464. Вяз толстолистный IgG 2 845,00
Бытовые аллергены
41.391. Домашняя пыль (Greer Labs.Inc.) IgE 1 705,00
41.393. Домашняя пыль (Hollister-Stier Labs.)IgE 1 705,00
Яды
41.395. Яд пчелы домашней IgE 1 705,00
41.396. Яд пчелы домашнейIgG 2 845,00
41.397. Яд осы пятнистой IgE 1 705,00
41.398. Яд осы пятнистой IgG 2 845,00
41.399. Яд осы обыкновенной IgE 1 705,00
41.400. Яд осы обыкновенной IgG 2 845,00
41.401. Яд осы желтой IgE 1 705,00
41.402. Яд осы желтой IgG 2 845,00
Аллергены насекомых
41.403. Моль IgE 1 705,00
41.404. Моль IgG 2 845,00
41.405. Таракан рыжий IgE 1 705,00
41.406. Таракан рыжий IgG 2 845,00
41.407. Муравей Рихтера IgE 1 705,00
41.408. Муравей Рихтера IgG 2 845,00
41.409. Комар IgE 1 705,00
41.410. Комар IgG 2 845,00
41.411. Мотыль IgE 1 705,00
41.412. Мотыль IgG 2 845,00
41.413. Слепень IgE 1 705,00
41.414. Слепень IgG 2 845,00
41.415. Таракан американский IgE 1 705,00
41.416. Таракан американский IgG 2 845,00
41.417. Таракан Черный IgE 1 705,00
41.418. Таракан Черный IgG 2 845,00
Профессиональные аллергены
41.419. Формальдегид/формалин IgE 1 705,00
41.421. Латекс IgE 1 705,00
41.425. Хлорамин Т IgE 1 705,00
Грибковые аллергены
41.1. Helmintosporium halodes IgE 1 705,00
41.2. Helminthosporium halodes IgG 2 845,00
41.3. Penicillium notatum IgE 1 705,00
41.4. Penicillium notatum IgG 2 845,00
41.5. Cladosporium herbarum IgE 1 705,00
41.6. Cladosporium herbarum IgG 2 845,00
41.7. Aspergillus fumigatus IgE 1 705,00
41.8. Aspergillus fumigatus IgG 2 845,00
41.9. Mucor racemosus IgE 1 705,00
41.10. Mucor racemosus IgG 2 845,00
41.11. Candida albicans IgE 1 705,00
41.12. Candida albicans IgG 2 845,00
41.13. Rhizopus nigricans IgE 1 705,00
41.14. Rhizopus nigricans IgG 2 845,00
41.15. Pityrosporum orbiculare IgE 1 705,00
41.16. Pityrosporum orbiculare IgG 2 845,00
41.17. Aspergillus niger IgE 1 705,00
41.18. Aspergillus niger IgG 2 845,00
41.19. Aspergillus flavus IgE 1 705,00
41.20. Aspergillus flavus IgG 2 845,00
41.21. Aspergillus terreus IgE 1 705,00
41.22. Aspergillus terreus IgG 2 845,00
41.48. Alternaria alternata IgE 1 705,00
41.63. Alternaria alternata IgG 2 845,00
40.324. Botrytis cinerea IgE 1 705,00
Бактериальные аллергены
40.66. Стафилококковый энтеротоксин A (IgE методика) 1 705,00
40.67. Стафилококковый энтеротоксин B (IgE методика) 1 705,00
Другие аллергены
41.427. Хлопок, необработанная нить IgE 1 705,00
41.428. Хлопок, необработанная нить IgG 2 845,00
41.429. Сперма IgE 1 705,00
41.431. Корм для рыб Артемия IgE 1 705,00
41.432. Корм для рыб Артемия IgG 2 845,00
41.433. Корм для рыб Тетрамин IgE 1 705,00
41.434. Корм для рыб Тетрамин IgG 2 845,00
41.435. Корм для рыб Дафния IgE 1 705,00
41.436. Корм для рыб Дафния IgG 2 845,00
Лекарственные аллергены
41.490. Хлоргексидин IgE 1 705,00
41.491. Желатин коровий IgE 1 705,00
41.492. Пеницилин G IgE 1 705,00
41.493. Пеницилин V IgE 1 705,00
41.494. Ампициллин IgE 1 705,00
41.495. Амоксициллин IgE 1 705,00
41.496. Инсулин свиной IgE 1 705,00
41.497. Инсулин бычий IgE 1 705,00
41.498. Инсулин человеческий IgE 1 705,00
Аллергокомпоненты
Компоненты яйца
40.300. Овомукоид яйца nGal d 1 IgE 1 705,00
40.301. Овальбумин яйца nGal d 2 IgE 1 705,00
40.302. Кональбумин яйца nGal d 3 IgE 1 705,00
40.303. Лизоцим яйца nGal d 4 IgE 1 705,00
Деревья
40.304. Берёза rBet v 1 PR-10 IgE 1 2080,00
40.305. Берёза rBet v 2, rBet v 4 IgE 1 2080,00
Травы
40.306. Tимофеевка луговая rPhl p 1, rPhl p 5b IgE 1 2080,00
40.307. Tимофеевка луговая rPhl p 7, rPhl p 12 IgE 1 2080,00
40.308. Полынь nArt v 1 IgE 1 2080,00
40.309. Полынь nArt v 3 LTP IgE 1 2080,00
40.310. Амброзия nAmb a 1 IgE 1 2080,00
Микроскопические грибы
40.311. Alternaria alternata rAlt a 1 IgE 1 2080,00
Клещи
40.312. Клещ домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus nDer p 1 IgE 1 2080,00
40.313. Клещ домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus rDer p 2 IgE 1 2080,00
40.314. Тропомиозин, клещ домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus rDer p 10 IgE 1 2080,00
Животные
40.315. Кошка rFel d 1 IgE 1 2080,00
40.316. Альбумин сыворотки кошки nFel d 2 IgE 1 2080,00
40.317. Кошка rFel d 4 IgE 1 2080,00
40.318. Собака rCan f 1 IgE 1 2080,00
40.319. Собака rCan f 2 IgE 1 2080,00
40.320. Собака rCan f 5 IgE 1 2080,00
40.321. Альбумин сыворотки собаки nCan f 3 IgE 1 2080,00
40.322. Лошадь rEqu c 1 IgE 1 2080,00
Комплексы для вакцинотерапии
40.210. Аллергия на молоко 1 1340,00
40.211. Аллергия на компоненты яйца 1 3350,00
40.212. Аллергия на пыльцу березы 1 3960,00
40.213. Аллергия на тимофеевку луговую 1 3960,00
40.214. Аллергия на луговые травы 1 5930,00
40.215. Амброзия 1 3960,00
40.217. Плесень 1 3320,00
40.218. Клещи домашней пыли 1 5930,00
40.219. Аллергия на кошку 1 5930,00
40.220. Аллергия на собаку 1 7910,00
40.221. Домашние животные 1 15810,00
40.222. Экзема 1 4690,00
40.223. Ринит у детей 1 9950,00
40.224. Ринит у взрослых 1 9950,00
40.225. Компоненты вакцины (перед прививкой) 1 2010,00

АЛЛЕРГЕНЫ (Immulite)

№ лаб. Наименование исследований Срок, дни Цена, руб
Панели аллергенов скрининг (общий результат по смеси аллергенов)
24.15. Аллергены трав №2 (Immulite) (амброзия обыкновенная, полынь обыкновенная, подорожник, мари белая, зольник, солянка) (скрининг) IgE 1 1000,00
24.16. Аллергены трав №2 (Immulite) (амброзия обыкновенная, полынь обыкновенная, подорожник, мари белая, зольник, солянка) (скрининг) IgG 2 1365,00
24.21. Клещевые аллергены (Immulite) (клещ-дерматофаг перинный, клещ-дерматофаг мучной, dermatophagoides microceras, lepidoglyphus destructor, tyrophagus put 1 1060,00
24.22. Клещевые аллергены (Immulite) (клещ-дерматофаг перинный, клещ-дерматофаг мучной, dermatophagoides microceras, lepidoglyphus destructor, tyrophagus put 2 1060,00
24.1. Аллергены животных (Immulite) (эпителий- морская свинка, кролик, хомяк, крыса, мышь) (скрининг) IgE 1 1060,00
24.2. Аллергены животных (Immulite) (эпителий- морская свинка, кролик, хомяк, крыса, мышь) (скрининг) IgG 2 1060,00
24.5. Аллергены пищи — мясо (Immulite) (свинина, говядина, куриное мясо, баранина) (скрининг) IgE 1 1365,00
24.6. Аллергены пищи — мясо (Immulite) (свинина, говядина, куриное мясо, баранина) (скрининг) IgG 2 1365,00
Индивидуальные аллергены
Индивидуальные аллергены/Аллергены деревьев
25.43. Ольха (Immulite) IgE 1 580,00
25.44. Ольха (Immulite) IgG 2 610,00
25.49. Лещина обыкновенная (Immulite) IgE 1 580,00
25.50. Лещина обыкновенная (Immulite) IgG 2 610,00
25.53. Клен ясенелистный (Immulite) IgE 1 580,00
25.54. Клен ясенелистный (Immulite) IgG 2 610,00
25.57. Дуб (Immulite) IgE 1 580,00
25.58. Дуб (Immulite) IgG 2 610,00
25.61. Бук (Immulite) IgE 1 580,00
25.62. Бук (Immulite) IgG 2 610,00
Индивидуальные аллергены/Аллергены трав
25.69. Рожь культивированная (Immulite) IgE 2 580,00
25.70. Рожь культивированная (Immulite) IgG 1 610,00
25.85. Полынь обыкновенная (Immulite) IgE 2 590,00
25.86. Полынь обыкновенная (Immulite) IgG 1 610,00
25.89. Лебеда (Immulite) IgE 2 580,00
25.90. Лебеда (Immulite) IgG 1 610,00
Индивидуальные аллергены/Грибковые аллергены
25.31. Aspergillus fumigatus (Immulite) IgE 1 590,00
25.32. Aspergillus fumigatus (Immulite) IgG 2 610,00
25.33. Aspergillus niger (Immulite) IgE 1 580,00
25.34. Aspergillus niger (Immulite) IgG 2 610,00
25.35. Aspergillus nidulans (Immulite) IgE 1 580,00
25.36. Aspergillus nidulans (Immulite) IgG 2 610,00
25.39. Candida albicans (Immulite) IgE 1 590,00
25.40. Candida albicans (Immulite) IgG 2 610,00
25.93. Cladosporium herbarum (Immulite) IgE 1 590,00
25.94. Cladosporium herbarum (Immulite) IgG 2 610,00
25.95. Mucor racemosus (Immulite) IgE 1 580,00
25.96. Mucor racemosus (Immulite) IgG 2 610,00
25.99. Penicillium notatum (Immulite) IgE 1 590,00
25.100. Penicillium notatum (Immulite) IgG 2 610,00
25.101. Pityrosporum orbiculare (Immulite) IgE 1 580,00
25.102. Pityrosporum orbiculare (Immulite) IgG 2 610,00
Индивидуальные аллергены/Аллергены животных
25.119. Кролик (эпителий) (Immulite) IgE 2 580,00
25.120. Кролик (эпителий) (Immulite) IgG 1 610,00
Индивидуальные аллергены/Пищевые аллергены
Фрукты, ягоды
25.142. Грейпфрут (Immulite) IgG 2 610,00
25.141. Грейпфрут (Immulite) IgE 1 590,00
Овощи
25.143. Морковь (Immulite) IgE 1 590,00
25.144. Морковь (Immulite) IgG 2 610,00
25.149. Томат (Immulite) IgE 1 590,00
25.150. Томат (Immulite) IgG 2 610,00
Морепродукты
25.153. Лосось (Immulite) IgE 1 580,00
25.154. Лосось (Immulite) IgG 2 610,00
25.5. Треска (Immulite) IgE 1 590,00
25.6. Треска (Immulite) IgG 2 610,00
Куриное яйцо
25.159. Овальбумин (Immulite) IgE 1 580,00
25.160. Овальбумин (Immulite) IgG 2 610,00
Молоко, молочные продукты
25.161. Сыр Чеддер (Immulite) IgE 1 580,00
25.162. Сыр Чеддер (Immulite) IgG 2 610,00
Мясо
25.165. Мясо индейки (Immulite) IgE 1 580,00
25.166. Мясо индейки (Immulite) IgG 2 610,00
25.21. Говядина (Immulite) IgE 1 590,00
25.22. Говядина (Immulite) IgG 2 610,00
25.25. Баранина (Immulite) IgE 1 590,00
25.26. Баранина (Immulite) IgG 2 610,00
Злаковые, бобовые
25.11. Бобы соевые (Immulite) IgE 1 590,00
25.12. Бобы соевые (Immulite) IgG 2 610,00

Лаборатория анализов

Клиника Уро-Гинекологии

График работы:
с 9:00 до 21:00

Звоните по телефону:
(495) 229-56-46 (многоканальный)

Адрес:
ул. Дружинниковская, д.15, эт.6

М. КРАСНОПРЕСНЕНСКАЯ

ул. Дружинниковская, д.15, 6 этаж
Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
+7 (495) 229-56-46

Международный медицинский центр «Клиника Уро-Гинекологии» — 2015.

Обращаем ваше внимание на то, что данный интернет-сайт носит исключительно информационный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положениями Статьи 437(2) Гражданского кодекса Российской Федерации.

Способ получения экстракта аллергена

Владельцы патента RU 2572230:

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для лечения аллергии. Для получения экстракта аллергена выполняют контакт исходного материала с жидким экстракционным средством с получением смеси. Подвергают смесь первому этапу разделения. Выполняют контакт остатка исходного материала со средством экстракции аллергенов. Подвергают смесь второму этапу разделения с получением сырого экстракта аллергена, из которого удаляют низкомолекулярную фракцию. Повторяют, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C с получением очищенного нативного экстракта аллергена. Подкисляют до pH 2-4. Затем удаляют низкомолекулярную фракцию и доводят pH до 7-8 с получением депигментированного экстракта аллергена. Приводят в контакт с глутаральдегидом. Удаляют молекулы с молекулярным размером менее 100 кДа. Повторяют, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид. Экстракт аллергена входит в состав композиции и вакцины для лечения аллергии. Использование группы изобретений позволяет получить аллерген, обладающий сниженной способностью связывать IgE и пригодный для иммунотерапии. 4 н. и 22 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 8 пр.

Настоящее изобретение относится к способу получения очищенного экстракта аллергена и фармацевтических композиций и вакцин для применения в диагностике и лечении аллергии.

Аллергия является приобретенным расстройством гиперчувствительности иммунной системы и запускается от воздействия безвредных веществ окружающей среды, известных как аллергены. Реакция гиперчувствительности типа I является характеристикой аллергических реакций и приводит к производству чрезмерных количеств антител IgE, которые в свою очередь активируют базофилы и тучные клетки, вызывая воспалительную реакцию. Эффекты могут быть системными, такими как вазодилатация, секреция слизи, стимуляция нервов и сокращение гладких мышц, вызывая реакцию анафилаксии, или ограниченными определенной областью тела, например, дыхательной системой.

Пищевая аллергия является развивающейся крупной проблемой здравоохранения, которая затрагивает около 6% школьников и приблизительно 4% взрослых и может иметь серьезные последствия, включая фатальные анафилактические реакции (1) . Аллергия, следовательно, может иметь значительное влияние на психосоциальные аспекты качества жизни, выходя за рамки непосредственных клинических эффектов аллергического состояния пациента и форм повседневной деятельности семей (2) . В настоящее время стандарт медицинского наблюдения этого типа аллергии включает строгое избежание специфических аллергенов и лечение эпинефрином.

Аллергия на арахис является иммунным ответом по типу гиперчувствительности типа I (опосредованной IgE) на пищевые вещества из арахиса, вызывая чрезмерную реакцию иммунной системы. Американский фонд астмы и аллергии (The Asthma and Allergy Foundation of America) считает, что аллергия на арахис является наиболее частой причиной смерти, связанной с пищевыми продуктами в США и подсчитал, что она затрагивает 0,4-0,6% населения. Древесные орехи, такие как пекан, фисташки, кедровые орехи и грецкий орех, также являются распространенными ореховыми аллергенами.

К настоящему времени одиннадцать аллергенов (от Ara h 1 до Ara h 11) из арахиса были идентифицированы (Arachis hypogea) и многие из них секвенированы и клонированы. На основании номенклатуры Международного союза иммунологических обществ (МСИО) (International Union of Immunological Societies, IUIS), эти аллергены включают: Ara h 1, купин (вициллин-тип, 7S глобулин) массой 64 кДа; Ara h 2, конглютин (2S альбумин) массой 17 кДа; Ara h 3, купин (легумин-тип, 11S глобулин, глицинии) массой 60 кДа; Ara h 4, купин (легумин-тип, 11S, глицинии) массой 37 кДа; Ara h 5, профилин массой 15 кДа; Ara h 6, конглютин (2S альбумин) массой 15 кДа; Ara h 7, конглютин (2S альбумин) массой 15 кДа; Ara h 8, связанный с патогенезом белок, PR-10 массой 17 кДа; Ara h 9, неспецифический липид-переносящий белок 1 массой 9,8 кДа; Ara h 10, 16 кДа олеозин, и Ara h 11, 14 кДа олеозин.

Аллергия на кошек является чрезвычайно распространенной, встречаясь у до 25% индивидуумов с аллергиями. Аллергия на кошек является более распространенной, чем аллергия на перхоть собак, что может быть связано с активностью кошачьей шерсти и перхоти как аллергена, а так же с фактом, что кошек обычно не купают. Кошачий аллерген производится в больших количествах, в частности некастрированными котами мужского пола, поскольку аллерген частично находится под гормональным контролем. Перхоть является постоянно переносимой по воздуху, липкой и находится в общественных местах, даже там, где нет кошек. Это связано с тем, что перхоть переносится на одежде людей, у которых есть кошки, затем сбрасывается в общественных местах. Следовательно, кошачий аллерген является компонентом домашней пыли, даже в домах, где никогда не жила кошка. Размер частиц кошачьей перхоти крайне мал и вдыхается глубоко в легкие. Кошачья перхоть, следовательно, является распространенной причиной аллергической астмы, и владельцы кошек, которые имеют аллергию на кошек, являются более склонными к развитию симптомов астмы (8, 9) .

Основные кошачьи и собачьи аллергены могут находиться в экстрактах шерсти/перхоти и слюне и поэтому рассматриваются как эпителиальные аллергены. Восемь различных аллергенов были идентифицированы у кошки, и многие из них секвенированы и клонированы. На основании веб-сайта МСИО (IUIS) эти алергены включают: Fel d 1 утероглобин массой 14 и 4 кДа; Fel d 2 альбумин массой 69 кДа; Fel d 3 цистатин массой 11 кДа; Fel d 4, липокалин массой 22 кДа; Fel d 5, иммуноглобулин А массой 400 кДа; Fel d 6, иммуноглобулин М массой 800-1000 кДа; Fel d 7, белок железы фон Эбнера массой 17,5 кДа; Fel d 8 лазерин-подобный белок массой 24 кДа. Основной кошачий аллерген, Fel d 1, был подробно охарактеризован с использованием белковых и иммунохимических техник и недавно был экспрессирован как рекомбинантный аллерген. Fel d 1 представляет димер массой приблизительно 36 кДа, который состоит из двух 17 кд субъединиц (10) .

Аллергия на травы является одним из наиболее распространенных и преобладающих форм аллергии, которая влияет на людей со своими историями в течение определенного сезона. Это присутствует в воздухе поздней весной и ранними летними месяцами, что может вызвать аллергические риниты, аллергические конъюнктивиты и астму. Прямой контакт кожи с травой, от сидения на травах или движения по газону, может вызвать зуд кожи, крапивницу, атопические дерматиты. Одним из самых представительных видов является вид тимофеевка луговая Phleum pratense, выбранный в качестве лидера группы трав. Девять различных аллергенов были идентифицированы из вида Phleum pratense. На основании вебсайта Allergen 1 эти аллергены включают: Phl р 1, бета-экспанзин массой 27 кДа; Phl p 2, группу трав II/III массой 10-12 кДа; Phl p 4, белок массой 55 кДа, Phl p 5 массой 32 кДа, Phl p 6 массой 11 кДа, Phl p 7, кальций-связывающий белок массой 6 кДа, Phl p 11, Ole е 1-связанный белок массой 20 кДа, Phl p 12 профилин массой 14 кДа и Phl p 13, полигалактуроназа массой 55 кДа.

Тростник (Phragmites) является родом, принадлежащим к группе трав. Было описано несколько видов, включая P. australis, или P. communis. Как сообщается, пыльца Phragmites communis является аллергенной в разных местностях. Опыление происходит между летом и осенью, в зависимости от широты и высоты над уровнем моря.

Пять различных белков со способностью связывания IgE были идентифицированы в роде Phragmites. На основании веб-сайта Allergome эти аллергены включают: экспанзин массой 30 кДа; белок, принадлежащий к группе 4 трав массой 60 кДа; рибонуклеазу массой 35 кДа, профилин массой 14 кДа и, наконец, полигалактуроназу.

Сорные травы могут быть разделены на гомологичные группы в соответствии с их классифицированными аллергенными экстрактами. Амброзия была выбрана в качестве одного из лидеров этой группы растений. По этой причине, результаты, полученные с этим экстрактом пыльцы, можно экстраполировать на другие сорные травы 1 .

Аллергию можно лечить рядом известных способов, включая иммунотерапию аллергенами, специфическую иммунотерапию (SIT) или специфическую аллерговакцинацию (SAV), которая является одной из форм иммунотерапии аллергических расстройств, при которой пациента вакцинируют все большими дозами экстракта аллергена с целью индуцирования иммунологической толерантности. Иммунотерапия аллергенами модулирует иммунный ответ на аллерген, а не улучшение симптомов, вызванных аллергической реакцией, и может либо уменьшить потребность в лечении, уменьшить тяжесть симптомов или устранить гиперчувствительность в целом.

Хотя имеется достаточное доказательство того, что иммунотерапия аллергенами является единственным средством, за исключением избежания аллергена, для причинного лечения IgE-опосредованных аллергических расстройств, вызванных ингаляционными аллергенами и жалящими насекомыми из группы Hymenoptera, иммунотерапия экстрактами аллергенов обычно не применяется для лечения пищевой аллергии. Только два недавних исследования показали умеренную клиническую эффективность применения сублингвальной иммунотерапии у индивидуумов, сенсибилизированных на грецкий орех и персик соответственно (3, 4) .

В предыдущих исследованиях предпринимались попытки индуцировать толерантность низкой дозы, путем кормления детей незначительными следами арахиса, которые постепенно становятся все больше и больше с целью построить иммунную систему (4, 6) . Хотя данные ранних клинических испытаний показывают, что аллергия на арахис может быть смягчена применением иммунотерапии (7) , в настоящее время отсутствует подтвержденное лечение для предотвращения или излечения аллергических реакций на арахис, с единственным эффективным вариантом для атопических индивидуумов в том, чтобы избегать пищевых продуктов, которые содержат или загрязнены целыми орехами арахиса, частицами арахиса и арахисовыми маслами и обеспечение оперативного доступа к самостоятельно вводимому эпинефрину.

Одним из рисков иммунотерапии является тот, что введение аллергена сенсибилизированному пациенту может вызвать тяжелую аллергическую реакцию или анафилактический шок. Со времени ее первого применения в начале 20-го века, много усилий было предпринято для дальнейшего улучшения безопасности и эффективности иммунотерапии аллергенами. Одним из подходов является использование аллерговакцин с уменьшенной аллергенностью, но с поддержанием иммуногенности.

Патенты США 5770698 и EP 0662080 раскрывают способ удаления веществ и других материалов низкомолекулярного веса с целью очистки экстракта аллергена и увеличения окончательного содержания аллерген/белок. Способ включает разрыв электростатических, гидрофобных или других физических сил в таких условиях, чтобы отделить не вызывающие аллергию вещества от аллергически активных белков. Способ может включать мягкую кислотную обработку путем снижения pH ниже pI соответствующих белков аллергенов.

Один из разнообразных способов уменьшения аллергенности включает химическое модифицирование нативных экстрактов аллергенов с альдегидом, главным образом, формальдегидом и глутаральдегидом, для производства аллергоидов. Эта обработка альдегидом приводит к продуктам реакции (главным образом полимерам), которые потеряли часть своей аллергенности (т.е. проявляют уменьшение IgE-реактивных В-клеточных эпитопов), уменьшая аллергические побочные эффекты. В то же время, нативная иммуногенность аллергена сохраняется благодаря неизмененным Т-клеточным эпитопам. Этот путь модификации аллергена был выбран некоторыми производителями аллерговакцин для разработки коммерчески доступных продуктов, основанных на этом принципе. В целом, существует тенденция к дальнейшей очистке экстрактов аллергенов, тщательной селекции наиболее важных и клинически значимых аллергенов.

Патенты EP 1834649 и EP 1834648 раскрывают способы получения экстрактов аллергенов, однако такие способы не достаточно удаляют загрязняющие белки низкомолекулярного веса.

Существует необходимость дальнейшего улучшения безопасности и эффективности лекарственных средств для применения в иммунотерапии аллергических расстройств путем оптимизации способа очистки аллергенов, чтобы гарантировать, что загрязняющие белки низкомолекулярного веса, раздражающие вещества и токсичные компоненты устранены.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Авторы изобретения разработали промежуточный этап, предшествующий полимеризации для дальнейшего улучшения способа полимеризации и уменьшения аллергенности некоторых экстрактов, таких как клещи, пыльцевые зерна, в том числе трав, сорных трав и деревьев, эпителиальные аллергены и пищевые аллергены, предшествующий обработке глутаральдегидом.

Целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения экстрактов, содержащих аллергены и фармацевтических композиций и вакцин для лечения аллергии. Дальнейшей целью является обеспечить оптимально эффективный экстракт аллергена со сниженной IgE — связывающей способностью, но который сохраняет свою иммуногенную способность.

В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, обеспечивается способ производства экстракта аллергена, включающий:

a) исходный материал, содержащий аллерген, контактирует с жидким экстракционным агентом для получения смеси, содержащей липиды растворенные в жидкой фазе и твердой фазы, содержащей остаток исходного материала, включающего аллергены и белки.

b) смесь подвергают первому этапу разделения для выделения остатка исходного материала,

c) остаток исходного материала контактирует со средством экстракции аллергенов с получением смеси аллергенов, растворенной в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей неаллергенный остаток.

d) смесь подвергают второму этапу разделения для выделения аллергенов, растворенных в жидкой фазе, для получения сырого экстракта аллергена,

e) сырой экстракт аллергена подвергают этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и

f) проводят этап е), пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C для получения очищенного нативного экстракта аллергена.

Следующий этап обработки может включать

g) подкисление нативного экстракта аллергена, удаление молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и нейтрализация pH для получения депигментированного экстракта аллергена.

Способ может в дальнейшем включать этап полимеризации, включающий:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с альдегидом и

i) удаление молекул с молекулярным размером менее 100 кДа.

Согласно второму аспекту настоящего изобретения, обеспечивается экстракт аллергена, доступный в соответствии со способом первого аспекта настоящего изобретения.

Согласно третьему аспекту настоящего изобретения, обеспечивается очищенный экстракт аллергена для применения в качестве активного терапевтического вещества для лечения аллергии.

«Аллерген» может быть определен как молекула, способная индуцировать IgE-ответ и/или аллергическую реакцию I типа.

Термин «депигментированный», относящийся к данному документу, может быть определен как полуочищенный экстракт аллергена, полученный из нативного экстракта путем удаления посторонних веществ, включая адсорбированные пигменты, которые он может содержать.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Аллергенные экстракты настоящего изобретения могут быть произведены из любого исходного материала, содержащего природные аллергены, как известно, вызывающие IgE-опосредованную иммунную реакцию у человека. Такие аллергены могут включать пищевые аллергены (например, арахис), переносимые по воздуху аллергены (например, пыльца трав, дерева, злака и сорных трав, пылевые клещи, грибы и плесени), аллергены насекомых (например, таракана, блох, пчелиный и осиный яд) и эпителиальные аллергены (шерсть животных, перхоть животных, например перхоть кошек и собак).

Пыльцевые аллергены из деревьев, трав и сорных трав происходят из таксономической группы порядков Fagales (например, Alnus и Betula), Lamiales (например, Olea и Plantago), Poales (например, Phleum pratense), Asterales (например, Ambrosia и Artemisia), Cayophyllales (например, Chenopodium и Salsola), Rosales (например, Parietaria), Proteales (например, Platanus), и т.д. Пылевые клещи относятся к группе отрядов Astigmata (например, Dermatophagoides и Euroglyphus). Переносимые по воздуху аллергены, произведенные от плесеней и грибов, относятся к отряду Pleosporales (например, Alternarid), Capnodiales (например, Cladosporium) и т.д.

Исходный материал согласно настоящему изобретению может быть любым аллергеном, включая пищевые аллергены, арахис, все виды земляных орехов, переносимые по воздуху аллергены (например, пыльца (древесная пыльца, пыльца сорных трав, пыльца трав, пыльца зерновых), пылевые клещи, грибы, плесени)), аллергены клещей, трав, деревьев и сорных трав, эпителиальные аллергены (шерсть животных, перхоть животных, например, кошачья шерсть и перхоть и собачья шерсть и перхоть) и аллергены насекомых (например, тараканов, блох, пчелиный и осиный яд).

Предпочтительно пищевым аллергеном является арахис.Более предпочтительно, арахисовым аллергеном является Arachis hypogeal.

Аллергены, переносимые по воздуху, могут выбирать/могут выбирать из групп: Древесная пыльца (Alnus glutinosa, Betula alba, Corylus avellana, Cupressus arizonica,, Olea europea, Platanus sp), пыльца трав (Cynodon dactylon, Dactylis glomerata, Festuca elatior, Holcus lanatus, Lolium perenne, Phleum pratense, Phragmites communis, Poa pratensis), пыльца сорных трав (Ambrosia elatior, Artemisia vulgaris, Chenopodium album, Parietaria judaica, Plantago lanceolata, Salsola kali) и пыльца зерновых (Avena sativa, Hordeum vulgare, Secale cereal, Triticum aestivum, Zea mays), пылевые клещи (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), грибы и плесени (Alternaria alternate, Cladosporium herbarum, Aspergillusfumigatus)

Эпителиальные Аллергены можно выбирать из любого животного, включая кошачью шерсть и перхоть, собачью шерсть и перхоть, лошадиную шерсть и перхоть, человеческие волосы и перхоть, кроличью шерсть и перхоть и перья.

Аллергены насекомых можно выбирать из муравья, блохи, клещей (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras,

Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), таракана, осиного яда и пчелиного яда.

Предпочтительно, исходный материал выбирают из пищевых аллергенов (Arachis hypogeal), пыльцы (Alnus glutinosa, Betula alba, Corylus avellana, Cupressus arizonica,, Olea europea, Platanus sp, Cynodon dactylon, Dactylis glomerata, Festuca elatior, Holcus lanatus, Lolium perenne, Phleum pratense, Phragmites communis, Poa pratensis, Ambrosia elatior, Artemisia vulgaris, Chenopodium album, Parietaria judaica, Plantago lanceolata, Salsola kali, Avena sativa, Hordeum vulgare, Secale cereal, Triticum aestivum, Zea mays), пылевых клещей (Acarus siro, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides microceras, Dermatophagoidespteronyssinus, Euroglyphus maynei, lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae), грибов и плесеней (Alternaria alternate, Cladosporium herbarum, Aspergillusfumigatus), эпителиальных аллергенов (кошачья шерсть и перхоть, собачья шерсть и перхоть, лошадиная шерсть и перхоть, человеческие волосы и перхоть, кроличья шерсть и перхоть и перья), аллергенов насекомых (муравья, блох, клещей таракана, осиного и пчелиного яда).

Более предпочтительно исходный материал выбирают из арахиса (Arachis hypogea), пыльцы (Olea europaea, Parietaria judaica, Phragmites communis и Phleum pratense), клещей (Dermatophagoides pteronyssinus) и эпителиального (кошачья перхоть).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения исходный материал выбирают из Arachis hypogeal, Olea europaea, Parietaria judaica, Phleum pratense, Dermatophagoides pteronyssinus, Phragmites communis, Parietaria judaica и кошачьей перхоти.

В еще более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения исходный материал выбирают из Arachis hypogea, Phleum pratense, Phragmites communis, Parietaria judaica и кошачьей перхоти.

В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения аллергеном является Arachis hypogeal.

Когда исходным материалом является арахис, предпочтительно шкурки удаляют, или материал может быть давленным или молотым. Арахис может быть жареным, обжаренным, запеченным или сырым.

Исходный материал могут обрабатывать для создания максимальной площади поверхности для контакта с жидким экстракционным средством. Исходный материал можно гомогенизировать, перемешивать, давить или молоть для получения гомогенной суспензии для жидкостной экстракции. Этап жидкостной экстракции является этапом «обезжиривания» для удаления липофильных соединений, таких как липиды и жирные кислоты, из исходного материала.

Жидкий экстракционный агент может быть ацетоном, который может быть холодным. Этап жидкостной экстракции могут осуществлять в соотношении 1:1 (вес исходного материала/вес жидкого экстракционного средства), или любом отношении, где вес жидкого экстракционного средства превышает вес исходного материала, например, 1:2, 1:3, 1:5, 1:10. Этап жидкостной экстракции предпочтительно осуществляют в соотношении 1 кг исходного материала к 2 л жидкого экстракционного средства. Этап жидкостной экстракции предпочтительно осуществляют в течение достаточного времени для того, чтобы липиды в исходном материале растворились в жидком экстракционном средстве, что может быть более 1 минуты, предпочтительно в течение 5 мин, более предпочтительно в течение 30 минут и наиболее предпочтительно в течение 1 часа или больше. Этап жидкостной экстракции можно осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно осуществляют холодным при температуре от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. В течение этапа жидкостной экстракции, исходный материал предпочтительно размешивают и взбалтывают с жидким экстракционным средством.

Первым этапом разделения может быть фильтрация.

После первого этапа разделения, остаток исходного материала можно промывать с жидким экстракционным средством. Факультативно, остаток исходного материала можно в дальнейшем экстрагировать жидким экстракционным средством, затем разделять. Предпочтительно, осуществляются один, два или более дополнительных этапов жидкостной экстракции. Жидкостная экстракция остатка исходного материала предпочтительно продолжается до тех пор, пока жидкое экстракционное средство не будет оставаться прозрачным после контакта с остатком исходного материала.

После жидкостной экстракции, остаток исходного материала можно высушивать. Остаток исходного материала можно высушивать при температуре от 2 до 25°C, и предпочтительно сушат при комнатной температуре. Этап сушки предпочтительно продолжают в течение достаточного времени для удаления жидкого экстракционного средства из остатка исходного материала, которое может составлять от 1 до 24 часов, от 6 до 18 часов, от 10 до 14 часов, предпочтительно около 12 часов.

Аллергены можно получать из «обезжиренного» остатка исходного материала путем экстракции со средством экстракции аллергена для получения сырого экстракта аллергена, содержащего аллергены, растворенные в жидкой фазе и твердой фазы, включающей «нежелательный», неаллергенный остаток. Средство экстракции аллергена может быть водным раствором и предпочтительно включать буферное средство. Средство экстракции аллергена может включать PBS и/или NaCl, например, раствор 0,01 М PBS/0,15 М NaCl. Остаток исходного материала могут экстрагировать в средстве экстракции аллергена в любом соотношении, где вес средства экстракции аллергена превышает вес остатка исходного материала, например, 1:2, 1:3, 1:5, 1:10, 1:20, 1:50. Предпочтительно, остаток исходного материал экстрагируют в средстве экстракции аллергена в соотношении 1:10 остаток исходного материала: средство экстракции аллергена (вес/вес). Соотношение остатка исходного материала к средству экстракции аллергена на этапе экстракции может варьировать, но должно быть таким, чтобы аллергены в остатке исходного материала могли растворяться в средстве экстракции аллергена. Экстракцию остатка исходного материала со средством экстракции аллергена предпочтительно осуществляют в течение достаточного времени для того, чтобы аллергены в остатке исходного материала растворились в средстве экстракции аллергена, которое может быть от 30 минут до 12 часов, предпочтительно от 1 до 6 часов, более предпочтительно от 2 до 5 часов и наиболее предпочтительно около 4 часов. Этап экстракции аллергена могут осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно осуществляют холодным при температуре от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. На этапе экстракции аллергена, остаток исходного материала предпочтительно перемешивают или взбалтывают со средством экстракции аллергена. После этапа экстракции аллергена, аллергены, растворенные в жидкой фазе, можно отделять от неаллергенного остатка, для получения сырого экстракта аллергена. Этап разделения представляет собой предпочтительно центрифугирование, хотя многие техники для отделения твердого вещества от жидкости применимы, что хорошо известны специалистам в данной области. Предпочтительно, аллергены, растворенные в жидкой фазе, центрифугируют при температуре от 2 до 6°C, предпочтительно от 3 до 5°C, в течение достаточного времени, чтобы осадить неаллергенный остаток в виде гранул, например, от 1 минуты до 1 часа или более 1 часа. Сырой экстракт аллергена (например, супернатант, содержащий растворенные аллергены), можно хранить при температуре при температуре от 2 до 6°C. Гранулу неаллергенного остатка можно дополнительно экстрагировать со средством экстракции аллергена, применяя те же условия, что на первом этапе экстракции аллергена, и желательно на более длительный период экстракции, такой как 4-8 часов, 8-12 часов или более 12 часов. После второго этапа экстракции аллергена, аллергены, растворенные в жидкой фазе, можно отделять от неаллергенного остатка для получения сырого экстракта аллергена. Сырые экстракты аллергена из первого и второго этапов экстракции аллергена предпочтительно объединяют для дальнейшей обработки. Сырой экстракт аллергена могут фильтровать, например, с использованием 0,45 мкм размер пор. Сырой экстракт аллергена могут подвергать этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул, имеющих низкий молекулярный размер, такие как соли и другие неаллергенные соединения. Заявителем экспериментально установлено, что композиция белков и аллергенов экстрактов арахиса является от 8 до 150 кДа, и эти аллергены должны быть сохранены на этапе удаления молекулярной фракции. Например, белок, переносящий липиды (LTP) арахиса — важный аллерген — 8кДа и который необходимо сохранить на протяжении этапа удаления низкомолекулярной фракции. На этапе е) молекулы, имеющие молекулярный размер менее 8 кДа, или 7 кДа, или 6 кДа, или 5 кДа, 4 кДа или 3,5 кДа можно удалять. Этап удаления низкомолекулярной фракции предпочтительно продолжают до тех пор, пока проводимость экстракта аллергена при 3-5°C не будет менее 900 мкСм/см, или менее 800 мкСм/см, или менее 700 мкСм/см, или менее 600 мкСм/см или более предпочтительно менее 500 мкСм/см. Этап удаления низкомолекулярной фракции предпочтительно продолжают до тех пор, пока проводимость экстракта аллергена при 3-5°C не будет от 200 до 1000 мкСм/см, или от 300 до 900 мкСм/см и наиболее предпочтительно от 400 до 800 мкСм/см.

Полученный в результате очищенный нативный экстракт аллергена можно фильтровать, например, с применением 0,45 и/или 0,22 мкм размеров пор.

Нативный экстракт аллергена можно применять в получении фармацевтической композиции или вакцины для целей стандартизации, диагностики, синтеза и вакцинации.

Способ может в дальнейшем включать дальнейший этап обработки, где неаллергенные соединения, адгезирующие к белку аллергена, удаляют с применением средств, которые разрушают электростатические, гидрофобные или других физические силы, которые ответственны за адгезию неаллергенных соединений к белкам. Средства для разрушения электростатических, гидрофобных или других физических сил можно выбирать из группы химических средств, включающей кислотные и щелочные материалы, в том числе анионо- и катионообменные материалы, соли и электрического тока. Кислотные и щелочные химические средства можно применять в количестве, вызывающем превышение изоэлектрической точки белков. Экстракт аллергена, полученный в результате дальнейшего этапа обработки далее по тексту именуется депигментированным экстрактом аллергена.

Дальнейший этап обработки может включать

g) подкисление нативного экстракта аллергена, удаление молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и нейтрализацию pH для получения депигментированного экстракта аллергена.

Дальнейший этап обработки предпочтительно включает мягкую кислотную обработку. При мягкой кислотной обработке pH аллергенных белков может быть понижен до менее чем pH 3, например, значение pH от 2,0 до 2,5. РН аллергенных белков может быть от 2,0 до 6,0. Заявителем экспериментально установлено, что оптимум pH для отсоединения неаллергенных соединений, адгезирующих к аллергенным белкам, является pH от 2,0 до 2,1. Значение pH ниже 2,0 приводит к неполноте белкового профиля депигментированного экстракта аллергена, а недостаточно низкий pH, например, выше 3,0, приводит к неполному удалению неаллергенных соединений в полученном в результате депигментированном экстракте аллергена.

РН нативного экстракта аллергена можно снижать с применением подходящей кислоты, например HCl. Подкисленный экстракт можно хранить при низких pH 1-60 минут, предпочтительно 5-30 минут, более предпочтительно 10-20 минут и наиболее предпочтительно около 15 минут. Молекулы, имеющие молекулярный размер менее 3,5 кДа можно удалять на этапах удаления низкомолекулярной фракции.

После дальнейшего этапа обработки, полученный в результате депигментированный экстракт можно собирать и pH экстракта аллергена можно нейтрализовать с применением подходящих щелочей, например NaOH. РН могут доводить до значения, где избегается осаждение белков, например, выше pH 7,0, предпочтительно pH от 7,0 до 8,0, более предпочтительно pH от 7,0 до 7,5 и наиболее предпочтительно pH от 7,3 до 7,4. Дальнейший этап обработки может включать:

g) подкисление нативного экстракта аллергена до pH 2-2,1 и сохранение подкисленного экстракта в течение 5-30 минут, затем подвержение экстракта этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и доведение pH до 7,3-7,4 для получения депигментированного экстракта аллергена.

Дальнейший этап обработки может включать подкисление нативного экстракта аллергена до pH от 2,0 до 4,0.

Средства для разрушения электростатических сил могут включать электрический ток в форме электрофореза. Неаллергенные соединения могут иметь молекулярную массу менее 8000 Да, 5000 Да и предпочтительно менее чем 3500 и могут включать флавоноиды и/или их гликозиды.

Этап удаления низкомолекулярной фракции может быть этапом диализа, где экстракт диализируют против диализата, такого как очищенная вода или буфер. Этап удаления низкомолекулярной фракции можно осуществлять при температуре от 20 до 25°C, но предпочтительно проводят холодным от 2 до 6°C, а наиболее предпочтительно от 3 до 5°C. Этап удаления низкомолекулярной фракции можно осуществлять в течение 12-24 часов, где растворитель, или в случае диализа, диализат, регулярно меняют для поддержания реакции.

Полученный в результате депигментированный экстракт аллергена можно фильтровать, например, с применением 0,45 мкм и/или 0,22 мкм размера пор, и могут замораживать или лиофилизировать для хранения.

Каждый экстракт, полученный с применением способа настоящего изобретения можно в дальнейшем обрабатывать. Способ может дополнительно включать этап полимеризации, включающий:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с альдегидом и

i) удаление молекул с молекулярным размером менее 100 кДа.

Альдегидом может быть любой подходящий альдегид, к примеру, глутаральдегид или формальдегид.

Этап полимеризации может включать:

h) контакт нативного экстракта аллергена или депигментированного экстракта аллергена с глутаральдегидом или формальдегидом,

i) подвержение экстракта этапу удаления молекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 100 кДа и

j) проведение этапа i) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид для получения полимеризованного экстракта аллергена или депигментированного полимеризованного экстракта аллергена.

Если экстракт полимеризации лиофилизируют, его могут восстанавливать в буфере, например, 0,01М PBS/0,15M NaCl, до конечной концентрации 0,1-500 мг/мл, предпочтительно 1-100 мг/мл и наиболее предпочтительно 10-50 мг/мл.

Реакцию полимеризации предпочтительно осуществляют до завершения, так что полосы белка 100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,013). >100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,02) >100 Отсутствует >100 Депигментированный-полимеризованный (0,018) >100 Отсутствует >100

Пример 3 — Экстракт аллергена пыльцы (Olea euopaea)

Пыльцу Olea euopaea, собранную с дерева после опыления, обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапами В-С способа.

Конечный продукт включает лиофилизированный депигментированный экстракт, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Таблица 4
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 3 (Olea europaea)
Olea europaea Выход(%) ELISA инт.µ (IgE) µ 50% инг. Содержание белка мкг белк/мг. UV-видимый 1 мг/мл Активность НЕР-л/мг
Нативный 3,64 0,009 321,6 1,577 (270 нм) 257,2
Депигментированный рН2 74,0 0,009 307,4 1,302 274(нм) 196,8
Депигментированный pH3 62,0 0,007 324,2 1,365 (274 нм) 204,8
Депигментированный рН4 70,7 0,008 368,7 1,291 (274 нм) 221,3
Депигментированный рН5 78,2 0,009 348,8 1,374 (274 нм) 257,7
Депигментированный рН6 80,2 0,010 402,1 1,348 (274 нм) 247,0

Пример 4 — Экстракт аллергена пыльцы (Parietaria judaica)

Пыльцу Parietaria judaica, собранную с дерева после опыления, обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапом В способа.

Конечный продукт включает лиофилизированный депигментированный экстракт, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Таблица 5
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 5 (Parietaria judaica)
Parietaria judaica Выход (%) ELISA инг. (IgE) мкг 50% инг. Лаури-Биурет мкг белк./мг UV-видимый 1 мг/мл Активность НЕР-л/мг
Нативный 4,07 0,031 219,7 3,073 (266 нм) 1,492(342 нм) 281
Депигментированный рН2 82,7 0,018 197,9 2,680 (270 нм) 1,393(342 нм) 397
Депигментированный рН3 79,5 0,015 228,6 2,943 (270 нм) 1,519 (346 нм) 430
Депигментированный рН4 83,5 0,017 213,5 2,769 (270 нм) 1,463 (348 нм) 534
Депигментированный рН5 79,9 0,012 245,4 2,658 (272 нм) 1,504 (344 нм) 1007
Депигментированный рН6 87,3 0,001 216,2 2,763 (272 нм) 1,539 (344 нм) 954

Пример 5 — Экстракт аллергена клеща (Dermatophasoides pteronyssinus)

Экстракт аллергена клеща получали после этапа В способа от взрослой культуры Dermatophagoides pteronyssinus.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Белковый профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный с помощью SDS-PAGE и 2-D

c. Аллергенный профиль подобный таковому нативного экстракта, определенный иммуноблотом

d. Содержание белков подобное таковому нативного экстракта

e. Содержание аллергенов подобное таковому нативного экстракта

f. Биологическая активность подобная таковой нативного экстракта

Содержание основных аллергенов

Содержание основных аллергенов ((Der p 1 и Der p 2)) измеряли с помощью устанавливаемых в помещении комплектов Biotech Indoor Biotech kits для D. pteronyssinus. Моноклональные антитела IgG к Der p 1 или Der p 2 наносили (1:1000 из флакона, подготовленного в дозе 1 мг/мл для Der p 1 и 2 мг/мл для Der p 2) в лунки полистирольного микропланшета (Nunc Maxisorp). Стандартную кривую получали с применением выраженного количественно и стандартизированного универсального стандарта (суб-стандартизированного против WHO/IUIS D. pteronyssinus контроля, содержащего 2500 нг/мл Der p 1 до 1000 нг/мл Der p 2): разведения контрольной кривой 250-0,49 нг/мл для Der р. 1 и 100-0,2 нг/мл для Der р. 2. Образцы клещей обычно разбавляли в два раза. После промывания пластины, добавляли 100 мкл разбавленного стандарта аллергенов и образцы и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. После промывания пластины, 100 мкл вторичного антитела (моноклональное биотинилированное антитело к IgG) разбавленного 1/1000 добавляли и выдерживали в течение 1 часа при комнатной температуре. После промывания пластины, 100 мкл стрептавидин-пероксидазы, разбавленной 1/1000 добавляли и инкубировали 30 минут при комнатной температуре. Наконец, пластину промывали, проявляли добавлением 100 мкл 1 мМ ABTS в 70 цитрат-фосфатном буфере, pH 4,2 содержащем 1/1000 разбавление 30% H2O2 (т.е. 10 мкл/10 мл ABTS) и считывали, когда оптическая плотность при 405 нм достигает 2,0-2,4.

Пример 6- Экстракт аллергена тростника (Phragmites communis)

Пыльцу Phragmites communis, собранную с дерева после опыления, обезжиривают холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере, три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт пыльцы аллергена получали в соответствии с этапами B-D способа.

На этапе D способ полимеризации состоит из добавления глутаральдегида с использованием параметра 0,015 мл глутаральдегида/мл экстракта.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта Phragmites, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

а. Растворимый в воде продукт

b. Отсутствие неполимеризованных аллергенов/белков с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется в виде полос с помощью SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях)

c. Отсутствие полос IgE-распознавания с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью иммуноблоттинга в невосстанавливающих условиях)

d. Отсутствие полимеризованных молекул с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью гель-хроматографии с HPLC)

e. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

f. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов ELISA IgE ингибирования с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Гранулу, включающую депигментированный/полимеризованный остаток, использовали качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 7а и 7b).

Таблица 7а
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 6 (Phragmites communis)
(Phragmites communis) Выход (остаток) ELISA инг. (IgE) 50% ингибирование (мкг) (% утрата активности) Содержание белка мкг белк./мг Fluram мкг АСА/мг (% уменьшения аминогрупп) UV-видимый 1 мг/мл Поглощение (нм)
Нативный 0,486 240,7 145 1,074 (272 нм)
Депигментированный 0,847 321,5 103 0,844 (274 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 80,7 (2,74) 2,051 329,8 3,6 (95,7) 1,891 (266 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,0045), 80,7 (3,1) 1,217 381,4 6,3 (95,7) 1,897 (268 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,015) 64,8 (4,75) 5,080 306,2 1,6 (98,9) 2,206 (268 нм)
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 25,2 (2,5 5,035 306,1 24,3 (83,2) 1,749 (266 нм)
Таблица 7b
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 6 (Phragmites communis)
Phragmites communis SDS-PAGE (кДа) Иммуноблот (кДа) Молекулярный размер (кДа)
Нативный 10-100 10-100 10-100
Депигментированный 10-100 10-100 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,0045), >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,015) >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,02) >100 Отсутствует >100

Пример 7 Экстракт аллергена эпителия кошки

Кошачью шерсть обезжиривали холодным ацетоном в отношении 1:40 (вес/объем) после пяти минут перемешивания каждый час в течение 7 часов при 3-5°C. Обезжиривание продолжали в течение по меньшей мере 16 часов без перемешивания. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и сохраняли чешуйки. Кошачью шерсть снова обезжиривали таким же количеством ацетона в течение 1 часа при комнатной температуре и процедуру повторяли два раза. Полученные хлопья собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 15 часов, пока материал полностью не высыхал и весь ацетон не был удален.

На этапе В высушенный обезжиренный материал чешуек кожи, полученный из кошачьей шерсти взвешивали и экстрагировали в PBS 0,01 M/NaCl 0,15М в соотношении 1:40 в течение 4 часов при 3-5°C и с магнитным перемешиванием.

Депигментированный полимеризованный экстракт аллергена кошки получали в соответствии с этапами B-D способа.

Конечный продукт состоит из лиофилизированного депигментированного экстракта кошачьего эпителия, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

а. Растворимый в воде продукт

b. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

c. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов IgE REINA конкуренции с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

d. Определение моноклональных антител к основному аллергену Fel d 1.

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Содержание основного аллергена

Содержание основного аллергена Fel d 1 измеряют с помощью устанавливаемого в помещении комплекта Biotech (Indoor Biotech kit) Наносят IgGl моноклональное антитело к Amb а 1 (1:1000 из флакона подготовленного в дозе 1 мг/мл). Стандартную кривую получали с применением Универсального Стандарта Аллергена, который содержит 1000 нм Fel d 1/мл. Вторичное антитело представляет собой биотинилированное моноклональное антитело к IgGl, возникающее в ответ на действие аллергена кошачьего эпителия. Нативные и депигментированные образцы разбавляли до 250 нг/мл. Содержание основных аллергенов рассчитывали для полимеризованных экстрактов с применением этих значений.

Гранулу, включающую депигментированный/ полимеризованный остаток, использовали в качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных и депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 8).

Таблица 8
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 7 (Эпителий кошки)
Эпителий кошки Выход (%) ELISA инг.(IgE) 50% ингибирования (мкг) (% утраты активности) Содержание белка мкг белк./мг Fluram мкг АСА/мг (% уменьшения аминогрупп) UV-видимый 1 мг/мл Поглощение (нм) Активность (HEP л/мг) Fel d 1 мкг/мл
Нативный 10,3 0,029 154 14 0,396 (280 нм) 1488 42
Депигментированный 85,9 0,044 195 10,4 0,428 (280 нм) 1478 42
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 96,2 0,192 171 1,5 (89%) 0,701 (268 нм) 28 8
Депигментированный-полимеризованный (0,013). 92,9 0,373 183 1,3 (90,6%) 0,698 (268 нм) 23 7
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 90,6 0,494 169 1,2 (91,5%) 0,769 (268 нм) 17 2

Пример 8 Экстракт аллергена Phleum pratense

Пыльцу Phleum pratense, собранную с растения после опыления обезжиривали холодным ацетоном в соотношении 1:4 (вес/объем) при непрерывном перемешивании в течение 3 часов при 3-5°C. Полученный в результате раствор фильтровали в воронке Бюхнера и промывали по крайней мере три раза со свежим ацетоном. После окончания процесса, обезжиренный экстракт арахиса собирали и высушивали при комнатной температуре под вытяжкой с ламинарным потоком в течение 12 часов, пока материал не становился полностью сухим и весь ацетон не был удален.

Депигментированный экстракт аллергена Phleum pratense получали в соответствии с этапами B-D способа.

На этапе D способ полимеризации состоит из добавления глутаральдегида с применением коэффициента 0,09 мл глутаральдегида/мл экстракта.

Конечный продукт содержит лиофилизированный депигментированный экстракт Phleum pratense, для хранения при 4°C в лиофилизированных условиях. Полученный в результате продукт должен удовлетворять следующим требованиям:

a. Растворимый в воде продукт

b. Отсутствие неполимеризованных аллергенов/белков с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется в виде полос с помощью SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях)

c. Отсутствие полос IgE-распознавания с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью иммуноблоттинга в невосстанавливающих условиях)

d. Отсутствие полимеризованных молекул с молекулярной массой ниже 100 кДа (определяется с помощью гель-хроматографии с HPLC)

e. Уменьшение свободных аминогрупп (75%) по отношению к нативному экстракту (определяется способом fluram)

f. Значительное уменьшение биологической активности (95%) относительно нативного экстракта (определяется с помощью экспериментов ELISA IgE ингибирования с использованием специфического пула сывороток от сенсибилизированных индивидуумов)

h. Отсутствие аномальной токсичности на мышах

Содержание основного аллергена

Содержание основного аллергена РЫ p 5 измеряли с помощью устанавливаемого в помещении комплекта Biotech (Indoor Biotech kit) Наносили моноклональное антитело IgGl к Phl p 5 (1:1000 из флакона подготовленного в дозе 2 мг/мл). Стандартную кривую получали с применением рекомбинантного Phi p 5а. Вторичное антитело представляет собой биотинилированное моноклональное антитело к IgGl, возникающее в ответ на действие аллергена Phleum pratense. Нативные и депигментированные образцы разбавляют до 250 нг/мл. Содержание основных аллергенов рассчитывают для полимеризованных экстрактов с использованием этих значений.

Гранулу, включающую депигментированный/полимеризованный остаток, использовали в качестве контроля при характеристике нативных, депигментированных и депигментированных/полимеризованных экстрактов (согласно Таблице 9).

Таблица 9
Краткое изложение результатов, полученных для Примера 8 (Phleum pratense)
Phleum pratense Выход (%) ELISA инг. (IgE) 50% ингибирование (мкг) (% утраты активности) Содержание белка мкг белк./мг Активность (HEP л/мг) SDS-PAGEкДа Иммуноблот Молекуляр размер. кДа
Нативный 8,42 0,089 409,9 904,5 10-100 1478 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 45,0 00,341 446,0 35,3 10-100 28 10-100
Депигментированный-полимеризованный (0,009) 98,0 0,305 464,3 13,2 >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,013), 19,85 0,429 420,5 19,3 >100 Отсутствует >100
Депигментированный-полимеризованный (0,02) 57,5 1,274 1234,8 14,4 >100 Отсутствует >100

Ссылки на литературу

1. Vickery, В., Burks, W. Immunotherapy in the treatment of food allergy: focus oral tolerance. Curr. Opin. Allergy Clin. Irnmunol. 2009; 9: 364-370.

2. King, R.M., Knibb, R.C., and Hourihane, J.O.B. Impact of peanut allergy on quality of life, stress and anxiety in the family. Allergy 2009; 64: 461-468.

3. Enrique, E., Pineda, F., Malek, Т., Bartra, J., Basagana, M, Telia, R., Castello, J.V., Alonso, R., de Mateo, J.A., Cerda-Trias, Т., San Miguel-Moncin Mdel, M., Monzon, S., Garcia, M., Palacios, R., Cistero-Bahima, A. Sublingual immunotherapy for hazelnut food allergy: a randomized, double-blind, placebo-controlled study with a standardized hazelnut extract. J. Allergy Clin. Immunol. 2005; 116 (5): 1073-9.

4. Fernandez-Rivas, M., Garrido Fernandez, S., Nadal, J.A., Diaz de Durana, M.D., Garcia, B.E., Gonzalez-Mancebo, E., Martin, S., Barber, D., Rico, P., Tabar, A.I. Randomized double-blind, placebo-controlled trial of sublingual immunotherapy with a Pru p 3 quantified peach extract. Allergy. 2009; 64 (6): 876-83.

5. Hofmann, A.M., Scurlock, A.M., Jones, S.M., Palmer, K.P., Lokhnygina, Y., Steele, P.H., Kamilaris, J., Burks, A.W. Safety of a peanut oral immunotherapy protocol in children with peanut allergy. J. Allergy Clin. Immunol. 2009 May 26.

6. Jones, S.M., Pons, L., Roberts, J.L., Scurlock, A.M., Perry, T.T., Kulis, M., Shreffler, W.G., Steele, P., Henry, K.A., Adair, M., Francis, J.M., Durham, S., Vickery, B.P., Zhong, X., Burks, A.W. Clinical efficacy and immune regulation with peanut oral immunotherapy. J. Allergy. Clin. Immunol. 2009 Aug; 124 (2): 292-300, 300.

7. Clark, A.T., Islam, S., King, Y. Successful oral tolerance induction in severe peanut allergy. Allergy 2009 Aug; 64 (8): 1218-20.

8. Wallace DV. Pet dander and perennial allergic rhinitis: therapeutic options. Allergy Asthma Proc. 2009 Nov-Dec; 30 (6):573-83.

9. Ling M, Long AA Pet dander and diffwult-to-control asthma: Therapeutic options. Allergy Asthma Proc. 2010 Sep; 31(5):385-91.

10. Gronlund H, Saarne T, Gafvelin G, van Hage M. The major cat allergen, Fel d 1, in diagnosis and therapy. Int Arch Allergy Immunol. 2010;151(4):265-74. Epub 2009 Oct 22. Review.

Ссылки на веб-сайты

1 Allergen nomenclature. International Union of Immunological Societies Allergen Nomenclature Sub-Committee. List last update 21 of July 2009.

1. Способ получения экстракта аллергена, включающий:
a) контакт исходного материала, включающего аллерген, с жидким экстракционным средством для получения смеси, содержащей липиды, растворенные в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей остаток исходного материала, включающего аллергены и белки,
b) подвержение смеси первому этапу разделения для выделения остатка исходного материала,
c) контакт остатка исходного материала со средством экстракции аллергенов с получением смеси аллергенов, растворенной в жидкой фазе, и твердой фазы, содержащей неаллергенный остаток,
d) подвержение смеси второму этапу разделения для выделения аллергенов, растворенных в жидкой фазе, с получением сырого экстракта аллергена,
e) подвержение сырого экстракта аллергена этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа, и
f) проведение этапа е) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 1000 мкСм/см при 3-5°C для получения очищенного нативного экстракта аллергена,
g) подкисление нативного экстракта аллергена до pH от 2 до 4,0 и сохранение подкисленного экстракта в течение 5-30 минут, затем подвержение экстракта этапу удаления низкомолекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 3,5 кДа и доведение pH до 7,0 -8,0 с получением депигментированного экстракта аллергена,
h) контакт депигментированного экстракта аллергена с глутаральдегидом или формальдегидом,
i) подвержение депигментированного экстракта аллергена этапу удаления молекулярной фракции для удаления молекул с молекулярным размером менее 100 кДа и
j) проведение этапа i) до тех пор, пока экстракт аллергена не будет иметь проводимость ниже 210 мкСм/см при 3-5°C и/или будет отсутствовать глутаральдегид, что определяется УФ (UV) или видимым сканированием, для получения депигментированного полимеризованного экстракта аллергена.

2. Способ по п. 1, где этап удаления низкомолекулярной фракции продолжают до тех пор, пока проводимость не будет менее 500 мкСм/см при 3-5°C.

3. Способ по п. 1, где нативный экстракт аллергена подкисляют до pH от 2 до 2,1.

4. Способ по п. 1, где нативный экстракт аллергена подкисляют до pH от 2,0 до 3,0.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где альдегид добавляют к экстракту со скоростью добавления от 0,001 до 0,5 мл в минуту.

6. Способ по любому из пп. 1-4, где этап удаления молекулярной фракции продолжают до тех пор, пока проводимость не будет от 50 до 200 мкСм/см при 3-5°C.

7. Способ по любому из пп. 1-4, где этапы удаления низкомолекулярной фракции е) или g) включают этап ультрафильтрации, этап диафильтрации, этап диализа или фильтрования.

8. Депигментированный полимеризованный экстракт аллергена, получаемый согласно способу по любому из пп. 1-7.

9. Экстракт аллергена по п. 8, где исходный материал выбран из пищевых аллергенов, переносимых по воздуху аллергенов, грибов, аллергенов клещей, эпителиальных аллергенов и аллергенов насекомых.

10. Экстракт аллергена по п. 9, где пищевой аллерген представляет собой арахис.

11. Экстракт аллергена по п. 9, где переносимый по воздуху аллерген представляет собой пыльцу.

12. Экстракт аллергена по п. 9, где клещи представляют собой пылевые клещи.

13. Экстракт аллергена по п. 9, где эпителиальные аллергены представляют собой шерсть животных или перхоть животных.

14. Экстракт аллергена по п. 9, где грибы представляют собой плесень.

15. Экстракт аллергена по п. 9, где аллергены насекомых выбраны из аллергена таракана, аллергена блох, яда пчелы и яда осы.

16. Экстракт аллергена по п. 11, где пыльца выбрана из древесной пыльцы, пыльцы травы и пыльцы зерновых.

17. Экстракт аллергена по п. 16, где пыльца травы представляет собой пыльцу сорных трав.

18. Экстракт аллергена по п. 13, где шерсть животных представляет собой кошачью шерсть или собачью шерсть, перхоть животных представляет собой кошачью перхоть или собачью перхоть.

19. Экстракт аллергена по п. 11, где пыльца представляет собой пыльцу Olea europaea, пыльцу Parietaria judaica, пыльцу Phragmites communis и пыльцу Phleum pratense.

20. Экстракт аллергена по п. 9, где клещи представляют собой Dermatophagoides pteronyssinus.

21. Экстракт аллергена по любому из пп. 8-20 для применения в лечении аллергии.

22. Экстракт аллергена по любому из пп. 8-10 для применения в лечении аллергии на арахис.

23. Фармацевтическая композиция для лечения аллергии, включающая экстракт аллергена по любому из пп. 8-20.

24. Фармацевтическая композиция по п. 23, дополнительно включающая одно или более чем одно вспомогательное вещество, разбавитель, консервант или их смесь.

25. Вакцина для лечения аллергии, включающая экстракт аллергена по любому из пп. 8-20.

26. Вакцина по п. 25, дополнительно включающая одно или более чем одно вспомогательное вещество, разбавитель, консервант или их смесь.

Аллергия на lepidoglyphus destructor м у подростков

Несмотря на запоздалую весну, берёза, да и другие деревья пылят уже давно, а припозднившиеся холода и дожди только растянули страдания аллергиков во времени. Отчего страдают эти люди? В этой заметке я попытаюсь популярно рассказать о причинах возникновения поллинозов, а заодно коснусь и других аллергических эпидемий, охвативших индустриально развитые страны в последние 150 лет, — бронхиальной астмы, атопического дерматита и пищевой аллергии.

Итак, индустриально развитые страны в преамбуле я выделил не случайно. Дело в том, что перечисленные аллергии совершенно не актуальны в сообществах, которые мы считаем малоцивилизованными (в контексте нашей темы их принято характеризовать как pre-hygiene = догигиенические) (ссылки здесь и здесь). Невозможно отыскать сопливящего на пыльцу ребенка в африканских деревнях или астматика среди индейцев Южной Америки. Зато аллергические заболевания в полной мере поражают этих же людей при переселении в крупные города. Так что же не так с нашей цивилизацией?

Начну с аллергоэпидемии, которая возникла первой, — с поллиноза. Поллиноз или сенная лихорадка — это аллергическая реакция на пыльцу растений, которая выражается в форме риноконъюнктивита (иногда с астматическими реакциями) в период цветения тех или иных растений, т. е. в отличие от круглогодичной аллергии со схожей симптоматикой на кошек или домашнюю пыль, поллинозы характеризуются четкой сезонностью.

В наши дни поллинозы весьма обыденны, и даже не верится, что впервые человечество столкнулось с этой проблемой лишь во второй половине 19 века, когда сенную лихорадку (hay fever) описали англичанин Чарльз Блэкли и американец Моррил Вайман. Оба верно связали появление большого числа пациентов с симптомами сезонного насморка и зудящими слезящимися глазами (= риноконъюнктивит) с пыльцой. Тогда в Англии произошла сельскохозяйственная реформа, позволившая закупать много дешевой пшеницы из Одессы, так что собственные пашни туманного Альбиона пришли в запустение и на них массово процвёл занесенный из южных областей Европы плевел многолетний (Lolium perenne), который сами англичане назвали английским райграсом. Вскоре этот злак заполонил и поля в США, так что в 1946 году в Нью-Йорке была объявлена кампания по истреблению райграса из-за возникшей на него массовой аллергии. Плевел знаменит особо обильным пылением и именно этот вид растений ознаменовал эру поллинозов. Америка не долго оставалась в долгу и вскоре подарила Европе, а затем и всему миру жутко аллергенную амброзию (Ambrosia artemisiifolia). Ученые сделали вполне логичный вывод, что сенная лихорадка возникает на экзотичные растения, на которые особо чувствительные люди реагируют слезами, насморком и чиханьем.

Однако экзотами дело не ограничилось и вскоре жители городов засопливели и на родные берёзки и травки. Почему так произошло? Ответ очевиден: для этих людей экзотами становились уже и местные растения, в том смысле, что постоянный контакт с их пыльцой в течение года (как это бывает в деревнях, где пыльца сохраняется в составе домашней пыли многие месяцы) сокращался и накапливающаяся в период цветения в городском доме пыльца становилась для детского организма полной неожиданностью. В общем и целом феномен связан с изоляцией детей от природы, что особенно чревато в первые 5 лет жизни, когда иммунитет учится толерантности к неопасным антигенам.

На что возникают поллинозы?

В наше время среди жителей России (да и в Европе тоже) преобладает весенний поллиноз на березу. Реже отмечаются реакции на пыльцу клена, тополя, лещины (орешника), дуба, ясеня, сосны и другие деревья. В июле поллинозы вызывают злаки, а в августе аллергики реагируют на амброзию. Отчего-то в нашей стране распространён миф об аллергии на тополиный пух. Эту чушь я слышу не только от пациентов, но и от некоторых аллергологов. На самом деле аллергии на целлюлозу (тополиный пух — тот же хлопок) быть не может, поскольку все описанные аллергии возникают только на белки. Реагируют не на пух, а на белковые и гликопротеиновые аллергены в составе невидимой пыльцы цветущих в это же время злаковых трав.

Но и это не всё. Проблема не ограничивается изменением контакта городского ребенка с пыльцой, — в отличие от детей «догигиенической» (pre-hygiene) культуры, наши дети ограждаются и от множества других естественных субстанций, а это ведёт к тому, что особенно восприимчивые (что определяется генетически) воспринимают даже безобидные антигены как аллергены, т. е. реагируют на эти чужеродные белки аллергией. Улучшение санитарно-гигиенических условий жизни горожан привело к тому, что люди стали меньше сталкиваться с глистными инвазиями (особенно с аскаридами из-за меньшего контакта с почвой), с кишечными инфекциями из-за введенного в первой половине 20 века хлорирования воды, меньше стали ходить босиком и контактировать с почвенными бактериями, дети стали меньше соприкасаться со скотиной, собаками и кошками, при этом стали избыточно часто мыться, нарушая микрофлору и проницаемость кожи (ссылка). Разворачивающиеся на протяжении последних 150 лет факторы изоляции детей от доселе привычных антигенов можно перечислять часами. У развившегося в таких близких к стерильным условиях ребенка иммунитет не тренирован или, как говорят врачи, не толерантен и бурно реагирует даже на безобидные антигены — белки в составе фекалий пылевых клещей и тараканов, спор плесневых грибков, слюны кошек и собак. При умеренных концентрациях этих антигенов во вдыхаемом воздухе дело ограничивается тем же риноконъюнктивитом, а при массированном воздействии начинают реагировать и бронхи.

Бытовой клещ Dermatophagoides pteronyssinus рыщет по ковру в поисках перхоти.

Тенденция к возрастающей изоляции младенцев от природной среды с её антигенным разнообразием и одновременное накопление большого количества отдельных, не свойственных внешней среде, антигенов в квартирах, в которые начали массово переселяться жители «цивилизованных» стран, привело к развитию эпидемии бронхиальной астмы в 1970-х. Ведущую роль здесь сыграли пылевые клещи (Dermatophagoides sp.), чьи фекалии содержат ряд антигенов, в том числе остатки пищеварительных ферменты (антиген Der p 1), которые клещи используют для переваривания кератина кожи и которые способны «проедать» кожу и слизистые при массированном воздействии. Бытовая пыль на четверть состоит из слущённого эпителия кожи людей и домашних питомцев, а именно им питаются пылевые клещики. Уменьшение жилищ в объёме, плохая их продуваемость, захламление коврами и прочими пылесборниками, а также повсеместное отопление в холодные сезоны, создали благоприятнейшие условия для обитания клещей в городских квартирах. В некоторых странах (Финляндия, Швеция) ведущими аллергенами для развития бронхиальной астмы стала перхоть кошек и в меньшей степени собак, а в нищих сообществах (например, в черных районах США) эпидемии астмы нередко обусловлены выделениями тараканов, при этом важно учитывать, что в большинстве случаев эти астмы развиваются у детей, которые растут в домах без домашних животных и обилия тараканов, но которые, подрастая, сталкиваются с ними у соседей.

Ситуация усугубилась и тем, что дети стали гораздо больше времени проводить в помещениях — уже в конце 50-х появились детские телепередачи, начала нарастать родительская паранойя по поводу детских простуд (которые связывались почему-то со свежим воздухом), а в последние годы дети так плотно засели за компьютерные игры и прочие гаджеты, что и сами превратились в стационарные приставки к электронным устройствам. Это привело не только к более продолжительному вдыханию и втиранию в кожу пыли с клещевыми белками и другими домашними аллергенами, но и к другой важной проблеме — у малоподвижных детей лёгкие дышат недостаточно глубоко, что обусловливает предрасположенность к бронхоспазму и к так называемой неспецифической гиперреактивности бронхов из-за нарушения развития в них гладкой мускулатуры (ссылки здесь и здесь). Сегодняшние родители могут сильно удивиться, узнав, что до 1960-х в учебниках по педиатрии бронхиальная астма если и упоминалась, то как редкое заболевание, — так разительно изменилась ситуация всего за полвека!

Фекалии пылевых клещей содержат не только белки, вызывающие дыхательные аллергии, их более крупные аллергены с молекулярным весом порядка 100 кДа способны сенсибилизировать организм генетически предрасположенного ребенка через кожу, формируя атопические дерматиты (ссылка). Советская медицина разделяла экссудативный диатез у детей и экзему и нейродермит у взрослых, но относительно недавно мы начали читать зарубежную литературу и поняли, что это одно и то же заболевание на разных этапах его развития. Теперь эти нозологии сведены к атопическому дерматиту. Впрочем, некоторые отечественные педиатры до сих пор полагают, что диатез у детей — это какая-то особая кожная реакция и не знают о ключевой роли пылевых клещей в его патогенезе, перекладывая всю вину на неправильное питание ребёнка.

В 1990-х в США, а затем и в Европе заговорили о новой напасти — аллергии на арахис, сенсибилизация на который, как это теперь известно, развивается через руки (ссылка) — дети стали есть жаренные орехи руками, которые часто моют с мылом, что удаляет защитное кожное сало и повышает проницаемость кожи (ссылка). В последние годы заговорили и о других пищевых аллергиях, в частности к мясу, сенсибилизация на которое возникает после присасывания лесных клещей (ссылки здесь, здесь и здесь).

Если при поллинозах симптомы возникают сразу после вдыхания пыльцы, то реакции при бронхиальной астме, некоторых пищевых аллергиях и при атопических дерматитах (экземе) могут отсрочиваться или становиться хроническими, приобретая иммуновоспалительный характер даже при отсутствии запускающего аллергена.

Т. о. комбинация нарастающих санитарно-гигиенических мер и изоляции детей от естественной среды с её антигенным разнообразием стала причиной появления всех аллергоэпидемий.

Эти выводы подтверждаются и лабораторно: у детей и взрослых из «догигиенических» сообществ высок общий титр аллергических антител (total serum IgE), но при этом они имеют антитела IgE к множеству окружающих их антигенов (пылевым клещам, аскаридам, пыльце и т. д.), причем к каждому понемногу (в низких титрах). В «цивилизованных» сообществах наблюдается обратная картина – общий титр антител IgE невысок, тогда как специфические антитела к отдельным аллергенам наработаны в очень высоких титрах (ссылки здесь, здесь и здесь). Образно говоря, перемещение современного ребёнка из мультиантигенной среды в олигоантигенную само по себе не дает иммунитету «расфокусироваться» по множеству субстанций, так что он задействует весь свой арсенал против всего нескольких антигенов, которые к тому же часто представлены в городской среде в неестественно высоких концентрациях. А дальше дело усугубляется малоподвижностью и рядом других подспудных факторов жизни в цивилизации.

Аллергии обусловлены развитием гиперчувствительности I типа ( = немедленного типа). При этом сначала организм сенсибилизируется на антиген (чужеродный белок), вырабатывая на него специфические антитела (= иммуноглобулины) IgE. При повторном столкновении с тем же антигеном, который уже стал аллергеном, с ним реагируют наработанные антитела и развивается обильный выброс из тучных клеток и базофилов биоактивных веществ (медиаторов аллергии), основным из которых является гистамин. В принципе, в подобных ситуациях эти медиаторы призваны играть защитную роль — они вызывают сокращение бронхов, препятствуя дальнейшему вдыханию чужеродного белка-аллергена, а также увеличивают проницаемость капилляров, чтобы выделить больше слизи, а с нею высморкать и вычихать осевший на слизистых дыхательных путей чужеродный белок (а вдруг это инфекция?!). Однако беда в том, что при аллергии эта реакция избыточна и направлена на безобидную субстанцию. Если сенсибилизированный аллергик сталкивается с большим количеством аллергена, у него могут возникнуть жизнеугрожающие состояния, как то отёк Квинке на слизистой гортани (можно задохнуться) или анафилактический шок.

Это всё я описал очень упрощенно. Если хотите подробней и владеете английским, посмотрите это видео:

Как я уже отметил, аллергии развиваются только у генетически предрасположенных к ним людей. Беда только в том, что таковых — четверть популяции. У большинства детей (80%) организм всё же выработает толерантность ( = десенсибилизируется) к аллергенам в подростковом возрасте и аллергия пройдет сама собой, но так повезёт не всем. Если новоиспеченные родители или их ближайшие родственники страдают описанными формами аллергии (или страдали ими в детстве), есть смысл сделать всё возможное, чтобы предотвратить развитие таких же реакций у ребенка. Если вы внимательно прочли пост, то должны уловить основной посыл: в первые 5 лет жизни ребенка важно знакомить с большим разнообразием естественных антигенов окружающей среды и одновременно с этим надо делать всё возможное, чтобы в квартире не скапливались аллергены, отсутствующие во внешней среде (особенно пылевые клещи):

  • Избавляйтесь от домашней пыли

— удалите пылесборники типа напольных ковров и домашнего хлама
— чаще проветривайте помещения
— не пользуйтесь пылесосами, а делайте влажные уборки
— постельное и нательное бельё малыша стирайте при температуре не менее 60 °С

  • Приучайте ребенка чаще ходить босиком в доме, а в теплые дни и на природе. Заведите комнатные растения и привлекайте детей к уходу за ними для контакта рук с почвой.
  • Обязательно ежедневно гуляйте с малышом, желательно вблизи скверов/парков/лесов, там, где есть растения — потенциальные виновники поллинозов.
  • Подрастающий ребёнок должен как можно больше времени проводить на улице, активно при этом двигаясь. Постарайтесь, чтобы малыш не подсел на телевизор или смартфон.
  • Боритесь со своей родительской паранойей по поводу питания малыша — избегание определенных продуктов без прямых противопоказаний может привести к тому, что именно на них возникнет аллергия. Поменьше ведитесь на рекламу со словом «гипоаллергенный».
  • Не приучайте ребенка мыть руки с мылом без необходимости (явного загрязнения).
  • Не изолируйте ребенка от сверстников, особенно если у него нет старших братьев и сестёр.

Для профилактики никак не поможет изоляция малыша от потенциальных аллергенов. Доказано, что удаление домашних питомцев из квартиры или исключение арахиса из рациона питания ребенка не только не предупреждают развития сенсибилизации, но напротив — в дальнейшем может развиться особо тяжелая форма аллергии. Исследования показывают, что постоянный контакт с животным с самого рождения снижает риск развития аллергии вообще и на питомцев в частности (ссылка), точно так же и употребление в пищу арахиса в первые 5 лет жизни успешно профилактирует аллергию на этот орех (ссылка). Всё это применимо и к прочим аллергенам.

О лечении всех аллергических заболеваний писать не стану, ограничусь аллергией на пыльцу.

Если аллергия уже возникла, приходится избегать контактов с аллергеном, но в случае поллиноза изолироваться от пыльцы очень непросто.

Важно помнить и о перекрестной аллергии, когда реакция развивается и на другие сходные по структуре аллергены в растительных продуктах питания. Например, при поллинозе на берёзу могут быть (могут и не быть) реакции в форме пищевой аллергии (чаще это синдром оральной аллергии) на сырые яблоки, груши, персики, сливы, киви, морковь, сельдерей, нежареные миндаль и фундук. При аллергии на пыльцу амброзии пациенты могут реагировать на дыню, огурцы, бананы, семена подсолнечника. Посоветуйтесь с врачом, чтобы определиться с целесообразными ограничениями по диете.

  • Самым эффективным методом лечения является АСИТ = антигенспецифическая иммунотерапия. Суть лечения заключается в постепенной десенсибилизации организма путем введения в него (подкожно или под язык) аллергена в нарастающих дозировках. С помощью АСИТ от аллергии можно избавиться раз и навсегда. Рекомендую препараты западного производства. Лечиться надо курсами (начиная с ноября-декабря) в течение 3-5 лет. Подробнее здесь, здесь и здесь.
  • В сезон цветения многие люди прибегают к промыванию носа солевым раствором. Выпускаются промышленные комплексы, в состав которых входят не только растворы или порошки для их приготовления, но и специальные удобные устройства (Аква Марис®, Аквалор®, Хьюмер® и др.). Лучше покупать прыскалки для непрерывного орошения. Из подручных средств для самостоятельного промывания можно использовать чайничек с узким носиком, спринцовку, поршень от шприца или просто зашмыгивать из ладошки. Приготовить физраствор для промывания легко: 1 чайная ложка с горкой (10 граммов) очищенной поваренной соли на литр чистой кипяченой воды комнатной температуры.

В качестве симптоматической терапии применяются традиционные средства, большинство из которых были разработаны до того, как я закончил мединститут:

  • Антигистаминные препараты

В моём детстве широко применялись АП I поколения (димедрол, Пипольфен®, Супрастин®, Диазолин®, Тавегил®, Фенкарол®). К сожалению эти препараты блокируют не только гистаминовые рецепторы, поскольку гистамин имеет структурное сходство с другими физиологически активными веществами нашего организма, — адреналином, серотонином, ацетилхолином, дофамином. Отсюда множество побочных эффектов: тошнота, рвота, потеря аппетита, дискомфорт в эпигастрии, сухость слизистых, расстройства мочеиспускания и др. Кроме того, эти лекарства легко преодолевают гемато-энцефалический барьер, проникают в мозг и потому нередко вызывают сонливость, головокружение, звон в ушах, двоение в глазах, нарушение координации и снижение потенции.

АП II поколения (лоратадин = Кларитин®, терфенадин = Терфед®, эбастин = Кестин®, цетиризин = Зиртек® = Цитрин® и др.) блокируют только гистаминовые рецепторы и не проникают в центральную нервную систему, однако по сути являются пролекарствами — активные лекарства из них образуются только в печени под действием цитохромов, а поскольку цитохромы в популяции очень вариабельны, превращение АП II поколения в активные метаболиты может существенно отличаться у разных людей, а от этого зависит сила лечебного эффекта.

АП III поколения (фексофенадин = Телфаст® = Аллегра®, дезлоратадин = Эриус® = Дезлоратадин-Тева®, левоцетиризин = Ксизал®) являются первично активными метаболитами, влияют не только на раннюю (гистаминозависимую), но и на позднюю (клеточную) фазу аллергической реакции, помогая устранить сопли, чиханье и заложенность носа, а также предотвращая астматическую реакцию при поллинозе.

  • Назальные кортикостероиды (глюкокортикоиды)

Эти препараты не оказывают системного действия на организм (чего опасаются многие обыватели). Всё чаще они прописываются врачами как препараты первой линии и становятся самым эффективным и безопасным для длительного применения средством для многих пациентов с поллинозами.

  • Альфа-адреномиметики (деконгестанты)

Это очень, я бы даже сказал, избыточно популярные у нас лекарства на основе нафазолина (Нафтизин®, Санорин®), ксилометазолина (Ксимелин®, Ксилен®, Галазолин®, Длянос®, Отривин®, Снуп®) и оксиметазолина (Називин®, Назол®, Африн®). Очень важно помнить, что α-адреномиметики нельзя применять более 1 недели кряду, а еще лучше ограничиваться 2-3 днями.

Именно на этих лекарственных средствах в медицинских вузах разбирают явление тахифилаксии. Тахифилаксия — это способность организма реагировать на повторное введение лекарственного средства понижением восприимчивости вплоть до полного прекращения лечебного эффекта. Таким образом, если закапывать нос более 5 дней, сосуды перестают суживаться, и в итоге слизистая оболочка носа вновь отекает и начинает обильно продуцировать слизь. Что же делает сопливый обыватель при развитии у него тахифилаксии на капли? Как правило, начинает орошать нос чаще и обильнее. В итоге у него развивается так называемый медикаментозный ринит, а такую заложенность носа лечить приходится уже хирургически, чтобы разрушить подслизистые сосудистые сплетения носовых раковин и не дать им увеличиваться за счет кровенаполнения. Не всем, правда, диагноз медикаментозного ринита вовремя устанавливают, и такие больные нередко подолгу и совершенно безуспешно лечатся у аллергологов или ЛОР-врачей.

С гораздо меньшим риском можно использовать деконгестанты на основе фенилэфрина и псевдоэфедрина.

  • Кромоны (стабилизаторы мембран тучных клеток)

Суть фармакодинамики этих лекарств заключается в том, что они препятствуют выбросу гистамина, лейкотриенов и других медиаторов аллергии из тучных клеток. Препараты кромогликата натрия и недокромила натрия в форме жидкости или порошка для вдыхания не имеют серьезных побочных эффектов и во всем мире отпускаются без рецепта. Их можно использовать по нескольку раз на дню, но наибольшего эффекта от кромонов достигают, когда они применяются до возникновения симптомов. К этой же группе относится и таблетированный кетотифен (в глазных каплях — Задитен®). Пить таблетки надо длительно, так как отчетливый терапевтический эффект развивается только через 10-12 недель. Кромоны очень хороши при поллинозах с астматическим компонентом.

  • Антилейкотриеновые средства

Препараты блокируют дейстие лейкотриентов, которые наряду с гистамином являются активными медиаторами аллергической реакции. Особенно эффективны в лечении аллергий с астматическими симптомами. Монтелукаст (Сингуляр®, Алмонт®, Монтелар®, Монтеласт®) принимается в форме таблеток. Может вызывать головную боль и различные психические расстройства, потому применять его следует под наблюдением врача.

  • М-холинолитики

Ипратропиум бромид (Атровент®) применяется как сам по себе, так и в комбинации с фенотеролом (Беродуал®), сальбутамолом (Ипрамол Стери-Неб®) и ксилометазолином (Ксимелин®) в форме ингаляционных препаратов. Это лекарство блокирует М-холинорецепторы на гладкомышечных и секреторных клетках бронхов, уменьшая бронхоспазм и продукцию слизи, а также на тучных клетках, что препятствует высвобождению из них медиаторов аллергии. Назальный Атровент хорошо сушит нос, однако не снимает его отека и не избавляет от чихания. Его нельзя применять при аденоме простаты, глаукоме и других заболеваниях, так что прежде чем попробовать, всегда советуйтесь с врачом.

Добавить комментарий